泡球蚴囊液對肝細(xì)胞生存能力的影響及初步機(jī)制探索
發(fā)布時間:2023-02-08 21:40
目的:1.通過測定肝泡型包蟲病(HAE)患者肝臟組織中凋亡、自噬相關(guān)標(biāo)記物及DDIT4的表達(dá)情況;初步探索凋亡、自噬及DDIT4在泡型包蟲病中的作用及三者間的相互作用機(jī)制。2.通過體外實驗探索泡球蚴源性囊液對肝細(xì)胞生存能力的影響,在細(xì)胞水平驗證泡球蚴囊液是否可誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生。方法:1.采用免疫組化染色、q-PCR及Western blot檢測15例患者病灶邊緣帶肝組織及同患者正常肝組織中caspase3,Bax,Bcl-2,LC3-I,LC3-II,Beclin-1,m TOR及DDIT4的表達(dá),并分析DDIT4與凋亡、自噬相關(guān)標(biāo)記物的相關(guān)性;2.用泡球蚴源性囊液干預(yù)體外培養(yǎng)的小鼠肝細(xì)胞AML-12,檢測細(xì)胞增殖能力及細(xì)胞活力變化,并結(jié)合流式細(xì)胞儀凋亡檢測試驗判斷泡球蚴源性囊液對肝細(xì)胞的影響。結(jié)果:1.組織免疫組化、q-PCR及Western blot實驗結(jié)果表明:caspase3,Bax,LC3-I,LC3-II,Beclin-1及DDIT4的m RNA及各蛋白在HAE邊緣帶肝組織及正常肝組織均有不同程度表達(dá),且上述指標(biāo)在HAE邊緣帶肝組織的表達(dá)高于正常肝組織;而Bcl-2及m TO...
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
中英文對照表
第一章 引言
第二章 凋亡、自噬相關(guān)標(biāo)記物及DDIT4在臨床患者中的表達(dá)
2.1 資料與方法
2.1.1 研究對象
2.1.2 實驗材料
2.1.3 實驗步驟及方法
2.1.4 統(tǒng)計分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 免疫組化檢測凋亡、自噬及DDIT4等蛋白在邊緣帶及正常肝組織表達(dá)結(jié)果
2.2.2 q-PCR檢測凋亡、自噬及DDIT4 等蛋白在邊緣帶及正常肝組織表達(dá)結(jié)果
2.2.3 Western blot檢測凋亡、自噬及DDIT4 等蛋白在邊緣帶及正常肝組織表達(dá)結(jié)果
2.2.4 DDIT4與凋亡、自噬相關(guān)標(biāo)記物相關(guān)性分析
2.3 討論
第三章 泡球蚴囊液對小鼠肝細(xì)胞生存能力的影響
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗動物及細(xì)胞
3.1.2 主要試劑及儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 構(gòu)建泡球蚴小鼠模型及泡球蚴囊液提取
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及原頭節(jié)培養(yǎng)上清干預(yù)小鼠肝細(xì)胞
3.2.3 原頭節(jié)培養(yǎng)上清對小鼠AML-12肝細(xì)胞增殖能力及細(xì)胞活力影響的檢測
3.2.4 流式細(xì)胞儀測凋亡
3.3 統(tǒng)計分析
3.4 實驗結(jié)果
3.4.1 原頭節(jié)培養(yǎng)上清對小鼠 AML-12 肝細(xì)胞增殖的影響
3.4.2 原頭節(jié)培養(yǎng)上清對小鼠 AML-12 肝細(xì)胞活力的影響
3.4.3 原頭節(jié)培養(yǎng)上清干預(yù)小鼠AML-12肝細(xì)胞后凋亡檢測結(jié)果
3.5 討論
第四章 全文結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A 綜述 自噬的研究進(jìn)展及在肝臟等疾病中的作用
參考文獻(xiàn)
作者簡介
本文編號:3738421
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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中文摘要
Abstract
中英文對照表
第一章 引言
第二章 凋亡、自噬相關(guān)標(biāo)記物及DDIT4在臨床患者中的表達(dá)
2.1 資料與方法
2.1.1 研究對象
2.1.2 實驗材料
2.1.3 實驗步驟及方法
2.1.4 統(tǒng)計分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 免疫組化檢測凋亡、自噬及DDIT4等蛋白在邊緣帶及正常肝組織表達(dá)結(jié)果
2.2.2 q-PCR檢測凋亡、自噬及DDIT4 等蛋白在邊緣帶及正常肝組織表達(dá)結(jié)果
2.2.3 Western blot檢測凋亡、自噬及DDIT4 等蛋白在邊緣帶及正常肝組織表達(dá)結(jié)果
2.2.4 DDIT4與凋亡、自噬相關(guān)標(biāo)記物相關(guān)性分析
2.3 討論
第三章 泡球蚴囊液對小鼠肝細(xì)胞生存能力的影響
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗動物及細(xì)胞
3.1.2 主要試劑及儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 構(gòu)建泡球蚴小鼠模型及泡球蚴囊液提取
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及原頭節(jié)培養(yǎng)上清干預(yù)小鼠肝細(xì)胞
3.2.3 原頭節(jié)培養(yǎng)上清對小鼠AML-12肝細(xì)胞增殖能力及細(xì)胞活力影響的檢測
3.2.4 流式細(xì)胞儀測凋亡
3.3 統(tǒng)計分析
3.4 實驗結(jié)果
3.4.1 原頭節(jié)培養(yǎng)上清對小鼠 AML-12 肝細(xì)胞增殖的影響
3.4.2 原頭節(jié)培養(yǎng)上清對小鼠 AML-12 肝細(xì)胞活力的影響
3.4.3 原頭節(jié)培養(yǎng)上清干預(yù)小鼠AML-12肝細(xì)胞后凋亡檢測結(jié)果
3.5 討論
第四章 全文結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
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附錄A 綜述 自噬的研究進(jìn)展及在肝臟等疾病中的作用
參考文獻(xiàn)
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本文編號:3738421
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