本文關(guān)鍵詞：巨噬細胞過表達miR-125b促進其凋亡

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【摘要】：目的探討肺結(jié)核患兒外周血單個核細胞(PBMC)中miR-125b和靶基因Raf1原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(RAF1)表達;觀察miR-125b對巨噬細胞凋亡和細胞活力的調(diào)節(jié)。方法收集和分離肺結(jié)核患兒和健康兒童的PBMC,采用熒光定量PCR檢測miR-125b和RAF1的mRNA表達水平,Western blot法檢測RAF1的蛋白水平。THP-1巨噬細胞分別轉(zhuǎn)染miR-125b模擬物(miR-125b mimic)、陰性對照模擬物(NC-mimic)、miR-125b抑制物(miR-125b inhibitor)以及陰性對照抑制物(NC-inhibitor),共培養(yǎng)48 h;利用Western blot法檢測THP-1巨噬細胞中RAF1表達,異硫氰酸熒光素標記的膜聯(lián)素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)雙染色結(jié)合流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡,CCK-8法檢測細胞活力。結(jié)果在結(jié)核患兒PBMC的miR-125b表達下調(diào),RAF1的mRNA和蛋白水平都升高。在THP-1巨噬細胞中過表達miR-125b時,RAF1表達下調(diào),促進巨噬細胞凋亡,降低細胞活力;在THP-1巨噬細胞中miR-125b表達被抑制時,RAF1表達升高,抑制巨噬細胞凋亡,提高細胞活力。結(jié)論結(jié)核患兒PBMC中miR-125b水平降低,上調(diào)THP-1巨噬細胞miR-125b水平促進巨噬細胞凋亡并抑制細胞活力。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院消化科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院感染科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒科研究所兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室兒童發(fā)育重大疾病國家國際科技合作基地兒科學(xué)重慶市重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： miR-b Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(RAF) THP-巨噬細胞 細胞凋亡
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071406) 重慶市醫(yī)學(xué)科研項目計劃(20142046)
【分類號】：R521
【正文快照】： 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染人體所引起的慢性傳染性疾病,為可致人死亡的嚴重疾病之一,威脅著兒童的健康。2015年世界衛(wèi)生組織全球結(jié)核病報告[1]顯示,在2014年有新發(fā)和復(fù)發(fā)結(jié)核病兒童共計約35.8萬人,比2013年增加大約30%,其

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本文編號：739825