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深度測(cè)序法在檢測(cè)HCV不同基因型/亞型混合感染中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-03-22 17:27
  目的將深度測(cè)序法用于HCV感染者中不同基因型/亞型混合感染的檢測(cè)。方法 2例HCV RNA陽(yáng)性血漿標(biāo)本(標(biāo)記為1和2號(hào)標(biāo)本),以NS5B和E1編碼區(qū)為目的基因,經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增后做sanger核苷酸序列測(cè)定,對(duì)其做基因分型發(fā)現(xiàn)2個(gè)編碼區(qū)的分型結(jié)果后,重復(fù)3次NS5B基因PCR擴(kuò)增;合并3次PCR產(chǎn)物用Ion TorrentTM半導(dǎo)體測(cè)序儀做深度測(cè)序。獲得的序列用Geneious軟件的"The map to reference algorithm"和"De novo assembly"2種方法做序列分析和比對(duì),并用Mega 5構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果 sanger測(cè)序:1、2號(hào)標(biāo)本NS5B基因分型均為1b,E1基因分型均為2a;深度測(cè)序:2個(gè)標(biāo)本均為HCV 1b與2a混合感染,其中The map to reference algorithm(Geneious)方法顯示,1號(hào)標(biāo)本中1b占92.7%、2a占3.8%、沒(méi)有比對(duì)到的序列(unused seq)占3.5%,2號(hào)標(biāo)本相應(yīng)為84.3%、5.4%,沒(méi)有比對(duì)到的序列占10.3%;De novo assembly(Geneious)方法顯示,1號(hào)... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)輸血雜志. 2015,28(10)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【文章目錄】:
1材料與方法
2結(jié)果
3討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Peginterferon and ribavirin treatment for hepatitis C virus infection[J]. Akihito Tsubota,Kiyotaka Fujise,Yoshihisa Namiki,Norio Tada.  World Journal of Gastroenterology. 2011(04)
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[3]慢性丙型肝炎的臨床診斷及相關(guān)問(wèn)題[J]. 周永興.  世界華人消化雜志. 2004(10)



本文編號(hào):3094185

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