本文關(guān)鍵詞：敗血癥患者解甘露醇羅爾斯頓菌分離與鑒定及其耐藥基因分析

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【摘要】：目的：對一例病因不明敗血癥患者外周血中病原菌進(jìn)行分離及鑒定,同時(shí)了解分離菌株耐藥性并分析耐藥相關(guān)基因。方法：采集雙份敗血癥患者外周血標(biāo)本分離劃線接種于血平板上,370C常規(guī)培養(yǎng)24 h。挑取單個(gè)菌落用革蘭染色鏡檢以及VITEK2-compact全自動(dòng)細(xì)菌檢測分析系統(tǒng)進(jìn)行菌種鑒定,然后采用16S rRNA基因PCR及產(chǎn)物測序進(jìn)一步確定菌種鑒定結(jié)果。采用微量二倍稀釋法對分離菌株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)。采用β-內(nèi)酰胺酶、超廣譜p-內(nèi)酰胺酶確證試驗(yàn)以及AmpC酶和碳青霉烯酶表型試驗(yàn),了解分離菌株產(chǎn)酶情況及類型。采用PCR分別檢測腸桿菌科細(xì)菌19種常見β-內(nèi)酰胺酶或超廣譜β-內(nèi)酰胺酶、AmpC酶和碳青霉烯酶基因以及21個(gè)注釋為解甘露醇羅爾斯頓菌β-內(nèi)酰胺酶基因(GenBank Accession No.:CP010799, CP010800, AJ270257),擴(kuò)增產(chǎn)物T-A克隆后測序。結(jié)果：上述血標(biāo)本中分離出同一革蘭陰性短桿菌,VITEK2-compact全自動(dòng)細(xì)菌檢測分析系統(tǒng)及其GN細(xì)菌鑒定卡鑒定為解甘露醇羅爾斯頓菌,鑒定值=99%,鑒定編碼4003611303500001。PCR及其產(chǎn)物測序結(jié)果顯示,該解甘露醇羅爾斯頓菌分離菌株16S rRNA基因擴(kuò)增片段核苷酸序列與GenBank中公布的相應(yīng)基因序列(Accession No.:AJ270257)相似性為100%。解甘露醇羅爾斯頓菌分離株對頭孢曲松、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、替加環(huán)素、復(fù)方新諾明敏感,但對頭孢他啶、阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林、替卡西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、氨曲南、慶大霉素、阿米卡星、呋喃妥因耐藥。所有19種腸桿菌科細(xì)菌常見耐藥相關(guān)酶類基因PCR擴(kuò)增結(jié)果均為陰性,但可擴(kuò)增出TK4909850、TK4912955、TK4914470、TK4914495、TK4918990五個(gè)解甘露醇羅爾斯頓菌β-內(nèi)酰胺酶基因條帶。與GenBank中相應(yīng)解甘露醇羅爾斯頓菌β-內(nèi)酰胺酶基因序列(Accession No.:CP010799, CP010800, AJ270257)比較,解甘露醇羅爾斯頓菌分離株TK49_09850、TK49_12955、TK49_14470、TK49_14495、TK49_18990β-內(nèi)酰胺酶基因核苷酸和氨基酸序列相似性分別高達(dá)96.2%(737/766)和96.2%(251/261)、97.3%(838/861)和99.0%(283/286)、100%(795/795)和100%(264/264)、97.5%(980/1005)和98.8%(330/334)、97.5%(807/828)和97.1%(267/275),但與上述腸桿菌科細(xì)菌常見β-內(nèi)酰胺酶或超廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因序列相似性很低。結(jié)論：該敗血癥患者感染的病原體為罕見的解甘露醇羅爾斯頓菌。該解甘露醇羅爾斯頓分離菌株有較高耐藥性但對不同β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥性有較大差異,其β-內(nèi)酰胺酶基因與腸桿菌科細(xì)菌常見β-內(nèi)酰胺酶基因完全不同。
【關(guān)鍵詞】：解甘露醇羅爾斯頓菌 敗血癥 分離鑒定 耐藥 β-內(nèi)酰胺酶基因
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R515.3;R446.5
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 引言11-14
• 1. 研究背景11-12
• 2. 研究內(nèi)容12
• 3. 技術(shù)路線12-14
• 第一章 解甘露醇羅爾斯頓菌臨床分離株的分離及鑒定14-27
• 1.1 材料14-15
• 1.2 方法15-23
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-26
• 1.4 小結(jié)26-27
• 第二章 解甘露醇羅爾斯頓菌臨床分離株的耐藥性及β-內(nèi)酰胺酶的表型檢測27-32
• 2.1 材料27
• 2.2 方法27-29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-31
• 2.4 小結(jié)31-32
• 第三章 解甘露醇羅爾斯頓菌臨床分離株β-內(nèi)酰胺酶耐藥基因的檢測32-51
• 3.1 材料32-33
• 3.2 方法33-37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-50
• 3.4 小結(jié)50-51
• 討論51-54
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 綜述58-67
• 參考文獻(xiàn)64-67
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：767530