2015年以來,寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）感染被報告和小頭癥之間存有關(guān)聯(lián),已有多個國家和地區(qū)報告ZIKV感染證據(jù),我國持續(xù)面對ZIKV輸入風(fēng)險。為發(fā)展適用于現(xiàn)場的快速高效的ZIKV核酸檢測方法,選取ZIKV NS1片段保守區(qū)設(shè)計特異性引物探針,經(jīng)優(yōu)化建立了多種功能蛋白介導(dǎo)的ZIKV RNA恒溫快速擴增檢測方法。利用所制備的ZIKV NS1片段體外轉(zhuǎn)錄RNA作為參考品,并與實時熒光定量RT-PCR檢測結(jié)果進行比較。同時利用ZIKV細胞培養(yǎng)物中加入健康人血清制備的模擬臨床標(biāo)本進行初步驗證。結(jié)果顯示,建立的RNA恒溫快速擴增檢測方法可100%檢出100拷貝/μL體外轉(zhuǎn)錄RNA,可在15 min以內(nèi)判讀,大大低于PCR的常規(guī)檢測時間;用該方法檢測其他相關(guān)病毒,無交叉反應(yīng)。病毒滴度在（10~4～10~7PFU/mL）之間的模擬臨床病人標(biāo)本可達到100%檢出。本研究建立的ZIKV RNA恒溫擴增快速檢測方法快速、靈敏、特異,適用于ZIKV現(xiàn)場應(yīng)急檢測,為ZIKV的防控提供了重要的技術(shù)支撐。 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 實驗?zāi)０寮皹颖?br>    2 主要實驗試劑及儀器
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 引物探針設(shè)計
    4 實時熒光RNA恒溫快速擴增
    5 靈敏性評價
    6 特異性評價
    7 模擬臨床標(biāo)本驗證
結(jié)果
    1引物探針篩選結(jié)果
    2靈敏性評價
    3特異性評價
    4模擬臨床標(biāo)本驗證
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]寨卡病毒檢測方法的研究進展[J]. 李浪,李華文,顧大勇,何建安.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2018(05)
[2]病毒性出血熱概述[J]. 黃曉霞,李德新.  中國國境衛(wèi)生檢疫雜志. 2018(02)
[3]深圳口岸輸入寨卡病毒的基因和生物學(xué)特性分析[J]. 王強,楊揚,鄭海霞,畢玉海,宋敬東,李力強,顧大勇,王培毅,李世華,劉升,趙迎澤,劉磊,高福,劉映霞.  科學(xué)通報. 2016(22)
[4]寨卡病毒疫情及研究進展[J]. 程錦泉,王興鮑,魏雅臻,洪烈城,鮑雪琴,符霞.  中國公共衛(wèi)生. 2016(05)
[5]寨卡病毒研究現(xiàn)況及疫情形勢[J]. 鄭陽,王全意.  國際病毒學(xué)雜志. 2016 (02)



本文編號：3665014