目的:研究日本血吸蟲體表非特異性結(jié)合短肽ZLW調(diào)控日本血吸蟲堿性磷酸酶SmAP,干預(yù)小鼠巨噬細(xì)胞極化的分子機(jī)制。方法:（1）分別用AMP+SmAP+ZLW?A2a受體激動劑及抑制劑、A2b受體激動劑及抑制劑處理生長良好的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7,ELISA檢測各試劑最佳濃度。（2）Western Blot檢測ZLW作用后細(xì)胞內(nèi)一氧化氮合酶以及精氨酸酶1蛋白含量變化,ELISA檢測細(xì)胞上清液中腺苷濃度的改變,對硝基苯磷酸二鈉法檢測日本堿性磷酸酶酶活性,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測細(xì)胞上清液中一氧化氮合酶、精氨酸酶1 mRNA的表達(dá)變化,硝酸還原酶法測定一氧化氮的濃度。（3）免疫熒光鑒定M2型巨噬細(xì)胞。結(jié)果:（1）Western Blot分析結(jié)果顯示,ZLW作用后細(xì)胞內(nèi)一氧化氮合酶表達(dá)上調(diào),精氨酸酶1表達(dá)下調(diào)。ELISA結(jié)果顯示,腺苷合成減少,腺苷受體激活度下降。對硝基苯磷酸二鈉法結(jié)果顯示,ZLW作用后SmAP酶活性降低。qRT-PCR結(jié)果顯示一氧化氮合酶的mRNA表達(dá)上調(diào),精氨酸酶1的mRNA表達(dá)水平下調(diào)。硝酸還原酶法結(jié)果顯示,處理組一氧化氮表達(dá)量上升。（2）免疫熒光技術(shù)結(jié)果顯示M2型巨噬... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ELISA測定AMP對巨噬細(xì)胞極化的影響

圖2. ELISA測定AMP、SmAP最佳濃度Figure 2. ELISA determines the optimal concentration ofAMP and SmAPAMP + SmAP處理組iNOS的OD值 B2.AMP + SmAP處理組Arg1的OD值

圖3. ELISA測定ZLW最佳濃度Figure 3. ELISA determines the optimal concentration of ZLWAMP + SmAP + ZLW處理組iNOS的OD值 C2.AMP + SmAP + ZLW處理組Arg1的O

【參考文獻(xiàn)】：
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