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利用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速檢測(cè)沙眼衣原體方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2021-05-11 07:42
  建立一種利用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)快速檢測(cè)沙眼衣原體的方法。針對(duì)沙眼衣原體gyr A基因設(shè)計(jì)LAMP特異引物,并加入一條環(huán)引物L(fēng)B提高反應(yīng)效率,對(duì)反應(yīng)的特異性、靈敏度和重復(fù)性進(jìn)行評(píng)價(jià),同時(shí)用沙眼衣原體陽(yáng)性的臨床樣本進(jìn)行LAMP檢測(cè)驗(yàn)證。實(shí)時(shí)熒光LAMP結(jié)果表明,建立的LAMP方法特異性好,不與10種常見(jiàn)的病原微生物以及生殖道感染相關(guān)細(xì)菌發(fā)生非特異反應(yīng),靈敏度可以達(dá)到4.13×101 copies/μL;20次重復(fù)試驗(yàn)的Cq值變異系數(shù)為7.23%,反應(yīng)穩(wěn)定性良好;用LAMP方法對(duì)6份臨床陽(yáng)性樣本進(jìn)行檢測(cè),陽(yáng)性符合率為100%。因此,該研究建立的沙眼衣原體LAMP檢測(cè)方法快速、靈敏、穩(wěn)定性好,能為感染篩查和早期診斷提供參考。 

【文章來(lái)源】:中國(guó)測(cè)試. 2020,46(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【文章目錄】:
0 引言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 試劑
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)菌株與臨床樣本
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 沙眼衣原體的培養(yǎng)和DNA提取
        1.2.2 目的基因篩選和引物設(shè)計(jì)
        1.2.3 實(shí)時(shí)熒光LAMP反應(yīng)
        1.2.4 特異性實(shí)驗(yàn)
        1.2.5 靈敏度實(shí)驗(yàn)
        1.2.6 陽(yáng)性符合率實(shí)驗(yàn)
        1.2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 沙眼衣原體的LAMP反應(yīng)
    2.2 特異性
    2.3 靈敏度
    2.4 陽(yáng)性符合率
    2.5 重復(fù)性
3 結(jié)束語(yǔ)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]生殖道沙眼衣原體感染的挑戰(zhàn)與應(yīng)對(duì)[J]. 唐衛(wèi)明,薛耀華,鄭和平.  中華皮膚科雜志. 2017 (05)
[2]沙眼衣原體感染的診斷與實(shí)驗(yàn)室檢查現(xiàn)狀[J]. 劉原君,王千秋.  中國(guó)醫(yī)學(xué)文摘(皮膚科學(xué)). 2016(03)

碩士論文
[1]沙眼衣原體感染后HeLa-229細(xì)胞的miRNA差異表達(dá)及其功能研究[D]. 王斌.天津醫(yī)科大學(xué) 2007



本文編號(hào):3181023

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