第一部分HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)及HBV活性與亞型鑒定目的:鑒定HepG2.2.15細(xì)胞乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）活性及亞型。方法:常規(guī)培養(yǎng)HepG2.2.15細(xì)胞,收集6孔板對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的培養(yǎng)上清液和細(xì)胞,采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)HBsAg、HBeAg和HBcAb水平;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（FQ-PCR）測(cè)定HBV-DNA濃度;高通量基因測(cè)序技術(shù)鑒定HBV亞型;分子雜交技術(shù)檢測(cè)HBV基因型及耐藥突變情況;細(xì)胞免疫組化法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HBsAg及HBeAg表達(dá)。將細(xì)胞設(shè)0.25、0.5、1.0、2.0和4.0×10⁵個(gè)/mL五個(gè)培養(yǎng)濃度,每隔48h收集培養(yǎng)上清液,連續(xù)收集5次,檢測(cè)HBeAg和HBV-DNA的含量。結(jié)果:HBV活性測(cè)定結(jié)果:HBsAg（OD值）為0.36±0.11;HBeAg（OD值）為2.37±0.08;HBcAb（OD值）為1.73±0.17;HBV-DNA為（4.75±0.06）×10⁵IU/mL。病毒S、C區(qū)基因測(cè)序后序列比對(duì)結(jié)果顯示與HBV ayw亞型相符,符合率大... 

【文章來(lái)源】：右江民族醫(yī)學(xué)院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HepG2.2.15細(xì)胞形態(tài)圖（×20物鏡）

HBV-DNA測(cè)定相關(guān)曲線

1萬(wàn)」，，全性丁珊母」54『，了1舊斗日衛(wèi)二至122星3衛(wèi)職湘二日27拍1日」【創(chuàng)3全勻3習(xí)斌j互習(xí)啟37三日3盯月口41犯三3J已45c邪.N明為叮s日.口“咖油rHBV.我康?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3381060