本文關(guān)鍵詞：1例慢性HIV-1感染者體內(nèi)CD4結(jié)合位點(diǎn)特異性記憶B細(xì)胞分選及抗體表達(dá)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過抗原特異性記憶B細(xì)胞(Memory B)分選、抗體基因克隆表達(dá)和鑒定方法,從艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者中獲得HIV-1中和抗體,并進(jìn)一步探討獲得抗體的特征。方法通過檢測血漿中和抗體活性和表位篩選,挑選出1例含有CD4結(jié)合位點(diǎn)(CD4bs)特異性抗體的慢性HIV-1感染者。采用一對含有/缺失CD4-bs的探針RSC3/ΔRSC3進(jìn)行Memory B分選,獲得抗體可變區(qū)基因后進(jìn)行抗體的表達(dá)純化,并檢驗(yàn)所得抗體的結(jié)合能力和中和能力。結(jié)果從9×106外周血單核淋巴細(xì)胞(PBMCs)中分離得6個(gè)特異性Memory B。通過反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)分別擴(kuò)增出3對重鏈和輕鏈可變區(qū)基因,配對得到3個(gè)抗體,其中有一個(gè)抗體具有HIV-1CD4bs結(jié)合能力。中和實(shí)驗(yàn)表明,這個(gè)抗體能中和毒株SF162[50%抑制濃度(IC50=0.89μg/mL]�？贵w可變區(qū)基因家系分析表明,該抗體屬于IGHV1-18家系,重鏈可變區(qū)(VH)自體突變率為12%,低于廣譜中和抗體VRC01VH的自體突變率(32%)。結(jié)論建立的單克隆特異性Memory B分選方法,可以獲得有中和能力的抗體。該平臺有希望獲得具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的廣譜中和抗體,并為開發(fā)抗體藥物和設(shè)計(jì)新型免疫原提供技術(shù)支持。
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 艾滋病病毒型 廣譜中和抗體 CD結(jié)合位點(diǎn) 單個(gè)B細(xì)胞分選
【基金】：國家十二五重大傳染病防治研究項(xiàng)目(2014ZX10001001-002) 傳染病預(yù)防控制國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室基金(2012SKLID103;2015SKLID506) 中國疾病預(yù)防控制中心青年基金(2013A102)~~
【分類號】：R512.91
【正文快照】： Supported by the National Science and Technology Major Project(2014ZX10001001-002);SKLID Developmentgrant(2012SKLID103,2015SKLID506);China CDC Youth Fund(2013A102)近來研究表明,一些慢性艾滋病病毒1型(Hu-man immunodeficiency virus,HIV-1)感染者體內(nèi)能夠產(chǎn)生較

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王曉輝;馮鐵建;石向東;陳琳;羅賢如;柯躍斌;;胞內(nèi)細(xì)胞因子染色分析艾滋病人CD4~+ T淋巴細(xì)胞Th1/Th2漂移[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2007年10期

2 汪朝暉;廖玉華;袁t，

本文編號：493472