目的探討Wnt/β-catenin通路在穩(wěn)定表達(dá)乙型肝炎病毒x蛋白（HBx）的HepG2肝癌細(xì)胞增殖中的作用機(jī)制。方法驗(yàn)證前期構(gòu)建的HepG2/HBx細(xì)胞株能穩(wěn)定表達(dá)HBx蛋白。CCK-8法檢測(cè)HepG2/HBx,HepG2/mock及HepG2 3組細(xì)胞增殖情況,RT-PCR及Western-blot法分別檢測(cè)上述3種細(xì)胞中β-catenin mRNA和蛋白表達(dá)水平;最后檢測(cè)β-catenin選擇性抑制劑XAV939（20μmol/L）對(duì)各組細(xì)胞增殖水平的影響。結(jié)果前期構(gòu)建的HepG2/HBx細(xì)胞株能穩(wěn)定表達(dá)HBx蛋白。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)表明,HepG2/HBx組細(xì)胞增殖能力強(qiáng)于對(duì)照組（P<0.05）。RT-PCR及Western-blot檢測(cè)結(jié)果顯示,HepG2/HBx組細(xì)胞中β-catenin的mRNA及蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組（P<0.05）,而HepG2/mock及HepG2組細(xì)胞之間則無(wú)明顯差別。XAV939能夠抑制各組細(xì)胞的增殖能力,HepG2/HBx組細(xì)胞在加入20μmol/L XAV939作用后的增殖速度較加入相同濃度DMSO的HepG2/HBx組細(xì)胞下降（P&... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016,50(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞
        1.1.2 試劑
        1.1.3 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 驗(yàn)證前期凍存的HepG2/HBx細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)HBx基因
            1.2.1. 1 倒置熒光顯微鏡觀察HepG2/HBx細(xì)胞株GFP蛋白表達(dá)情況
            1.2.1. 2 RT-PCR法鑒定HepG2/HBx細(xì)胞株的HBx mRNA表達(dá)情況
            1.2.1. 3 Western-blot法鑒定HepG2/HBx細(xì)胞株的HBx蛋白表達(dá)情況
        1.2.2 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性
        1.2.3 RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞β-catenin mRNA表達(dá)
        1.2.4 Western-blot法檢測(cè)細(xì)胞β-catenin蛋白表達(dá)
        1.2.5 XAV 939對(duì)細(xì)胞增殖的影響
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 前期凍存的HepG2/HBx細(xì)胞能穩(wěn)定表達(dá)HBX基因
    2.2 HBx蛋白促進(jìn)HepG2細(xì)胞增殖
    2.3 HBx蛋白上調(diào)HepG2細(xì)胞β-catenin mRNA與蛋白表達(dá)水平
    2.4 加入β-catenin抑制劑XAV 939后HepG2/HBx細(xì)胞增殖活性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Significance of hepatitis virus infection in the oncogenic initiation of hepatocellular carcinoma[J]. Caecilia HC Sukowati,Korri E El-Khobar,Susan I Ie,Beatrice Anfuso,David H Muljono,Claudio Tiribelli.  World Journal of Gastroenterology. 2016(04)
[2]Targeting Wnt/β-catenin pathway in hepatocellular carcinoma treatment[J]. Valery Vilchez,Lilia Turcios,Francesc Marti,Roberto Gedaly.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)
[3]Molecular mechanism of hepatitis B virus X protein function in hepatocarcinogenesis[J]. Ming Geng,Xuan Xin,Li-Quan Bi,Lu-Ting Zhou,Xiao-Hong Liu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(38)
[4]環(huán)氧合酶-2在HL7702/HBx肝細(xì)胞增殖中的作用[J]. 李丹,方雪芬,鄭碧云,陳治新,王小眾.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(05)



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