發(fā)布時(shí)間：2017-06-25 23:07

  本文關(guān)鍵詞：干血斑和血清樣本用于檢測(cè)乙型肝炎病毒DNA及耐藥突變的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的驗(yàn)證干血斑(DBS)樣本替代靜脈血血清樣本用于檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)基因診斷的可行性。方法選擇慢性乙型肝炎患者100例,血清HBV的病毒載量1×102拷貝/m L,抽取靜脈血同時(shí)制備DBS樣本和血清樣本,進(jìn)行HBV DNA定量檢測(cè),比較DBS與血清樣本檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性。選取73例基因型主要為B、C型的患者,進(jìn)行DBS和血清樣本基因型檢測(cè)的比較。同時(shí)隨機(jī)選取56例乙型肝炎患者的DBS和血清樣本,采用實(shí)驗(yàn)室自建的套式聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增HBV的逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)區(qū)段,通過(guò)geno2pheno數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行結(jié)果分析,比較二者耐藥性的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 DBS樣本HBV DNA的檢測(cè)范圍為2~8 log10拷貝/m L,與血清樣本HBV DNA的檢測(cè)結(jié)果高度相關(guān)(r2=0.82,P0.05),DBS樣本HBV DNA定量值比血清樣本低1個(gè)數(shù)量級(jí)。2種樣本HBV耐藥性檢測(cè)結(jié)果的總符合率為95.83%;DBS和血清樣本耐藥狀態(tài)的檢出率分別為82.14%和85.71%(P0.05)。2種樣本HBV基因分型結(jié)果的符合率為100.00%。結(jié)論 DBS樣本可用于HBV DNA的定量及耐藥性的檢測(cè)。
【作者單位】： 上海市公共衛(wèi)生臨床中心醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科;上海市公共衛(wèi)生臨床中心應(yīng)急檢測(cè)和生物安全部;
【關(guān)鍵詞】： 干血斑 乙型肝炎病毒 DNA 耐藥性
【基金】：上海市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)西醫(yī)引導(dǎo)類(lèi)項(xiàng)目(124119a1200) 上海市衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)科研課題青年項(xiàng)目(20144Y0075)
【分類(lèi)號(hào)】：R512.62;R440
【正文快照】： HBV DNA檢測(cè)。采用ABI 7500和Gene Amp PCRsystem 9700(美國(guó)Applied Biosystem公司)進(jìn)行熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chainreaction,PCR)。三、方法1.DBS和血清樣本的HBV DNA檢測(cè)和相關(guān)性分析(1)DBS樣本的制備:50μL全血制作1個(gè)單位DBS樣本,室溫自然干燥,4℃保存,檢測(cè)時(shí)

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