發(fā)熱伴血小板減少綜合征疫源地中斑點(diǎn)熱群立克次體的調(diào)查研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-27 00:20
一、研究背景近年來,新發(fā)蜱媒傳染病不斷出現(xiàn),給人類健康造成嚴(yán)重危害。由于傳播媒介蜱的廣泛存在,當(dāng)人們進(jìn)入自然疫源地時(shí)容易被蜱叮咬而感染發(fā)病。蜱攜帶的病原體種類豐富,包括斑點(diǎn)熱群立克次體(Spotted Fever Group Rickettsiae,SFGR)、病毒、細(xì)菌、原蟲等幾大類。一只蜱可同時(shí)攜帶兩種或兩種以上病原體,被攜帶多種病原體的一只蜱或多只蜱叮咬后可引起復(fù)合感染。蜱傳播的新型布尼亞病毒可引起發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS),自2009年發(fā)現(xiàn)首例SFTS患者至今,我國(guó)已有25個(gè)省份報(bào)道了該疾病感染病例,其中,位于中東部地區(qū)的河南省和山東省為高發(fā)省份。SFTS通常表現(xiàn)為發(fā)熱、血小板減少、白細(xì)胞減少和胃腸道癥狀,臨床癥狀具有非特異性,需要與人粒細(xì)胞無形體病、腎綜合征出血熱等進(jìn)行鑒別診斷。SFTS發(fā)病高峰期在每年的5月至7月,呈現(xiàn)明顯的季節(jié)性,這主要與傳播媒介蜱的生活習(xí)性相關(guān)。而且,長(zhǎng)角血蜱已經(jīng)被證實(shí)為SFTSV的傳播媒介,其主要分布在我國(guó)中東部地區(qū),以丘陵和山區(qū)最為豐富,SFTS患者大多是...
【文章來源】:軍事科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
哨點(diǎn)醫(yī)院位置
軍事科學(xué)院碩士學(xué)位論文第 7 頁1.2 方法1.2.1 技術(shù)路線圖 1. 2 技術(shù)路線圖1.2.2 從標(biāo)本中提取核酸1.2.2.1 從全血標(biāo)本中提取 DNA使用 QIAamp DNA Blood Mini Kit 試劑盒(Cat.No.51106)從病人全血標(biāo)本中提取DNA。具體實(shí)驗(yàn)步驟如下:(無菌操作均在生物安全柜中進(jìn)行)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:首次使用時(shí),Protease K 粉末加入5.5ml protease solvent,4℃保存?zhèn)溆茫籅uffer AW1 和 Buffer AW2 按照瓶壁說明加入對(duì)應(yīng)劑量的無水乙醇,常溫保存;打開恒溫水浴箱鍋預(yù)熱到56℃。(1) 吸取200μl Protease K于無菌的1.5ml EP管管內(nèi)底部;(2) 加入200μl病人EDTA抗凝血;(3) 加入200μl Buffer AL,渦旋振蕩15s混勻;(4) 置于56℃水浴箱中10min,過程中多次取出搖勻;(5) 水浴結(jié)束后,將EP管瞬時(shí)離心;(6) 加入200μl無水乙醇(96%-100%),渦旋振蕩15s混勻
例中 R. raoultii 的感染情況病例納入結(jié)果 年至 2016 年,在兩家哨點(diǎn)醫(yī)院共納入 1016 例病例,分別在山科大學(xué)附屬醫(yī)院納入 124 例病例(A 醫(yī)院)、在河南省信陽市 154 醫(yī)院納入 892 例病例(B 醫(yī)院)。標(biāo)本中 R. raoultii 基因片段擴(kuò)增及序列分析結(jié)果經(jīng)巢式PCR擴(kuò)增SFGR基因片段為陽性且經(jīng)序列分析,共有1ultii,陽性率為 1.5%。其中 A 醫(yī)院有 2 例擴(kuò)增陽性、B 醫(yī)院有性率分別為:1.6%、1.5%。ompA 基因片段擴(kuò)增及序列分析院的 2 例樣本和 B 醫(yī)院的 13 例樣本經(jīng)巢式 PCR 擴(kuò)增 ompA陽性所獲得的序列(KY474580),經(jīng) BLAST 比對(duì),與 R. rask(CP010969)相似性為 99.4%。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]對(duì)福建省寧化林區(qū)鼠蜱類中斑點(diǎn)熱群立克次體的檢測(cè)[J]. 陳振光,陳敏,鐘建平,畢德增. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2002(02)
本文編號(hào):3002079
【文章來源】:軍事科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
哨點(diǎn)醫(yī)院位置
軍事科學(xué)院碩士學(xué)位論文第 7 頁1.2 方法1.2.1 技術(shù)路線圖 1. 2 技術(shù)路線圖1.2.2 從標(biāo)本中提取核酸1.2.2.1 從全血標(biāo)本中提取 DNA使用 QIAamp DNA Blood Mini Kit 試劑盒(Cat.No.51106)從病人全血標(biāo)本中提取DNA。具體實(shí)驗(yàn)步驟如下:(無菌操作均在生物安全柜中進(jìn)行)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:首次使用時(shí),Protease K 粉末加入5.5ml protease solvent,4℃保存?zhèn)溆茫籅uffer AW1 和 Buffer AW2 按照瓶壁說明加入對(duì)應(yīng)劑量的無水乙醇,常溫保存;打開恒溫水浴箱鍋預(yù)熱到56℃。(1) 吸取200μl Protease K于無菌的1.5ml EP管管內(nèi)底部;(2) 加入200μl病人EDTA抗凝血;(3) 加入200μl Buffer AL,渦旋振蕩15s混勻;(4) 置于56℃水浴箱中10min,過程中多次取出搖勻;(5) 水浴結(jié)束后,將EP管瞬時(shí)離心;(6) 加入200μl無水乙醇(96%-100%),渦旋振蕩15s混勻
例中 R. raoultii 的感染情況病例納入結(jié)果 年至 2016 年,在兩家哨點(diǎn)醫(yī)院共納入 1016 例病例,分別在山科大學(xué)附屬醫(yī)院納入 124 例病例(A 醫(yī)院)、在河南省信陽市 154 醫(yī)院納入 892 例病例(B 醫(yī)院)。標(biāo)本中 R. raoultii 基因片段擴(kuò)增及序列分析結(jié)果經(jīng)巢式PCR擴(kuò)增SFGR基因片段為陽性且經(jīng)序列分析,共有1ultii,陽性率為 1.5%。其中 A 醫(yī)院有 2 例擴(kuò)增陽性、B 醫(yī)院有性率分別為:1.6%、1.5%。ompA 基因片段擴(kuò)增及序列分析院的 2 例樣本和 B 醫(yī)院的 13 例樣本經(jīng)巢式 PCR 擴(kuò)增 ompA陽性所獲得的序列(KY474580),經(jīng) BLAST 比對(duì),與 R. rask(CP010969)相似性為 99.4%。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]對(duì)福建省寧化林區(qū)鼠蜱類中斑點(diǎn)熱群立克次體的檢測(cè)[J]. 陳振光,陳敏,鐘建平,畢德增. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2002(02)
本文編號(hào):3002079
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