目的:以乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）核衣殼為靶點(diǎn)的藥物篩選,目前尚缺乏簡便有效的篩選細(xì)胞模型。直接檢測核衣殼的方法中相對簡便可靠的是非變性瓊脂糖凝膠電泳（Native agarose gel electrophoresis,NAGE）。對于藥物篩選而言,NAGE存在通量低和操作繁瑣的問題。針對這些問題,設(shè)計(jì)構(gòu)建一種新的類核衣殼快速檢測體系。方法:將近紅外熒光蛋白（Near-Infrared fluorescent protein,NIRFP）通過長的柔性接頭融合到乙型肝炎病毒核心蛋白（Hepatitis B virus core protein,HBc）上,轉(zhuǎn)染細(xì)胞并檢測紅外熒光蛋白表達(dá)以及類核衣殼結(jié)構(gòu)形成情況;制備重組慢病毒,構(gòu)建四環(huán)素調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系293tTA,并以此細(xì)胞為基礎(chǔ),構(gòu)建miRFP709-HBc穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系并篩選單克隆;用已知具有抑制HBV核衣殼形成的藥物Bay 41-4109和Arbidol處理細(xì)胞,檢測類核衣殼的變化,以測試該細(xì)胞模型用于藥物篩選的可行性。結(jié)果:（1）兩種近紅外熒光蛋白與HBc融合表達(dá)時(shí),miRFP709-... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
文獻(xiàn)綜述：靶向HBV核衣殼裝配的小分子化合物研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Management of antiviral drug resistance in chronic hepatitis B[J]. Ki Bae Bang,Hong Joo Kim.  World Journal of Gastroenterology. 2014(33)



本文編號：3189885