目的探討結(jié)核分枝桿菌(MTB)Fad D9重組蛋白在活動(dòng)性肺結(jié)核診斷中的價(jià)值。方法制備Fad D9重組蛋白并進(jìn)行鑒定,使用C57BL/6小鼠模型評(píng)估其免疫原性。以Ag85A蛋白為陽(yáng)性參照抗原,檢測(cè)145例活動(dòng)性肺結(jié)核患者(活動(dòng)性肺結(jié)核組)、38例結(jié)核患者密切接觸者(MTB密切接觸組)和101名體檢健康者(正常對(duì)照組)血清樣本中Fad D9重組蛋白的特異性抗體水平,將Fad D9重組蛋白作為抗原與58例肺結(jié)核患者、34例非肺結(jié)核患者的全血樣本37℃共孵育20～24 h后,采用γ-干擾素釋放試驗(yàn)(IGRA)檢測(cè),將檢測(cè)結(jié)果與IGRA試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比對(duì),并采用受試者工作特征(ROC)曲線分析Fad D9重組蛋白診斷結(jié)核病的敏感性和特異性。結(jié)果 Fad D9重組蛋白可在C57BL/6小鼠體內(nèi)引起較高水平的體液免疫反應(yīng),且與陽(yáng)性參照抗原Ag85A接近。活動(dòng)性肺結(jié)核組抗Fad D9抗體水平高于MTB密切接觸組和正常對(duì)照組(P<0.000 1),MTB密切接觸組與正常對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。抗Ag85A抗體水平3組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。R...

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圖1FadD9重組蛋白的制備和鑒定結(jié)果

檢測(cè)抗原免疫后小鼠血清中的IgG(H+L）效價(jià)可評(píng)估抗原激起的體液免疫水平。FadD9重組蛋白的A值變化與陽(yáng)性參照抗原Ag85A蛋白基本一致，均高于陰性對(duì)照組。FadD9重組蛋白的血清抗體滴度達(dá)1∶12800，與陽(yáng)性參照抗原Ag85A蛋白接近。見(jiàn)圖2。采用ELISA分別檢測(cè)小鼠....

圖2FadD9免疫小鼠血清抗體水平

活動(dòng)性肺結(jié)核組抗FadD9抗體水平高于MTB密切接觸組和正常對(duì)照組（P<0.0001),MTB密切接觸組與正常對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）�？笰g85A抗體水平3組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)圖3。圖3活動(dòng)性肺結(jié)核組、MTB密切接觸組及正常對(duì)照組F....

圖3活動(dòng)性肺結(jié)核組、MTB密切接觸組及正常對(duì)照組FadD9重組蛋白和Ag85A蛋白特異性抗體水平的比較

圖2FadD9免疫小鼠血清抗體水平2.4FadD9蛋白T細(xì)胞表位預(yù)測(cè)結(jié)果

圖4FadD9重組蛋白T細(xì)胞表位預(yù)測(cè)結(jié)果

將FadD9重組蛋白和Ag85A蛋白作為抗原與肺結(jié)核組和非肺結(jié)核組的全血樣本37℃共孵育20～24h，然后進(jìn)行IGRA，將檢測(cè)結(jié)果與試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比對(duì)。ROC曲線分析結(jié)果顯示，F(xiàn)adD9重組蛋白診斷肺結(jié)核的曲線下面積（areaundercurve,AUC）為0.682....

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