發(fā)布時(shí)間：2017-09-02 20:41

  本文關(guān)鍵詞：Ⅰ型登革病毒NS1蛋白檢測(cè)體系的建立及在2014年廣東登革疫情診斷中的應(yīng)用

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【摘要】：目的以Ⅰ型登革病毒(DENV)非結(jié)構(gòu)蛋白1(NS1)為免疫原制備NS1特異性單克隆抗體,建立Ⅰ型登革病毒NS1抗原特異性檢測(cè)方法,并應(yīng)用于廣東以Ⅰ型登革感染為主的臨床血清標(biāo)本檢測(cè)。方法用原核表達(dá)的重組登革病毒NS1蛋白和滅活的Ⅰ型登革病毒免疫Balb/c小鼠,通過細(xì)胞融合,間接ELISA、免疫熒光和免疫印跡鑒定,獲得DENV1NS1特異性單克隆抗體并建立檢測(cè)方法。結(jié)果共獲得26株Ⅰ型登革病毒NS1蛋白特異性結(jié)合的單抗。通過對(duì)26株1型登革病毒NS1蛋白特異性單抗進(jìn)行多株抗體組合配對(duì),最終篩選出最佳抗體組合。該組合檢測(cè)DENV1病毒培養(yǎng)上清的檢測(cè)限為1∶16 384(12.5 pfu/ml),且與其他3個(gè)血清型登革病毒、乙型腦炎病毒和黃熱病毒均無交叉反應(yīng),對(duì)500份健康人血清標(biāo)本檢測(cè)中,陰性標(biāo)本497例,臨界3例,對(duì)發(fā)病0~13 d的836份臨床確診的登革熱患者血清檢測(cè)的敏感性為85.6%,明顯高于q RT-PCR檢測(cè)體系(66.3%)(P0.001),亦明顯高于病毒分離診斷率(P0.001)。結(jié)論成功獲得了1組DENV1-NSl蛋白的特異性單克隆抗體,利用該組抗體建立了1種敏感性和特異性更好的只針對(duì)DENV1-NS1蛋白的雙抗體夾心檢測(cè)方法,且比其他方法能夠覆蓋更寬泛的時(shí)間范圍,該方法可作為登革熱早期診斷的工具。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部;南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院
【關(guān)鍵詞】： 登革病毒 非結(jié)構(gòu)蛋白 單克隆抗體
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金(2015A030313268) 廣東省科技計(jì)劃(2014A020212492) 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)基金(A2015135)
【分類號(hào)】：R512.8;R446.6
【正文快照】： 隨著全球氣候變暖、人口增長(zhǎng)和城市化等因素影響,登革熱的發(fā)病率逐年上升。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì),全球每年超過1億人感染登革病毒,其中50萬人發(fā)展成為登革出血熱,死亡人數(shù)超過25 000人。自1978年以來,我國(guó)南方頻發(fā)登革熱的小規(guī)模流行,近年來疫情更為嚴(yán)峻,2002年、2006年和2014年在廣東省

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 肖維威,馬文麗,鄭夔,黃吉城,鄭文嶺;用多重PCR快速檢測(cè)登革病毒并分型[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2004年05期

2 鄭夔,張欣,周惠瓊,柯昌文;應(yīng)用多重PCR技術(shù)快速鑒定登革病毒[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2005年04期

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本文編號(hào)：780819