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日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗的構建及其誘導BALB/c鼠免疫應答的動態(tài)研究

發(fā)布時間:2021-10-24 06:09
  目的 日本血吸蟲病屬我國規(guī)劃防治的嚴重寄生蟲病之一,現(xiàn)有血吸蟲病疫苗由于各種不足均未能應用于臨床,因此,開發(fā)新型疫苗是預防該病的必經(jīng)之路。本研究擬擴增日本血吸蟲(Schistosoma japonicum, Sj)32抗原編碼基因,以兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum,Bb)為“載體”,構建日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗,并進一步觀察該疫苗誘導BALB/c鼠免疫反應的動態(tài)變化,為日本血吸蟲病的防治提供一種新型疫苗。方法1.從本室保存的BL21(pET28a-Sj32)重組菌中抽提質粒pET28a-Sj32,并以該質粒為模板,PCR擴增得到Sj32抗原編碼基因,利用基因重組技術將此目的基因插入載體pGEX-1λT,構建重組質粒pGEX-Sj32,以電穿孔法將其轉化到Bb中,獲得重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗;仍采用電穿孔法將pGEX-Sj32轉化至大腸埃希菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)中加IPTG誘導表達,采用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和蛋白印跡(Western blot)技術... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻
第一章 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗的構建及其表達效率的研究
    第一節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗的構建及鑒定
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
    第二節(jié) 日本血吸蟲重組質粒pGEX-Sj32的構建及其在大腸埃希菌BL21中的表達
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
第二章 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導BALB/c小鼠免疫應答的動態(tài)研究
    第一節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導BALB/c小鼠血清抗體和細胞因子的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
    第二節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導BALB/c小鼠脾細胞增殖的動態(tài)變化
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
    第三節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導BALB/c鼠脾臟T淋巴細胞亞群的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
    第四節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導BALB/c鼠脾細胞因子的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
    第五節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導BALB/c鼠脾細胞凋亡的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        參考文獻
全文小結
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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本文編號:3454735

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