目的:人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）是引起人類獲得性免疫缺陷綜合征（Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS）即艾滋病的主要病原體。HIV感染人體后,機(jī)體免疫功能嚴(yán)重缺損,常因合并嚴(yán)重的機(jī)會性感染而最終導(dǎo)致死亡。HIV病毒限制因子是指存在于宿主細(xì)胞內(nèi)的抑制病毒復(fù)制的蛋白質(zhì),是機(jī)體防御病毒感染的第一道防線。現(xiàn)階段已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了多種HIV病毒限制因子包括SAMHD1（SAM And HD Domain Containing Deoxynucleoside Triphosphate Triphosphohydrolase 1,SAMHD1）、APOBEC3G（apolipoprotein B-editing catalytic polypeptide 3G proteins,APOBEC3G）、TRIM5（tripartite motif-containing protein 5,TRIM5）和Tetherin（BST-2/CD317/HM1.24）等。HIV病毒限制因子的研究能夠解釋機(jī)體抵御病毒感染的... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 TRABD2A抑制HIV-1 病毒復(fù)制的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器和試劑
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)對象
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.1 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
            2.3.2 病毒制備和感染
NL4.3-Luc（VSV-G）病毒包裝">            2.3.3 HIV-1_NL4.3-Luc（VSV-G）病毒包裝
            2.3.4 熒光素酶檢測
            2.3.5 ELISA檢測p24
            2.3.6 Real-timePCR
            2.3.7 病毒載量檢測
            2.3.8 蛋白質(zhì)免疫印跡
            2.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 TRABD2A能夠有效地抑制HIV-1 病毒的復(fù)制
        3.2 TRABD2A的不同轉(zhuǎn)錄本的抗病毒功能
        3.3 TRABD2A對不同嗜性的HIV-1、HIV-2和SIV的抗病毒作用
        3.4 TRABD2A的抗病毒作用依賴其金屬蛋白酶活性
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 TRABD2A抑制HIV-1 病毒復(fù)制的機(jī)制研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器和試劑
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)對象
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.1 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
            2.3.2 細(xì)胞膜蛋白提取
            2.3.3 蛋白質(zhì)免疫印跡
            2.3.4 細(xì)胞免疫熒光
            2.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 TRABD2A降解HIV Gag蛋白,對Env蛋白沒有影響
        3.2 TRABD2A在細(xì)胞膜上降解Gag進(jìn)而抑制病毒在細(xì)胞膜上組裝
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 內(nèi)源性TRABD2A在 MDDCs中抑制HIV-1 病毒復(fù)制的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器和試劑
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)對象
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.1 PBMC提取
            2.3.2 從PBMC中分選CD14+單核細(xì)胞
            2.3.3 MDDCs的誘導(dǎo)
            2.3.4 siRNA轉(zhuǎn)染
AD8和HIV_89.6 病毒包裝">            2.3.5 HIV_AD8和HIV_89.6 病毒包裝
            2.3.6 sh RNA慢病毒及VLP-Vpx慢病毒包裝及感染
            2.3.7 病毒多輪感染
            2.3.8 ELISA檢測p24
            2.3.9 免疫熒光檢測TRABD2A的表達(dá)
            2.3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 TRABD2A在 MDDCs中有表達(dá)而在單核細(xì)胞中沒有表達(dá)
        3.2 內(nèi)源性TRABD2A抑制HIV病毒在MDDCs中復(fù)制
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡介



本文編號：3158962