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基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因檢測(cè)方法的建立與評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2017-06-30 04:05

  本文關(guān)鍵詞:基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因檢測(cè)方法的建立與評(píng)價(jià),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的基于多重聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)建立一種快速方便的檢測(cè)副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的方法。方法結(jié)合副溶血弧菌"大流行菌群"的群特異鑒定方法 GS-PCR,與副溶血弧菌致病相關(guān)的耐熱直接溶血素基因(tdh)和耐熱直接溶血素相關(guān)溶血素基因(trh)序列設(shè)計(jì)引物,建立并優(yōu)化多重PCR檢測(cè)方法。用已知的大流行菌株和非大流行臨床分離株,對(duì)其進(jìn)行特異性、靈敏度等性能的評(píng)價(jià)。并對(duì)224株食品分離株和3株臨床分離株副溶血弧菌進(jìn)行了再鑒定。結(jié)果副溶血弧菌"大流行菌群"有群特異PCR標(biāo)識(shí)基因和tdh擴(kuò)增條帶。而其他細(xì)菌擴(kuò)增結(jié)果呈陰性。檢測(cè)靈敏度可達(dá)到105CFU/ml。對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的224株食品分離株和3株臨床分離株進(jìn)行再鑒定表明,其中5株為副溶血弧菌"大流行菌群",其中3株為tdh陽(yáng)性、trh陰性,2株tdh、trh均陰性。結(jié)論本研究所建立的多重PCR方法特異性好、靈敏度高。為副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的快速大規(guī)模檢測(cè)提供良好的技術(shù)支持。
【作者單位】: 河北省疾病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】副溶血弧菌 大流行菌群 耐熱直接溶血素 耐熱直接溶血素相關(guān)溶血素 群特異PCR 多重PCR
【基金】:2013年度河北省省級(jí)重大醫(yī)學(xué)科研課題(No.zd2013067)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R516.3;R440
【正文快照】: 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一種嗜鹽的革蘭陰性菌,廣泛分布于水生環(huán)境及無(wú)脊椎動(dòng)物中,也是常見(jiàn)的食源性致病菌。與引起人類(lèi)胃腸炎的臨床分離株相比,環(huán)境分離株普遍缺乏耐熱直接溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)、TDH相關(guān)溶血素(TDH-related hemolysi

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本文編號(hào):500475

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