艱難梭菌感染分子診斷研究現(xiàn)狀及進(jìn)展
發(fā)布時間:2021-09-21 21:20
<正>艱難梭菌是一種革蘭陽性厭氧芽孢桿菌,在自然環(huán)境、動物以及人體腸道中廣泛存在,是人體腸道的正常菌群。1935年在新生兒腸道發(fā)現(xiàn),1978年確定與偽膜性腸炎有關(guān),但直到2003年在北美引起大流行,艱難梭菌感染(CDI)才開始引起醫(yī)務(wù)人員的重視,F(xiàn)已確定,艱難梭菌是醫(yī)院感染性腹瀉的主要病原菌,25%33%的抗菌藥物相關(guān)性腹瀉、90%的偽膜性腸炎與之有關(guān)。CDI的疾病譜非常廣泛,包括無癥狀攜帶者、自
【文章來源】:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016,13(17)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 核酸擴(kuò)增方法
1.1 PCR方法
1.1.1 BD GeneOhm檢測
1.1.2 BD Max檢測
1.1.3 Cepheid GeneXpert C.difficile PCR檢測
1.1.4 ProGastroTMCd PCR檢測
1.1.5 Focus Technologies Simplexa Simplexa檢測的也是tcdB。它使用的儀器是3Mintegrated cycler,采用雙功能熒光探針。其操作如下:用棉拭子挑取大便標(biāo)本后浸入TE緩沖液(需自己配置),在97℃加熱10min,然后取2μL上清液作為模板加入PCR預(yù)混液進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果為陽性(CT<40,內(nèi)對照有效或無效)、陰性(CT=0或者CT≥40且內(nèi)對照陽性)、無效(CT=0且內(nèi)對照無效)。Simplexa檢測不需要進(jìn)行DNA的提取,整個過程約需要60 min。研究發(fā)現(xiàn)在四種NAAT方法中,Simplexa是唯一不需要重復(fù)檢測的,這無疑降低了成本。但同時也發(fā)現(xiàn)其敏感性只有87%,低于其他報道[6]。Nolte等[2]的研究發(fā)現(xiàn)在和BD GeneOhm的比較中,兩者的表現(xiàn)相差不大。Simplexa檢測的優(yōu)勢在于操作簡單,耗時短(不到60min),并且高通量(一次最多可檢測96份標(biāo)本),這對于標(biāo)本量大的實(shí)驗(yàn)室可以節(jié)約很多時間;另外,Simplexa檢測還可以看擴(kuò)增曲線,便于對結(jié)果不滿意的標(biāo)本進(jìn)行分析[2]。
1.1.7 IMDx C.difficile for Abbott m2000檢測
1.2 LAMP技術(shù)
1.3 依賴解螺旋酶的恒溫擴(kuò)增(HDA)
1.3.1 Great Basin Portrait Analyzer
1.3.2 Quidel AmpliVue C.difficile檢測
2 核酸擴(kuò)增診斷存在的問題
2.1 臨床解釋
2.2 價格較貴
3 展望
3.1 定量
3.2 多重擴(kuò)增
3.3 聯(lián)合其他生物標(biāo)志物
【參考文獻(xiàn)】:
博士論文
[1]華南地區(qū)艱難梭菌流行病學(xué)研究與新型分子生物學(xué)檢測技術(shù)評估[D]. 王浦.南方醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號:3402509
【文章來源】:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016,13(17)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 核酸擴(kuò)增方法
1.1 PCR方法
1.1.1 BD GeneOhm檢測
1.1.2 BD Max檢測
1.1.3 Cepheid GeneXpert C.difficile PCR檢測
1.1.4 ProGastroTMCd PCR檢測
1.1.5 Focus Technologies Simplexa Simplexa檢測的也是tcdB。它使用的儀器是3Mintegrated cycler,采用雙功能熒光探針。其操作如下:用棉拭子挑取大便標(biāo)本后浸入TE緩沖液(需自己配置),在97℃加熱10min,然后取2μL上清液作為模板加入PCR預(yù)混液進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果為陽性(CT<40,內(nèi)對照有效或無效)、陰性(CT=0或者CT≥40且內(nèi)對照陽性)、無效(CT=0且內(nèi)對照無效)。Simplexa檢測不需要進(jìn)行DNA的提取,整個過程約需要60 min。研究發(fā)現(xiàn)在四種NAAT方法中,Simplexa是唯一不需要重復(fù)檢測的,這無疑降低了成本。但同時也發(fā)現(xiàn)其敏感性只有87%,低于其他報道[6]。Nolte等[2]的研究發(fā)現(xiàn)在和BD GeneOhm的比較中,兩者的表現(xiàn)相差不大。Simplexa檢測的優(yōu)勢在于操作簡單,耗時短(不到60min),并且高通量(一次最多可檢測96份標(biāo)本),這對于標(biāo)本量大的實(shí)驗(yàn)室可以節(jié)約很多時間;另外,Simplexa檢測還可以看擴(kuò)增曲線,便于對結(jié)果不滿意的標(biāo)本進(jìn)行分析[2]。
1.1.7 IMDx C.difficile for Abbott m2000檢測
1.2 LAMP技術(shù)
1.3 依賴解螺旋酶的恒溫擴(kuò)增(HDA)
1.3.1 Great Basin Portrait Analyzer
1.3.2 Quidel AmpliVue C.difficile檢測
2 核酸擴(kuò)增診斷存在的問題
2.1 臨床解釋
2.2 價格較貴
3 展望
3.1 定量
3.2 多重擴(kuò)增
3.3 聯(lián)合其他生物標(biāo)志物
【參考文獻(xiàn)】:
博士論文
[1]華南地區(qū)艱難梭菌流行病學(xué)研究與新型分子生物學(xué)檢測技術(shù)評估[D]. 王浦.南方醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號:3402509
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