本文關(guān)鍵詞：念珠地絲菌對五種抗真菌藥的體外敏感性及電鏡觀察

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【摘要】：目的:近年來,系統(tǒng)性真菌感染的發(fā)病率在不斷上升,很多都是致命性感染,所以條件致病菌,尤其是罕見條件致病菌引起的感染事件應(yīng)引起足夠重視。念珠地絲菌(Geotricum sivicola)是新近發(fā)現(xiàn)的一種罕見地絲菌,目前國內(nèi)已有3例報道,因此對于條件致病菌的治療顯得尤為重要。目前藥品市場上可供選擇的抗真菌藥物很多,但各個藥物對不同真菌的敏感性差異很大,且隨著抗真菌藥的廣泛應(yīng)用,耐藥菌株的報道逐年增多。所以,研究并尋找抗真菌的敏感藥物,對日后的臨床工作有著重要指導(dǎo)意義。朱敬先等已經(jīng)對該菌進(jìn)行了一系列的研究,但地絲菌病的最佳治療方法尚無定論。本次試驗分為兩部分,第一部分是運用肉湯稀釋法檢測念珠地絲菌對五種抗真菌藥的體外敏感性,判定標(biāo)準(zhǔn)為美國的酵母樣真菌敏感性的界定標(biāo)準(zhǔn)。第二部分是在體外藥敏試驗的基礎(chǔ)上應(yīng)用掃描電鏡觀察經(jīng)特比萘芬作用后念珠地絲菌的微觀形態(tài)學(xué)變化。本次試驗從微觀形態(tài)學(xué)角度詳細(xì)觀察了特比萘芬對念珠地絲菌的破壞作用,為臨床治療念珠地絲菌感染提供新的指導(dǎo)依據(jù),為抗菌作用機制的研究也奠定了一定的基礎(chǔ)。方法:1抗真菌藥對念珠地絲菌MIC值的測定1.1菌懸液的制備將菌種復(fù)蘇并轉(zhuǎn)種后在無菌條件下,用生理鹽水沖洗斜面,在血細(xì)胞計數(shù)板上計數(shù),再用RPMI-1640液體培養(yǎng)基稀釋,得到念珠地絲菌及質(zhì)控菌濃度均為1~5×105cfu/ml的菌懸液。1.2抗真菌藥的藥液制備將實驗所用五種藥物各自溶解,配成實驗所需的貯存液,于-20℃冰箱保存。實驗時用RPMI-1640培養(yǎng)基以2倍梯度稀釋,獲得10個2倍于終濃度的藥液。1.3藥液及菌懸液的接種把所配置的五種藥物的10個濃度按序放入96孔板的前10個孔,將RPMI-1640培養(yǎng)基加入11~12孔,然后在1~11孔中分別加入菌懸液,在第12孔僅加入RPMI-1640培養(yǎng)基。將實驗板培養(yǎng)于37℃的恒溫培養(yǎng)箱里,連續(xù)培養(yǎng)5天后讀取結(jié)果。1.4結(jié)果判讀依據(jù)NCCLS M27-A2標(biāo)準(zhǔn),讀取藥物對兩菌株的MIC值,將質(zhì)控菌株的MIC值與參考值對比,只有不超過參考值標(biāo)準(zhǔn)實驗數(shù)據(jù)才算作有意義。運用統(tǒng)計學(xué)方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。2掃描電鏡標(biāo)本的制備將特比萘芬組中濃度0.000156μg/ml、0.00125μg/ml、0.01μg/ml、0.08μg/ml及陽性對照孔中的液體分別收集到5個無菌試管中,送掃描電鏡室。結(jié)果:1抗真菌藥對念珠地絲菌的MIC值(μg/ml)伊曲康唑:0.0625~0.5、兩性霉素B:0.125~1、氟胞嘧啶:1~16、氟康唑:0.5~16、特比萘芬:0.0025~0.04。2特比萘芬作用念珠地絲菌前后掃描電鏡觀察經(jīng)不同濃度特比萘芬作用5d后,掃描電鏡顯示念珠地絲菌的菌絲體出現(xiàn)了不同程度的破壞。特比萘芬濃度0.000156μg/ml作用下,菌絲表面變得粗糙不光滑、凹凸不平;濃度0.00125μg/ml作用下,菌絲皺癟、粗細(xì)不一;濃度0.01μg/ml作用下,菌絲形態(tài)明顯改變,出現(xiàn)不規(guī)則缺損和蟲蝕狀孔洞;濃度0.08μg/ml作用下,菌絲體被徹底破壞呈現(xiàn)碎片狀;陽性對照孔中的菌體表面光滑飽滿,菌絲粗細(xì)均勻。結(jié)論:1在體外藥敏試驗中,念珠地絲菌對伊曲康唑顯示劑量依賴性敏感,對特比萘芬、兩性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑均顯示敏感。其中特比萘芬的MIC值最低,對念珠地絲菌的抗菌活性最強。2通過掃描電鏡觀察菌體的微觀形態(tài)變化,證實特比萘芬具有強大的抗念珠地絲菌活性,且隨著藥物濃度的增加菌絲被破壞的程度逐漸加重。
【關(guān)鍵詞】：念珠地絲菌 抗真菌藥 最低抑菌濃度 微觀形態(tài)學(xué) 掃描電鏡
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R519
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-14
• 結(jié)果14-15
• 附圖15-18
• 附表18-19
• 討論19-22
• 結(jié)論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-25
• 綜述 梅毒實驗室檢查的研究進(jìn)展25-31
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 致謝31-32
• 個人簡歷32

【相似文獻(xiàn)】

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1 易芬賢;念珠地絲菌引起腸道機會感染一例[J];臨床檢驗雜志;1995年01期

2 鐘偉,盧森;膀胱念珠地絲菌感染1例報告[J];深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志;1995年04期

3 ;[J];;年期

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1 武麗寧;念珠地絲菌對五種抗真菌藥的體外敏感性及電鏡觀察[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號：685995