長脈寬1064nm Nd:YAG激光對紅色毛癬菌的體外干預(yù)作用及機制研究
發(fā)布時間:2021-03-17 23:26
背景:甲真菌病(onychomycosis)是甲板、甲床和甲周圍組織的真菌感染,占所有甲疾病的50%和所有皮膚感染的10%,是最常見的指(趾)甲疾病。大約90%的甲真菌病由皮膚癬菌引起,而皮膚癬菌中的紅色毛癬菌是引起甲真菌病的最主要的病原菌。集體生活中的官兵隊伍中足癬、甲真菌病等淺部真菌病的發(fā)病率和復(fù)發(fā)率很高。目前針對甲真菌病的傳統(tǒng)治療方法存在療效不好或者用藥后發(fā)生不良反應(yīng)的風(fēng)險高等局限性,不適合孕婦、哺乳期婦女、肝腎功能障礙、藥物不耐受的老年人、飛行員等特殊人群。隨著激光醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展,激光治療甲真菌病由于其安全、有效、無毒副作用等優(yōu)勢備受矚目,長脈寬1064nmNd:YAG激光就是常用的治療甲真菌病的激光設(shè)備之一。但也有一些研究發(fā)現(xiàn)使用不同脈寬(調(diào)Q、亞毫秒、毫秒)的1064nm Nd:YAG激光體外照射紅色毛癬菌菌落,卻未能抑制其生長,存在爭議。而且激光治療甲真菌病的具體機制尚不清楚。研究發(fā)現(xiàn)ROS和硝基化產(chǎn)物是抑制/殺滅紅色毛癬菌生長的重要物質(zhì),在光動力療法對紅色毛癬菌的體外生長抑制作用中發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn)活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)介導(dǎo)的...
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同脈沖數(shù)干預(yù)后菌落面積的變化
11對照組,5次脈沖激光組、9次脈沖激光組、11次脈沖激光組,13次脈沖激光組,15次脈沖激光組菌落經(jīng)不同干預(yù)后在光照前、光后第1、3、5、7天的菌落變化,余參數(shù)為能量密度160J/cm2,脈寬40ms,頻率1HZ,光斑直徑為7mm。圖2.不同脈沖數(shù)干預(yù)后菌落生長曲線對照組,5次脈沖激光組、9次脈沖激光組、11次脈沖激光組,13次脈沖激光組,15次脈沖激光組菌落經(jīng)不同干預(yù)后在光照前、光照后第1、3、5、7天的生長曲線,其余參數(shù)為能量密度160J/cm2,脈寬40ms,頻率1HZ,光斑直徑為7mm;各脈沖激光組的菌落面積在光照后不同時間點的菌落面積均小于對照組對應(yīng)時間點的面積,**P<0.01。4.2長脈寬1064nmNd:YAG激光作用下紅色毛癬菌光鏡下形態(tài)結(jié)構(gòu)改變對照組不處理,激光組孢子懸液在160J/cm2,脈寬40ms,頻率1HZ,光斑直徑7mm,選擇9次脈沖垂直照射(5次脈沖干預(yù)24h后仍有肉眼可見菌落生長,故選9次),28℃孵育24h后,對照組和激光組分別用乳酸酚棉蘭和鈣熒光白染色后,在普通光學(xué)顯微鏡和倒置熒光顯微鏡下觀察,都可看出對照組菌絲纖細順滑,形態(tài)正常,而激光組菌絲膨脹粗糙,失去了正常形態(tài)結(jié)構(gòu)(圖3)。提示光鏡下觀察長脈寬1064nmNd:YAG激光對紅色毛癬菌的結(jié)構(gòu)有破壞作用。
12圖3.不同干預(yù)后紅色毛癬菌鏡下形態(tài)結(jié)構(gòu)改變A、B為對照組和激光組經(jīng)乳酸酚棉蘭染色后光鏡下的圖片(400);C、D為對照組和激光組經(jīng)鈣熒光白染色后熒光顯微鏡下的圖片(400)。4.3長脈寬1064nmNd:YAG激光不同脈沖數(shù)干預(yù)紅色毛癬菌的活力變化不同脈沖數(shù)激光干預(yù)紅色毛癬菌孢子懸液6h后,比較各處理組之間的相對活力發(fā)現(xiàn)P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,提示各組孢子懸液間的相對活力有差異。同時5次脈沖激光組與對照組相比,P=0.287,>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,孢子懸液經(jīng)5次脈沖激光照射后的相對活力與對照組無差異。9次和11次脈沖激光組與對照組相比,二者P均<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,孢子懸液經(jīng)9次、11次脈沖激光照射后的相對活力均下降,均小于未照射組,取9次做后續(xù)實驗。9次、11次脈沖激光組與5次脈沖激光組相比,二者P均<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,孢子懸液經(jīng)9次、11次脈沖激光照射后的相對活力均小于5次脈沖激光組?梢钥闯,長脈寬1064nmNd:YAG激光對紅色毛癬菌孢子懸液的活力有抑制/殺滅作用(圖4)。
本文編號:3087899
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同脈沖數(shù)干預(yù)后菌落面積的變化
11對照組,5次脈沖激光組、9次脈沖激光組、11次脈沖激光組,13次脈沖激光組,15次脈沖激光組菌落經(jīng)不同干預(yù)后在光照前、光后第1、3、5、7天的菌落變化,余參數(shù)為能量密度160J/cm2,脈寬40ms,頻率1HZ,光斑直徑為7mm。圖2.不同脈沖數(shù)干預(yù)后菌落生長曲線對照組,5次脈沖激光組、9次脈沖激光組、11次脈沖激光組,13次脈沖激光組,15次脈沖激光組菌落經(jīng)不同干預(yù)后在光照前、光照后第1、3、5、7天的生長曲線,其余參數(shù)為能量密度160J/cm2,脈寬40ms,頻率1HZ,光斑直徑為7mm;各脈沖激光組的菌落面積在光照后不同時間點的菌落面積均小于對照組對應(yīng)時間點的面積,**P<0.01。4.2長脈寬1064nmNd:YAG激光作用下紅色毛癬菌光鏡下形態(tài)結(jié)構(gòu)改變對照組不處理,激光組孢子懸液在160J/cm2,脈寬40ms,頻率1HZ,光斑直徑7mm,選擇9次脈沖垂直照射(5次脈沖干預(yù)24h后仍有肉眼可見菌落生長,故選9次),28℃孵育24h后,對照組和激光組分別用乳酸酚棉蘭和鈣熒光白染色后,在普通光學(xué)顯微鏡和倒置熒光顯微鏡下觀察,都可看出對照組菌絲纖細順滑,形態(tài)正常,而激光組菌絲膨脹粗糙,失去了正常形態(tài)結(jié)構(gòu)(圖3)。提示光鏡下觀察長脈寬1064nmNd:YAG激光對紅色毛癬菌的結(jié)構(gòu)有破壞作用。
12圖3.不同干預(yù)后紅色毛癬菌鏡下形態(tài)結(jié)構(gòu)改變A、B為對照組和激光組經(jīng)乳酸酚棉蘭染色后光鏡下的圖片(400);C、D為對照組和激光組經(jīng)鈣熒光白染色后熒光顯微鏡下的圖片(400)。4.3長脈寬1064nmNd:YAG激光不同脈沖數(shù)干預(yù)紅色毛癬菌的活力變化不同脈沖數(shù)激光干預(yù)紅色毛癬菌孢子懸液6h后,比較各處理組之間的相對活力發(fā)現(xiàn)P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,提示各組孢子懸液間的相對活力有差異。同時5次脈沖激光組與對照組相比,P=0.287,>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,孢子懸液經(jīng)5次脈沖激光照射后的相對活力與對照組無差異。9次和11次脈沖激光組與對照組相比,二者P均<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,孢子懸液經(jīng)9次、11次脈沖激光照射后的相對活力均下降,均小于未照射組,取9次做后續(xù)實驗。9次、11次脈沖激光組與5次脈沖激光組相比,二者P均<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,孢子懸液經(jīng)9次、11次脈沖激光照射后的相對活力均小于5次脈沖激光組?梢钥闯,長脈寬1064nmNd:YAG激光對紅色毛癬菌孢子懸液的活力有抑制/殺滅作用(圖4)。
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