人類免疫缺陷病毒（HIV）是一種攻擊免疫系統(tǒng)的逆轉(zhuǎn)錄病毒,導(dǎo)致人類免疫系統(tǒng)功能喪失。目前,國內(nèi)外診斷HIV感染的方法包括酶聯(lián)免疫（ELISA）、免疫印跡（WB）和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）。然而,這些方法有一定的不足:或操作繁瑣、或靈敏度低、或假陽性高。因此,需要發(fā)展高靈敏,操作簡單,反應(yīng)快速的HIV診斷新方法。本研究中,基于鏈的取代延伸反應(yīng)和十字形的DNA納米復(fù)合物,構(gòu)建了一種無酶的電化學(xué)生物傳感器實現(xiàn)HIV相關(guān)DNA的快速高靈敏檢測。在靶物質(zhì)HIV相關(guān)基因存在時,引起多次鏈的取代延伸反應(yīng),生成大量的DNA雙鏈產(chǎn)物,并且靶物質(zhì)能夠進(jìn)入下一次循環(huán);DNA雙鏈產(chǎn)物與固定在金電極表面的捕獲探針結(jié)合產(chǎn)生DNA雙鏈-捕獲探針復(fù)合物;然后,生物素化的十字形DNA納米復(fù)合物與DNA雙鏈-捕獲探針復(fù)合物雜交,使親和素化的堿性磷酸酶結(jié)合到電極上,在底物α萘基磷酸鹽存在下,產(chǎn)生明顯的電化學(xué)信號。此策略能夠檢測1 pM-100 nM HIV相關(guān)基因,檢測限達(dá)到0.21 pM;此方法不僅沒有蛋白酶的參與和繁瑣的純化步驟,而且具有高的特異性和抗干擾能力;另外,此方法能夠用于實際樣本的分析�；谶@些優(yōu)勢,此方法對... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
1 引言
2 實驗部分
3 結(jié)果和討論
4 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    1 引言
    2 等溫擴(kuò)增用于高度靈敏檢測
    3 雜交鏈反應(yīng)
    4 滾環(huán)擴(kuò)增信號放大策略
    5 催化的發(fā)夾組裝擴(kuò)增策略
    6 展望
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：3464451