本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲潛在藥物靶點(diǎn)β-碳酸酐酶的表達(dá)與鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的原核表達(dá)日本血吸蟲(Schistosoma japonicum)潛在的藥物靶點(diǎn)β-碳酸酐酶(β-CA)并測(cè)定其催化活性。方法根據(jù)β-CA保守序列,在日本血吸蟲基因組中鑒定β-CA序列,核酸序列全合成后將其導(dǎo)入原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行融合表達(dá)。SDS-PAGE及Western blotting鑒定表達(dá)蛋白后,采用Ni親和層析方法純化目的蛋白,并測(cè)定碳酸酐酶活性。結(jié)果c DNA序列Sjp_0056790.1具有β-CAs的保守序列;成功將該核酸序列導(dǎo)入重組表達(dá)載體p ET-32a(+)-Sja CA中;SDSPAGE和Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示融合蛋白分子量大小約為38 k Da;碳酸酐酶活性測(cè)定結(jié)果顯示該蛋白具有碳酸酐酶活性,且該活性受乙酰唑胺抑制。結(jié)論 Sjp_0056790.1編碼日本血吸蟲β-CA,本研究成功表達(dá)了具有催化活性的日本血吸蟲的β-CA,為后續(xù)的藥物篩選奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)病原生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 日本血吸蟲 β-碳酸酐酶(β-CA) 藥物靶點(diǎn) 表達(dá) 活性測(cè)定
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)(2012ZX10004220) 衛(wèi)生行業(yè)科研專項(xiàng)(201202019)
【分類號(hào)】：R383.24
【正文快照】： 血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病,在全球76個(gè)國家和地區(qū)廣泛流行。我國主要流行的是日本血吸蟲病,分布于長江流域及其以南地區(qū),是我國重要的公共衛(wèi)生問題之一。吡喹酮是目前治療血吸蟲病的首選藥物,使用至今已有30多年歷史,安全高效。然而,越來越多的證據(jù)顯

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲潛在藥物靶點(diǎn)β-碳酸酐酶的表達(dá)與鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：317142