目的 日本血吸蟲病屬我國規(guī)劃防治的嚴(yán)重寄生蟲病之一,現(xiàn)有血吸蟲病疫苗由于各種不足均未能應(yīng)用于臨床,因此,開發(fā)新型疫苗是預(yù)防該病的必經(jīng)之路。本研究擬擴(kuò)增日本血吸蟲（Schistosoma japonicum, Sj）32抗原編碼基因,以兩歧雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum,Bb）為“載體”,構(gòu)建日本血吸蟲重組Bb（pGEX-Sj32）疫苗,并進(jìn)一步觀察該疫苗誘導(dǎo)BALB/c鼠免疫反應(yīng)的動態(tài)變化,為日本血吸蟲病的防治提供一種新型疫苗。方法1.從本室保存的BL21（pET28a-Sj32）重組菌中抽提質(zhì)粒pET28a-Sj32,并以該質(zhì)粒為模板,PCR擴(kuò)增得到Sj32抗原編碼基因,利用基因重組技術(shù)將此目的基因插入載體pGEX-1λT,構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-Sj32,以電穿孔法將其轉(zhuǎn)化到Bb中,獲得重組Bb（pGEX-Sj32）疫苗；仍采用電穿孔法將pGEX-Sj32轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌（Escherichia coli,E.coli）BL21（DE3）中加IPTG誘導(dǎo)表達(dá),采用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）和蛋白印跡（Western blot）技術(shù)... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻(xiàn)
第一章 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗的構(gòu)建及其表達(dá)效率的研究
    第一節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗的構(gòu)建及鑒定
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第二節(jié) 日本血吸蟲重組質(zhì)粒pGEX-Sj32的構(gòu)建及其在大腸埃希菌BL21中的表達(dá)
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
第二章 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導(dǎo)BALB/c小鼠免疫應(yīng)答的動態(tài)研究
    第一節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導(dǎo)BALB/c小鼠血清抗體和細(xì)胞因子的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第二節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導(dǎo)BALB/c小鼠脾細(xì)胞增殖的動態(tài)變化
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第三節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導(dǎo)BALB/c鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第四節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導(dǎo)BALB/c鼠脾細(xì)胞因子的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第五節(jié) 日本血吸蟲重組Bb(pGEX-Sj32)疫苗誘導(dǎo)BALB/c鼠脾細(xì)胞凋亡的動態(tài)研究
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
全文小結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號：3454735