2013年,浙江省疾控中心報道了 一起由X血清群ST-7分離株引起的侵襲性腦膜炎病例。然而,在中國超過50%的侵襲性腦膜炎病是由腦膜炎奈瑟菌A血清群引起;而且,ST-7腦膜炎奈瑟菌株通常屬于A血清群。因此,我們推測該次感染是由于發(fā)生了莢膜轉(zhuǎn)換。為了確定該株腦膜炎奈瑟菌是否來源于血清群X菌和ST-7血清群A的英膜轉(zhuǎn)換,我們對X血清群ST-7株菌和3株A血清群菌ST-7的英膜基因座以及它們的側(cè)翼區(qū)域進行了測序。通過生物信息學方法分析了英膜轉(zhuǎn)換的基因重組位點,發(fā)現(xiàn)該ST-7株替換了來源于X血清群galE至ctrC之間大約8450 bp的DNA片段。同時我們通過莢膜重組體外實驗測定了莢膜轉(zhuǎn)換頻率和涉及的重組基因片段的大小,結(jié)果發(fā)現(xiàn)英膜重組的頻率大約是6.3×10^-6每細菌每微克DNA,莢膜重組所涉及到的重組基因片段大小約為8.1-9.6kb。腦膜炎奈瑟菌被中性粒細胞吞噬后,中性粒細胞可以產(chǎn)生大量的活性氧族（reactive oxygen species,ROS）以影響細菌生存,同時胞內(nèi)低pH環(huán)境也不利于細菌的生長,但是有研究證明該菌在中性粒細胞中數(shù)量呈現(xiàn)先降低后升高的狀態(tài)... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－３．重組Ｉ）ＮＡ片段大小對于從Ａ型至Ｘ型莢膜轉(zhuǎn)換效率的影響??（Ａ）基因組的不?

?菌制成ＯＤｆｔＣＫ）?〇．１的細菌懸液，先加入抑菌型抗生素，半小時后加入殺菌型抗生素，??經(jīng)過一段時間３７?°Ｃ搖菌培養(yǎng)后（李斯特菌為６０?ｍｉｎ，腦膜炎奈瑟菌為９０?ｍｉｎ），??梯度稀釋涂布到無抗性平板，然后挑選單克隆，分別涂到抗性板和無抗性平板確??定敏感克隆的比例，比較經(jīng)過富集實驗和沒有經(jīng)過富集實驗的敏感菌的得率，確??定富集效果。最終基因是否敲除通過菌落ＰＣＲ和測序來確定。??３結(jié)果與討論??３．１殺菌型抗生素的殺菌活性??使用三種氨基糖苷類抗生素驗證其對李斯特菌和腦膜炎奈瑟菌的殺菌效率，??發(fā)現(xiàn)這些抗生素的不同濃度均對李斯特菌和腦膜炎奈瑟菌有殺菌作用，且殺菌效??果與藥物濃度呈正相關(guān)。??

?Ｔｉｍｅ?（ｍｉｎ）?Ｔｉｍｅ?（ｍｉｎ）??圖４－１氨基糖苷類抗生素的殺菌活性??使用三種氨基糖苷類抗生素，卡那霉素（Ｋａｎ），鏈霉素（Ｓｔｒｅｐ）和慶大霉素（Ｇｅｎ）以及它們的三??種不同濃度（５０ｍｇ／Ｌ，?１００ｍｇ／Ｌ，２５０ｍｇ／Ｌ）驗證其對腦膜炎奈瑟菌（Ａ）以及李斯特菌（Ｂ）的殺菌作??用。??４６??


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