登革病毒交叉反應(yīng)性單克隆抗體的制備及特異性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-21 07:23
研究背景及意義登革病毒(Dengue virus,DENV)是黃病毒家族屬的一種主要由埃及伊蚊和白紋伊蚊進(jìn)行叮咬傳播的蟲媒病毒,可引起人類登革熱,登革出血熱及登革休克綜合征。目前登革病毒被世界衛(wèi)生組織視為熱帶及亞熱帶地區(qū)的重大公共衛(wèi)生問題。全球每年約有3.9億人次感染登革,每5000萬~1億感染者中就有約2萬人死亡。雖然針對登革病毒的疫苗研究已開展近70年,但目前尚無安全有效的登革病毒疫苗或相關(guān)的治療性藥物。法國賽諾菲-巴斯德公司研制的登革病毒4價(jià)減毒活疫苗曾在2015年獲美國(Food and Drug Administration,FDA)批準(zhǔn)上市,但因在菲律賓開展Ⅲ期臨床試驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)而被叫停。因DENV主動(dòng)免疫疫苗研究進(jìn)展緩慢,故人們將目光聚焦于DENV的被動(dòng)免疫治療及治療性抗體的相關(guān)研究。而單克隆抗體(Monoclonal antibodies,mAb)作為一種技術(shù)成熟、特異性強(qiáng)、治療效果較好的被動(dòng)免疫策略,逐漸成為了人們研究的熱點(diǎn)。我們采用4種血清型DENV聯(lián)合免疫小鼠,最大限度保留各血清型DENV蛋白的天然免疫活性,利用小鼠脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞進(jìn)行融合,篩選并...
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
英文摘要
中文摘要
第一章 前言
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 病毒株、細(xì)胞株、登革病毒E蛋白及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2 主要儀器設(shè)備
2.3 主要試劑及耗材
2.4 試劑配制
2.5 實(shí)驗(yàn)方法
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 免疫小鼠血清抗體效價(jià)
3.2 雜交瘤細(xì)胞的篩選及定株
3.3 腹水單抗純化前后SDS-PAGE及抗體濃度
3.4 純化單抗的Ig類及亞類鑒定
3.5 純化單抗的有效滴度
3.6 純化單抗的相對親和力常數(shù)
3.7 純化單抗的IFA
3.8 純化單抗的western blot
3.9 純化單抗的PRNT
第四章 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 基于蛋白免疫策略的登革病毒單克隆抗體研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章
致謝
本文編號:3199301
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
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【學(xué)位級別】:碩士
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第一章 前言
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 病毒株、細(xì)胞株、登革病毒E蛋白及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2 主要儀器設(shè)備
2.3 主要試劑及耗材
2.4 試劑配制
2.5 實(shí)驗(yàn)方法
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 免疫小鼠血清抗體效價(jià)
3.2 雜交瘤細(xì)胞的篩選及定株
3.3 腹水單抗純化前后SDS-PAGE及抗體濃度
3.4 純化單抗的Ig類及亞類鑒定
3.5 純化單抗的有效滴度
3.6 純化單抗的相對親和力常數(shù)
3.7 純化單抗的IFA
3.8 純化單抗的western blot
3.9 純化單抗的PRNT
第四章 討論
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