發(fā)布時(shí)間：2021-12-25 05:19

　　HIV-1感染可以改變宿主細(xì)胞的表達(dá)譜,上調(diào)和病毒轉(zhuǎn)錄復(fù)制翻譯包裝所需的宿主蛋白,使宿主變成更加適應(yīng)病毒復(fù)制繁殖的環(huán)境。研究表明絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Citron kinase（citK）可以促進(jìn)HIV-1病毒的包裝釋放,所以我們?cè)诒疚闹羞M(jìn)一步探討了HIV-1感染對(duì)Citron kinase在自然生理狀態(tài)下的表達(dá)是否有調(diào)節(jié)作用。我們用含有熒光素酶報(bào)告基因的HIV-1假病毒感染外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）和HEK293T細(xì)胞系,檢測(cè)Citron kinase表達(dá)的上調(diào)情況。此外,將Citron kinase的上游啟動(dòng)子克隆入含熒光素酶報(bào)告基因的載體上,檢測(cè)HIV假病毒感染對(duì)Citron kinase啟動(dòng)子的影響。結(jié)果顯示:HIV-1可以顯著提高PBMC細(xì)胞中Citron kinase的表達(dá)量,而Citron kinase為HIV-1復(fù)制包裝所需。在原代CD4+T細(xì)胞中過表達(dá)Citron kinase,HIV-1的復(fù)制可以提高2倍以上。沉默Citron kinase的表達(dá),HIV-1病毒產(chǎn)生量顯著降低。在HEK293T細(xì)胞系中,HIV-1假病毒感染可以使Citron kinase的mRNA... 

【文章來源】：病毒學(xué)報(bào). 2015,31(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1材料與試劑
    2細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
    3含有啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告載體的構(gòu)建
    4細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    5Western-blot轉(zhuǎn)染
    6熒光素酶活性測(cè)定
    7熒光定量RT-PCR
結(jié)果
    1 HIV-1感染PBMC引起Citron kinase表達(dá)顯著上調(diào)
    2 Citron kinase是HIV-1在原代CD4+T細(xì)胞中復(fù)制所需的重要蛋白
    3 HIV-1感染HEK293T引起Citron kinase表達(dá)上調(diào)
    4 pGL3-citKP熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建和測(cè)試
討論



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