目的:擬在實驗室內(nèi)研究伊維菌素(IVM)對白紋伊蚊體內(nèi)2型登革病毒(DENV 2)生長和繁殖是否具有抑制作用,初步探索IVM具有這一抑制作用的機制,為后續(xù)研究,乃至將IVM應(yīng)用于登革熱蚊媒防控而特異性殺滅白紋伊蚊體內(nèi)2型登革病毒提供理論基礎(chǔ)。方法:一是通過開展病原體人工感染蚊媒的實驗,確定蚊蟲體內(nèi)病原體感染率高低、載量大小,及它們隨飼養(yǎng)時間變化趨勢等媒介效能相關(guān)參數(shù),闡明影響實驗的相關(guān)因素,包括受試對象、病毒類型、人工感染方式、血餐中病毒載量、人工感染以及飼養(yǎng)時環(huán)境溫度與濕度等,從而建立理想的白紋伊蚊人工感染DENV 2實驗室模型(n=20,設(shè)3個重復,此處樣本量為最終納入統(tǒng)計分析數(shù)量,下同);二是分別在白紋伊蚊吸食含DENV2血餐時(n≥30)和吸食后第4天(n≥20,設(shè)3個重復),通過血餐給予各濃度IVM干預(yù),飼養(yǎng)至第10天,檢測各組蚊蟲體內(nèi)DENV2感染率、病毒載量;分析各干預(yù)點蚊蟲感染率、病毒載量隨伊維菌素濃度變化趨勢。三是通過比較吸食DENV2血餐后,病毒載量降低或轉(zhuǎn)陰組、上升或不變組間白紋伊蚊(n≥20)體內(nèi)11個miRNA(包括miR-4448、miR-1767、miR-...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖４吸血中的白紋伊蚊??Ｔｈｅ?ｂｌｏｏｄ－ｆｅｅｄｉｎｇ?ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ??１０??

（一）材料??１、白紋伊蚊??本研宄受試對象為３？５日齡白紋伊蚊馴化蚊（圖４），由中國疾病預(yù)防控制??中心寄生蟲病預(yù)防控制所提供。蚊蟲養(yǎng)殖的條件為：溫度２８±１°Ｃ，相對濕度??（７０±１０）％，自然光照，幼蟲以鼠食喂食，成蚊以１０％葡萄糖水維持喂食，羽化??后３？５日齡時用于實....

圖５白紋伊蚊成蚊伺養(yǎng)或人工感染情形?

圖５白紋伊蚊成蚊伺養(yǎng)或人工感染情形?圖６自制改進的吸蚊器??Ｔｈｅ?ｓｉｔｕａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ａｅｄｅｓ?ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ?ｒｅａｒｉｎｇ?ｏｒ?Ｔｈｅ?ｓｅｌｆ－ｉｍｐｒｏｖｅｄ?ｍｏｓｑｕｉｔｏ?ｔｒａｐ??ｂｅｉｎｇ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＤＥＮＶ?２??ｅ）質(zhì)量....

圖７?４０倍物鏡下半貼壁匸６／３６細胞?

二、結(jié)果??（一）細胞培養(yǎng)情況??貼壁Ｃ６／３６及ＢＨＫ－２１細胞如圖７，８，９。本次研究中，Ｃ６／３６細胞培養(yǎng)至第４??天時長滿９０％培養(yǎng)瓶瓶底，故４天可傳一代；同理，ＢＨＫ－２１細胞３天可傳一代。??為獲得更高濃度的細胞，本實驗采用開口?Ｔ－７５培養(yǎng)瓶培養(yǎng)傳代細胞，經(jīng)細胞計?....

圖１１１０倍物鏡下正常Ｃ６／３６細胞?

圖１１１０倍物鏡下正常Ｃ６／３６細胞?圖１２?１０倍物鏡下感染ＤＥＮＶ?２的Ｃ６／３６細胞?空泡??Ｔｈｅ?ｎｏｒｍａｌ?Ｃ６／３６?ｃｅｌｌｓ?ｕｎｄｅｒ?ｔｈｅ?ｌ〇ｘ?Ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?Ｃ６／３６?ｃｅｌｌｓ?ｗｉｔｈ?ＤＥＮＶ?２?ｕｎｄｅｒ?ｔｈｅ??ｏｂｊｅｃ....

本文編號：3981857