一、研究背景近年來,新發(fā)蜱媒傳染病不斷出現(xiàn),給人類健康造成嚴重危害。由于傳播媒介蜱的廣泛存在,當人們進入自然疫源地時容易被蜱叮咬而感染發(fā)病。蜱攜帶的病原體種類豐富,包括斑點熱群立克次體（Spotted Fever Group Rickettsiae,SFGR）、病毒、細菌、原蟲等幾大類。一只蜱可同時攜帶兩種或兩種以上病原體,被攜帶多種病原體的一只蜱或多只蜱叮咬后可引起復合感染。蜱傳播的新型布尼亞病毒可引起發(fā)熱伴血小板減少綜合征（Severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS）,自2009年發(fā)現(xiàn)首例SFTS患者至今,我國已有25個省份報道了該疾病感染病例,其中,位于中東部地區(qū)的河南省和山東省為高發(fā)省份。SFTS通常表現(xiàn)為發(fā)熱、血小板減少、白細胞減少和胃腸道癥狀,臨床癥狀具有非特異性,需要與人粒細胞無形體病、腎綜合征出血熱等進行鑒別診斷。SFTS發(fā)病高峰期在每年的5月至7月,呈現(xiàn)明顯的季節(jié)性,這主要與傳播媒介蜱的生活習性相關。而且,長角血蜱已經(jīng)被證實為SFTSV的傳播媒介,其主要分布在我國中東部地區(qū),以丘陵和山區(qū)最為豐富,SFTS患者大多是... 

【文章來源】：軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

哨點醫(yī)院位置

軍事科學院碩士學位論文第 7 頁1.2 方法1.2.1 技術(shù)路線圖 1. 2 技術(shù)路線圖1.2.2 從標本中提取核酸1.2.2.1 從全血標本中提取 DNA使用 QIAamp DNA Blood Mini Kit 試劑盒（Cat.No.51106）從病人全血標本中提取DNA。具體實驗步驟如下:（無菌操作均在生物安全柜中進行）實驗前準備：首次使用時，Protease K 粉末加入5.5ml protease solvent，4℃保存?zhèn)溆�；Buffer AW1 和 Buffer AW2 按照瓶壁說明加入對應劑量的無水乙醇，常溫保存；打開恒溫水浴箱鍋預熱到56℃。（1） 吸取200μl Protease K于無菌的1.5ml EP管管內(nèi)底部；（2） 加入200μl病人EDTA抗凝血；（3） 加入200μl Buffer AL，渦旋振蕩15s混勻；（4） 置于56℃水浴箱中10min，過程中多次取出搖勻；（5） 水浴結(jié)束后，將EP管瞬時離心；（6） 加入200μl無水乙醇（96%-100%），渦旋振蕩15s混勻

例中 R. raoultii 的感染情況病例納入結(jié)果 年至 2016 年，在兩家哨點醫(yī)院共納入 1016 例病例，分別在山科大學附屬醫(yī)院納入 124 例病例（A 醫(yī)院）、在河南省信陽市 154 醫(yī)院納入 892 例病例（B 醫(yī)院）。標本中 R. raoultii 基因片段擴增及序列分析結(jié)果經(jīng)巢式PCR擴增SFGR基因片段為陽性且經(jīng)序列分析，共有1ultii，陽性率為 1.5%。其中 A 醫(yī)院有 2 例擴增陽性、B 醫(yī)院有性率分別為：1.6%、1.5%。ompA 基因片段擴增及序列分析院的 2 例樣本和 B 醫(yī)院的 13 例樣本經(jīng)巢式 PCR 擴增 ompA陽性所獲得的序列（KY474580），經(jīng) BLAST 比對，與 R. rask（CP010969）相似性為 99.4%。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]對福建省寧化林區(qū)鼠蜱類中斑點熱群立克次體的檢測[J]. 陳振光,陳敏,鐘建平,畢德增.  中華預防醫(yī)學雜志. 2002(02)



本文編號：3002079