血吸蟲病的發(fā)病機制主要是蟲卵引起的肝臟和腸等組織臟器產(chǎn)生肉芽腫病變,并形成繼發(fā)性的肝纖維化。盡管目前對于血吸蟲病的發(fā)病機制尚未完全闡明,但是一些研究提示了可能參與血吸蟲病的效應(yīng)細胞和細胞因子。已有大量研究證實,肝星狀細胞（hepatic stellate cells,HSCs）是血吸蟲病肝纖維化的主要效應(yīng)細胞。在血吸蟲病炎癥過程所分泌的多種細胞因子中,TGF-β1（transforming growth factor-β1）是目前公認的最關(guān)鍵的促纖維化細胞因子之一。Smad蛋白是唯一的TGF-β1受體后信使分子,介導(dǎo)TGF-β1信號從細胞膜傳入細胞核,進而促進纖維化相關(guān)基因的表達,導(dǎo)致細胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）沉積在肝臟形成肝纖維化。最近研究報道,microRNAs通過靶向作用于一個或多個TGF-β1/Smad信號通路的mRNA,促進或抑制HSCs的活化,從而影響肝纖維化發(fā)生、發(fā)展。課題組前期研究表明,日本血吸蟲感染ICOS-Tg（ICOS transgenic,ICOS-Tg）小鼠后可顯著上調(diào)ICOSL/ICOS信號發(fā)揮免疫效應(yīng)。共刺激信號ICOS... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
研究背景
    參考文獻
第一部分 日本血吸蟲感染小鼠肝星狀細胞的分離、鑒定和培養(yǎng)
    1.材料與試劑
        1.1 實驗儀器
        1.2 主要試劑和耗材
        1.3 主要溶液配制
    2.實驗方法
        2.1 ICOS-Tg小鼠篩選及繁育
        2.2 實驗動物模型的建立
        2.3 HSCs的分離、鑒定和培養(yǎng)
    3.實驗結(jié)果
        3.1 ICOS-Tg小鼠的篩選及繁育
        3.2 日本血吸蟲感染小鼠HSCs分離、鑒定和培養(yǎng)
    4.討論
    參考文獻
第二部分 共刺激信號ICOSL/ICOS對HSCs中促纖維化分子基因表達的影響
    1.材料與試劑
        1.1 實驗儀器
        1.2 主要試劑和耗材
    2.實驗方法
        2.1 動物模型的建立
        2.2 HSCs的分離
        2.3 RNA的抽提
        2.4 RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.5 實時熒光定量PCR反應(yīng)
        2.6 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.實驗結(jié)果
        3.1 小鼠原代HSCs RNA完整性鑒定
        3.2 日本血吸蟲感染小鼠不同病期原代HSCs中 α-SMA基因的表達
        3.3 日本血吸蟲感染小鼠不同病期與肝纖維化相關(guān)蛋白基因的表達
            3.3.1 ICOS-Tg小鼠與FVB/NJ小鼠不同病期原代HSCs中Collagen-Ⅰ的表達
            3.3.2 ICOS-Tg小鼠與FVB/NJ小鼠不同病期原代HSCs中Collagen-Ⅲ的表達
    4.討論
    參考文獻
第三部分 共刺激信號ICOSL/ICOS對肝纖維化形成TGF-β1/Smad信號通路相關(guān)分子基因表達水平的影響
    1.材料與試劑
        1.1 實驗儀器
        1.2 主要試劑和耗材
    2.實驗方法
        2.1 動物模型的建立
        2.2 HSCs的分離
        2.3 RNA的抽提
        2.4 Small RNA的抽提
        2.5 Small RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.6 實時熒光定量PCR反應(yīng)
        2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.實驗結(jié)果
        3.1 日本血吸蟲感染小鼠不同病期肝纖維化相關(guān)分子TGF-β1 基因的表達
        3.2 日本血吸蟲感染小鼠不同病期與肝纖維化形成TGF-β1/Smad通路相關(guān)分子Smad2基因的表達
        3.3 日本血吸蟲感染小鼠不同病期與肝纖維化形成TGF-β1/Smad通路相關(guān)分子Smad3基因的表達
        3.4 日本血吸蟲感染小鼠不同病期與肝纖維化形成TGF-β1/Smad通路相關(guān)分子Smad4基因的表達
        3.5 日本血吸蟲感染小鼠后不同病期與肝纖維化形成TGF-β1/Smads通路相關(guān)分子Smad7基因的表達
        3.6 日本血吸蟲感染小鼠不同病期與肝纖維化形成TGF-β1/Smad通路相關(guān)分子miR-21基因的表達
        3.7 日本血吸蟲感染小鼠不同病期與肝纖維化形成TGF-β1/Smad通路相關(guān)分子miR-454基因的表達
    4.討論
    參考文獻
結(jié)論
英文縮寫詞表
肝星狀細胞與肝纖維化研究進展
    參考文獻
碩士學(xué)習(xí)期間參與發(fā)表和待發(fā)表的論文
基金資助
致謝



本文編號：3339599