背景Zika病毒與新生兒小頭癥存在因果關(guān)系,目前已經(jīng)迅速擴散到數(shù)十個國家和地區(qū),構(gòu)成國際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件。Zika病毒有兩個基因型:非洲亞型和亞洲亞型,美洲爆發(fā)的Zika病毒屬于后者。Zika病毒為包膜病毒,包膜上具有M和E兩種蛋白,其中E蛋白是參與受體結(jié)合和融合的主要蛋白,且E蛋白存在的唯一N-糖基化位點Asn-154能夠影響這個過程。本次流行及一些非洲亞型Zika病毒E蛋白存在潛在糖基化位點,然而部分非洲亞型Zika病毒此糖基化位點缺失。我國也有輸入性Zika病毒的報道。目的本研究目的是通過一株本次流行的輸入性Zika病毒毒株ZKC2/2016在鼠腦連續(xù)傳代,篩選導(dǎo)致Zika病毒毒力增強的基因突變,并進一步分析相關(guān)突變導(dǎo)致致病力增強的機制,為Zika病毒致病因子的深入研究及病毒致病機理的研究提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。進而為Zika疫苗的研制提供研究思路和理論基礎(chǔ),同時為特效藥物的開發(fā)設(shè)計指明研究方向,提供有根據(jù)的針對性強的作用靶點。方法1.建立Zika病毒鼠適應(yīng)株。（1）利用Zika毒株ZKC2/2016在新生1日齡BALB/c乳鼠腦內(nèi)連續(xù)傳代,篩選致疾病表型增強的Zika毒株... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．全球范圍內(nèi)Ｚｉｋａ病毒流行區(qū)域??主要集中于南美北美、非洲中部、東南亞地區(qū)??

毒科主要在熱帶和亞熱帶地區(qū)流行，也可以通過伊蚊傳播［１（）］。除了通過伊蚊傳播的??蚊－猴叢林循環(huán)和蚊＿人城市循環(huán)外，最近己證實還存在通過性或輸血傳播及母嬰垂??直傳播的人－人循環(huán)（圖２）?［１１，１２］�？偨Y(jié)Ｚｉｋａ病毒發(fā)現(xiàn)與爆發(fā)過程中的多個重要事??件（表１）。??Ｍｏｓｑｕｉｔｏ??「?Ａｅｄｅｓ?（ｓｕｂｇｅｎｕｓ?ｓｔｅｇｏｍｙｉａ）??Ａｅｄｅ（ｓｕｂｇｅｎｕｓ?ｄｉｃｅｒｏｍｙｉａ）??；?Ｓｙｌｖａｔｉｃ?Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ??ＸＴＸ?Ｃｙｃ，ｅ??■?Ｍｏｓｑｕｉｔｏ?■??Ａｅｄｅｓ?（ｓｕｂｇｅｎｕｓ?ｓｔｅｇｏｍｙｉａ）?Ｊ??Ａｅｄｅ（ｓｕｂｇｅｎｕｓ?ｄｉｃｅｒｏｍｙｉａ）??錢＇??嚴?Ａｅｄｅｓ?ａｅｇｙｐｔｉ?＾?｜?＾??ｆ?Ａｅｄｅｓ?ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ?＇?ｆ?？?ｔ??ｒ＞?Ａｅｄｅｓ?ｐｏｌｙｎｅｓｉｅｎｉｓ?ｒ＞?Ｖ?Ｊ??？?Ｕｒｂａｎ?Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ?Ｃｙｃｌｅ?＾?Ｓｅｘｕａｌ?ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ?Ａ??Ｗｍ?雜?ａｎｄ?ｂｌｏｏｄ?ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ??１１?Ｍｏｓｑｕｉｔｏ?１１??Ａｅｄｅｓ?ａｅｇｙｐｔｉ??Ｖ?Ａｅｄｅｓ?ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ?Ｊ??Ａ?Ａｅｄｅｓ?ｐｏｌｙｎｅｓｉｅｎｉｓ＾＾?ｋ?＾??圖２．?Ｚｉｋａ病毒的傳播途徑??蚊－猴叢林循環(huán)、蚊－人城市循環(huán)及性與血液傳播人人循環(huán)??Ｆｉｇ?２．?Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｚｉｋａ?ｖｉｒｕｓ??Ｓｙｌｖａｔｉｃ?ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ?ｃｙｃｌｅ

圖３．?Ｚｉｋａ病毒的基因組及蛋白組成??寨卡病毒基因組為單正鏈ＲＮＡ，包括５’－非翻譯區(qū)、開放閱讀框見、３’－非翻譯區(qū)。??開放閱讀框架表達一個多順販子，分解為３個結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白、前膜蛋白、包??膜蛋白）７?個非結(jié)構(gòu)蛋白（ＮＳ１，ＮＳ２Ａ，ＮＳ２Ｂ，ＮＳ３，ＮＳ４Ａ，ＮＳ４Ｂ，和?ＮＳ５）。??Ｆｉｇ?３．?Ｇｅｎｏｍｅ?ａｎｄ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｚｉｋａ?ｖｉｒｕｓ??Ｔｈｅ?Ｚｉｋａ?ｖｉｒｕｓ?ｇｅｎｏｍｅ?ｃｏｎｓｉｓｔｓ?ｏｆ?ａ?ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｓｅｎｓｅ?ＲＮＡ，?ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ??５’－ＵＴＲ、ＯＲＦ、３＊－ＵＴＲ；?ａ?ｓｉｎｇｌｅ?ｌｏｎｇ?ｏｐｅｎ?ｒｅａｄｉｎｇ?ｆｒａｍｅ?ｅｎｃｏｄｅ?ａ?ｐｏｌｙｐｏｔｅｉｎ?ｃｌｅａｖｅｄ??ｉｎｔｏ?ｔｈｒｅｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｐｒｏｔｅｉｎ?（Ｃａｐｓｉｄ?（Ｃ），?Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ?ｍｅｍｂｒａｎｅ?（ＰｒＭ），?ａｎｄ?Ｅｎｖｅｌｏｐｅ?（Ｅ）），??ａｎｄ?ｓｅｖｅｎ?ｎｏｎ－ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｐｒｏｔｅｉｎ?（ＮＳ１，?ＮＳ２Ａ，?ＮＳ２Ｂ，?ＮＳ３，?ＮＳ４Ａ，?ＮＳ４Ｂ，?ａｎｄ?ＮＳ５）．??（Ｓｈｉ?Ｙ，?ｅｔ?ａｌ．?Ｔｒｅｎｄｓ?Ｂｉｏｃｈｅｍ?Ｓｃｉ，?２０１７；４２（６）：４４３－４５６）??制、形態(tài)發(fā)生及致病力％４６］?ＮＳｌ大小為４６千道爾頓（ＫＤａ），具有２－３個糖基化位??點，１２個可形成二硫鍵的半胱氨酸（Ｃｙｓ）殘基［４７］。ＮＳ１可以激發(fā)較強的體液免疫，??進一步激發(fā)抗體介導(dǎo)的病毒感染細胞的殺傷作用［４８］。ＮＳ１可以與ＮＳ４相互作用參??與Ｚｉｋａ病毒基

【參考文獻】：
期刊論文
[1]高毒性人呼吸道合胞病毒鼠適應(yīng)株的篩選[J]. 羅語思,劉興德,牟榮,董敏俊,羅靚,孫澤華,張科.  中國病原生物學(xué)雜志. 2017(07)
[2]羊瘙癢病小鼠適應(yīng)株139A可突破種屬屏障顱內(nèi)感染金黃地鼠[J]. 張寶云,侯星生,高晨,高建梅,周曉勃,洪濤,董小平.  病毒學(xué)報. 2002(04)

博士論文
[1]利用小鼠模型分析A型流感病毒致病性分子基礎(chǔ)[D]. 于志君.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016

碩士論文
[1]腹瀉相關(guān)病毒熒光定量PCR方法的建立與評價[D]. 郭延青.中國疾病預(yù)防控制中心 2014



本文編號：3568355