利用環(huán)介導等溫擴增技術(shù)快速檢測沙眼衣原體方法的建立
發(fā)布時間:2021-05-11 07:42
建立一種利用環(huán)介導等溫擴增技術(shù)(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)快速檢測沙眼衣原體的方法。針對沙眼衣原體gyr A基因設(shè)計LAMP特異引物,并加入一條環(huán)引物LB提高反應(yīng)效率,對反應(yīng)的特異性、靈敏度和重復性進行評價,同時用沙眼衣原體陽性的臨床樣本進行LAMP檢測驗證。實時熒光LAMP結(jié)果表明,建立的LAMP方法特異性好,不與10種常見的病原微生物以及生殖道感染相關(guān)細菌發(fā)生非特異反應(yīng),靈敏度可以達到4.13×101 copies/μL;20次重復試驗的Cq值變異系數(shù)為7.23%,反應(yīng)穩(wěn)定性良好;用LAMP方法對6份臨床陽性樣本進行檢測,陽性符合率為100%。因此,該研究建立的沙眼衣原體LAMP檢測方法快速、靈敏、穩(wěn)定性好,能為感染篩查和早期診斷提供參考。
【文章來源】:中國測試. 2020,46(04)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
0 引言
1 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 試劑
1.1.2 實驗菌株與臨床樣本
1.1.3 實驗儀器
1.2 實驗方法
1.2.1 沙眼衣原體的培養(yǎng)和DNA提取
1.2.2 目的基因篩選和引物設(shè)計
1.2.3 實時熒光LAMP反應(yīng)
1.2.4 特異性實驗
1.2.5 靈敏度實驗
1.2.6 陽性符合率實驗
1.2.7 重復性實驗
2 實驗結(jié)果
2.1 沙眼衣原體的LAMP反應(yīng)
2.2 特異性
2.3 靈敏度
2.4 陽性符合率
2.5 重復性
3 結(jié)束語
【參考文獻】:
期刊論文
[1]生殖道沙眼衣原體感染的挑戰(zhàn)與應(yīng)對[J]. 唐衛(wèi)明,薛耀華,鄭和平. 中華皮膚科雜志. 2017 (05)
[2]沙眼衣原體感染的診斷與實驗室檢查現(xiàn)狀[J]. 劉原君,王千秋. 中國醫(yī)學文摘(皮膚科學). 2016(03)
碩士論文
[1]沙眼衣原體感染后HeLa-229細胞的miRNA差異表達及其功能研究[D]. 王斌.天津醫(yī)科大學 2007
本文編號:3181023
【文章來源】:中國測試. 2020,46(04)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
0 引言
1 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 試劑
1.1.2 實驗菌株與臨床樣本
1.1.3 實驗儀器
1.2 實驗方法
1.2.1 沙眼衣原體的培養(yǎng)和DNA提取
1.2.2 目的基因篩選和引物設(shè)計
1.2.3 實時熒光LAMP反應(yīng)
1.2.4 特異性實驗
1.2.5 靈敏度實驗
1.2.6 陽性符合率實驗
1.2.7 重復性實驗
2 實驗結(jié)果
2.1 沙眼衣原體的LAMP反應(yīng)
2.2 特異性
2.3 靈敏度
2.4 陽性符合率
2.5 重復性
3 結(jié)束語
【參考文獻】:
期刊論文
[1]生殖道沙眼衣原體感染的挑戰(zhàn)與應(yīng)對[J]. 唐衛(wèi)明,薛耀華,鄭和平. 中華皮膚科雜志. 2017 (05)
[2]沙眼衣原體感染的診斷與實驗室檢查現(xiàn)狀[J]. 劉原君,王千秋. 中國醫(yī)學文摘(皮膚科學). 2016(03)
碩士論文
[1]沙眼衣原體感染后HeLa-229細胞的miRNA差異表達及其功能研究[D]. 王斌.天津醫(yī)科大學 2007
本文編號:3181023
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