瘧疾是世界上嚴(yán)重影響人類健康的公共衛(wèi)生問題之一。由于瘧原蟲的免疫逃避,蟲體在有免疫力的宿主體內(nèi)仍能生存與繁殖,導(dǎo)致宿主產(chǎn)生的免疫保護(hù)不穩(wěn)定。因此,研究瘧原蟲的免疫逃避機(jī)制對(duì)瘧疾的預(yù)防和治療具有重要意義。研究表明瘧原蟲的免疫逃避可能與輸出蛋白和脾臟中的成纖維細(xì)胞相互作用有關(guān)。在篩選間日瘧原蟲未知蛋白發(fā)現(xiàn)PvEXP100（Plasmodium vivax exported protein 100）是間日瘧原蟲的輸出蛋白之一,在此基礎(chǔ)上觀察PvEXP100對(duì)人脾臟成纖維細(xì)胞（human spleen fibroblasts,HSF）的作用,從而揭示間日瘧原蟲在脾臟中免疫逃避的機(jī)制。主要內(nèi)容及結(jié)果如下:（1）PvEXP100功能區(qū)的篩選。構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-HSVg-D1-PvEXP100,轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞表達(dá)。通過Transwell觀察PvEXP100對(duì)人脾臟成纖維細(xì)胞（HSF）遷移的作用,F1段能夠引起HSF的大量遷移。構(gòu)建原核表達(dá)重組質(zhì)粒pET30a-PvEXP100-F1,得到純蛋白進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。（2）PvEXP100-F1對(duì)HSF的作用。利用CCK-8法觀察PvEXP10... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

間日瘧原蟲的生活史[4]

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文6圖1-4 腫瘤微環(huán)境中 TAMs 的極化狀態(tài)對(duì)腫瘤的影響[34]Figure 1-4 Targeting TAMs to disrupt or normalize tumor vasculature[34]綜上所述，瘧原蟲可能通過引起機(jī)體的免疫應(yīng)答間接產(chǎn)生抗腫瘤的效應(yīng)。因此本課題組提出猜想，輸出蛋白由于能夠輸出到紅細(xì)胞膜表面，暴露于膜外能夠引起機(jī)體的免疫應(yīng)答從而起到間接抗腫瘤的作用。1.4 間日瘧原蟲輸出蛋白的前期研究瘧原蟲的輸出蛋白由于輸出到紅細(xì)胞膜表面，暴露于膜外區(qū)域，除了引起機(jī)體的免疫應(yīng)答外，也會(huì)與正常紅細(xì)胞結(jié)合形成rosettes，使血流速度降低并且在血管內(nèi)皮上黏附，避免蟲體隨著血液循環(huán)到達(dá)脾臟而被識(shí)別清除。Rosettes形成的部位通常是低氧環(huán)境，有利于蟲體的繁殖[39]。脾臟是人體最大的免疫器官，當(dāng)出現(xiàn)病原入侵、紅細(xì)胞異常等因素下呈亢進(jìn)狀態(tài)

1-6 PvEXP100與間日瘧患者血清發(fā)生特異性的抗原-抗體結(jié)合反 The reaction between PvEXP100 and the serum of Plasmodium vi外周血獲得的受染紅細(xì)胞用PvEXP100抗體孵育后，用并用藍(lán)色熒光核染料DAPI標(biāo)記原蟲，通過激光共聚焦出到紅細(xì)胞表面（圖 1-7）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2017年全國消除瘧疾進(jìn)展及疫情特征分析[J]. 張麗,豐俊,張少森,夏志貴,周水森.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2018(03)
[2]中國消除瘧疾的持續(xù)挑戰(zhàn):輸入性瘧疾[J]. 曹俊,劉耀寶,曹園園,朱國鼎,周水森.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2018(02)
[3]間日瘧原蟲入侵紅細(xì)胞的相關(guān)蛋白研究進(jìn)展[J]. 張馨心,楚瑞林,玄英花,程洋.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2018(02)
[4]Cyclin D1與細(xì)胞周期調(diào)控[J]. 盧夢(mèng)玲,閆超,賴多,徐漢虹.  生物技術(shù)通報(bào). 2011(10)
[5]MAPK信號(hào)通路研究進(jìn)展[J]. 陳建勇,王聰,王娟,曹禮榮.  中國醫(yī)藥科學(xué). 2011(08)
[6]IL-2基因修飾對(duì)巨噬細(xì)胞殺瘤活性的影響[J]. 邱實(shí),閔志廉,雷虹,弭靜,朱學(xué)軍,趙勇,張明徽,曹雪濤.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(01)
[7]瘧疾與腫瘤的關(guān)系[J]. 陳小平,肖斌權(quán).  中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 1996(04)

博士論文
[1]K5多糖硫酸化衍生物在內(nèi)皮祖細(xì)胞分化和腫瘤血管形成中的作用及其機(jī)制研究[D]. 付海田.江南大學(xué) 2018

碩士論文
[1]弓形蟲效應(yīng)分子GRA15Ⅱ誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化抗小鼠肝癌的研究[D]. 李源玲.安徽醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]TIP樣蛋白在瘧原蟲免疫抑制中功能的初步研究[D]. 黃豫曉.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3124584