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嗅素蛋白4對卡介苗誘導巨噬細胞凋亡和細菌胞內(nèi)生存率的影響

發(fā)布時間:2022-12-08 20:55
  目的探討嗅素蛋白4(OLFM4)對卡介苗(BCG)感染的巨噬細胞RAW264.7凋亡及BCG存活率的影響及機制。方法采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測OLFM4 mRNA表達水平。采用免疫印跡法檢測OLFM4及凋亡相關蛋白Bcl-2和Bax的表達。采用平板菌落計數(shù)法分析BCG存活率,通過酶聯(lián)免疫吸附試驗評估巨噬細胞凋亡率。結(jié)果 BCG感染的巨噬細胞RAW264.7中OLFM4 mRNA和蛋白表達水平均顯著升高,并呈時間依賴性。此外,敲除OLFM4能夠抑制BCG誘導的細胞凋亡,同時增加抑凋亡蛋白Bcl-2表達,降低促凋亡蛋白Bax的表達。OLFM4沉默使RAW264.7細胞中BCG生存率明顯升高。機制研究結(jié)果顯示,下調(diào)OLFM4可抑制p-p65和TLR2的表達,進而阻斷TLR2/NF-κB信號通路。結(jié)論沉默OLFM4可能通過阻斷TLR2/NF-κB信號通路抑制BCG誘導的巨噬細胞RAW264.7凋亡,從而增加BCG存活率,初步闡明了OLFM4在巨噬細胞抗BCG感染中的作用機制,為結(jié)核。═B)的診斷和治療奠定了理論基礎。 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 RAW264.7細胞培養(yǎng)
        1.2.2 BCG感染小鼠巨噬細胞RAW264.7
        1.2.3 細胞轉(zhuǎn)染
        1.2.4 RT-PCR檢測mRNA表達水平
        1.2.5 免疫印跡法檢測蛋白表達
        1.2.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測細胞凋亡
        1.2.7 BCG生存力檢測
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 OLFM4在BCG誘導的巨噬細胞RAW264.7中的表達
    2.2 OLFM4對BCG誘導的巨噬細胞凋亡的影響
    2.3 OLFM4對巨噬細胞RAW264.7中BCG存活率的影響
    2.4 沉默OLFM4阻斷BCG介導的TLR2/NF-κB信號通路
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本文編號:3714122

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