目的探討重組甲型流感病毒基質(zhì)蛋白1/2（rM1/2）誘導(dǎo)氣管上皮細(xì)胞產(chǎn)生干擾素-γ的作用,以及基于p38MAPK信號因子的誘導(dǎo)作用機(jī)制。方法將小鼠原代氣管上皮細(xì)胞分成6組,分別為M1組、M2組、病毒組、M1+病毒組、M2+病毒組、正常對照組。各組分別用相應(yīng)制劑干預(yù)細(xì)胞4、8、24h,抑制試驗(yàn)中各實(shí)驗(yàn)組提前1h分別加入p38抑制劑,再進(jìn)行相應(yīng)制劑干預(yù)。提取細(xì)胞總RNA和總蛋白,分別采用RT-PCR和Western blot方法檢測IFN-γmRNA和IFN-γ、p38MAPK、P-p38MAPK的表達(dá)。結(jié)果重組甲型流感病毒M1/2作用于小鼠氣管上皮細(xì)胞,作用4h,8h,24h后的半定量RT-PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果為rM1、rM2組誘導(dǎo)IFN-γmRNA表達(dá)量高于正常組,表示M1/2能誘導(dǎo)IFN-γ的產(chǎn)生。Western blot結(jié)果顯示rM1、rM2組誘導(dǎo)P-p38MAPK表達(dá)量高于正常組,用p38MAPK抑制劑SB203580后,rM1聯(lián)合病毒、rM2聯(lián)合病毒組誘導(dǎo)P-p38MAPK表達(dá)量低于病毒組,且rM1聯(lián)合病毒、rM2聯(lián)合病毒組誘導(dǎo)IFN-γmRNA表達(dá)量低于病... 

【文章來源】：中國病原生物學(xué)雜志. 2017,12(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        1.1 細(xì)胞
        1.2 病毒
        1.3 主要試劑
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與感染
        2.2 半定量RT-PCR檢測γ干擾素基因的表達(dá)
        2.3 Western blot檢測干擾素γ的表達(dá)
        2.4 數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
    1流感病毒rM1/2對小鼠氣管上皮細(xì)胞IFN-γmR-NA表達(dá)的作用
    2流感病毒rM1/2對氣管上皮細(xì)胞IFN-γ蛋白表達(dá)的作用
    3 p38MAPK磷酸化水平
    4 抑制劑對p38MAPK及IFN-γmRNA表達(dá)的影響
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組甲型流感病毒NS2蛋白抑制感染小鼠肺組織干擾素的產(chǎn)生[J]. 朱顏鑫,牟秋菊,趙兵兵,羅紅,智妍,蘭露莎,江滟.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(12)



本文編號：3533054