艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome,AIDS）,是由人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）感染引起的。HIV-1主要感染CD4+T細胞,破壞人體的免疫系統(tǒng),導致免疫系統(tǒng)失去抵抗力,從而引發(fā)各種機會性感染。高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療（highly active antiretroviral therapy,HAART）的出現(xiàn),延緩了大多數(shù)感染者的發(fā)病時間,使死亡率大幅下降,但是,該方法卻不能清除潛伏感染細胞中的HIV-1,主要包括靜息CD4+T細胞、單核-巨噬細胞和樹突狀細胞等。單核巨噬細胞可以抵抗病毒誘導的細胞凋亡,而成為HIV-1病毒復制和潛伏的重要場所。不僅如此,感染HIV-1的單核巨噬細胞可以將病毒傳遞給CD4+T細胞,促進了 HIV-1的潛伏感染和潛伏庫的擴大。近年來的研究發(fā)現(xiàn),在HIV-1感染早期,外周血單核細胞即可高表達CD169,CD169可以與HIVgp120上的唾液酸結(jié)合,促進病毒與細胞的結(jié)合。為了研究CD169在HIV-1感染單核細胞中的作用,我們進行了以下三部分... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３?ＨＩＶ?ｇａｇ－ｉＧＦＰ質(zhì)粒鑒定電泳圖??

１．?Ｍｌｕ?Ｉ?酶切?ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９?質(zhì)粒??用ＭＩｕ?Ｉ酶切ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９質(zhì)粒后，得到單一的大小約為丨丨．７ｋｂ的??線性質(zhì)粒。單酶切后的電泳圖如圖６，條帶單一明亮，回收大小約為１１．７ｋｂ的片段。??Ｍ?１２?３?４?５??ｌＯＯＯＯｂｐ?—??注：Ｍ：?ＤＬ１００００；?１－５：?ＭＩｕＩ?酶切質(zhì)粒。??圖６?Ｍｌｕ?Ｉ酶切ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９質(zhì)粒電泳圖??Ｎｏｔｅ：?Ｍ：?ＤＬ１００００；?ｌ－５：Ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｉｓ?ｃｕｔｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ｅｎｚｙｍｅ?ＭＩｕ?Ｉ．??Ｆｉｇ．６?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｃｕｔｔｅｄ?ｂｙ?ＭＩｕ?Ｉ??２．?Ｓｇｆ?ｉ酶切上述回收的片段??用Ｓｇｆｌ酶切步驟１中回收的片段，酶切后得到約４．３ｋｂ和７．４ｋｂ的兩條帶，單??酶切后的電泳圖如圖７

４０００ｂｐ?—??注：Ｍ：?ＤＬ１００００；?１－２：?Ｓｇｆ丨酶切上述回收的片段。??圖７?Ｓｇｆ?Ｉ酶切上述回收片段電泳圖??Ｎｏｔｅ：?Ｍ：?ＤＬ１００００；?ｌ－２：Ｔｈｅ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｉｓ?ｃｕｔｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ｅｎｚｙｍｅ?Ｓｇｆ?Ｉ．??Ｆｉｇ．７?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｃｕｔｔｅｄ?ｂｙ?Ｓｇｆ?Ｉ??３．?ＭＩｕ?Ｉ?和?Ｘｈｏ?１?雙酶切?ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９?質(zhì)粒??用ＭＩｕ?Ｉ和Ｘｈｏ?Ｉ雙酶切ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９質(zhì)粒，雙酶切后得到約７ｋｂ、??３．９ｋｂ和０．８ｋｂ大小的三條片段，雙酶切后的電泳圖如下，大小正確，條帶清晰明亮，??回收大小約為〇．８ｋｂ的片段。??Ｍ?１?２?３?４??ｌＯＯＯｂｐ—？！??５００ｂｐ?—？?Ｉ??注：Ｍ：?ＤＬ２０００；?１－４：?Ｍｌｕ?１?和?Ｘｈｏ?１?雙酶切?ＰＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９。??圖８?Ｍｌｕ?Ｉ和Ｘｈｏ丨雙酶切ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＧＦＰ－ＣＤ１６９質(zhì)粒電泳圖??Ｎｏｔｅ：?Ｍ：?ＤＬ?１００００；?ｌ－４：Ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｉｓ?ｃｕｔｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ｅｎｚｙｍｅ?ＭＩｕ?Ｉ?ａｎｄ?Ｘｈｏ?Ｉ．??Ｆｉｇ．８?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｃｕｔｔｅｄ?ｂｙ?ＭＩｕ?Ｉ?ａｎｄ?Ｘｈｏ?Ｉ??５．?Ｘｈｏ?丨酶切?ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＨＡ?質(zhì)粒??用Ｘｈｏ?１酶切ｐＣＭＶ６－ＡＣ－ＨＡ質(zhì)粒，單酶切后得到大小約為５．９ｋｂ大小的一條??片段

【參考文獻】：
期刊論文
[1]ESCRT系統(tǒng):一個多功能的蛋白轉(zhuǎn)運及膜剪切機器[J]. 黃歡,李萬杰,楊冬.  中國生物化學與分子生物學報. 2013(02)
[2]CD14+CD16+亞型單核細胞的研究進展[J]. 王鑫,康富標,王桂平,張國民.  免疫學雜志. 2012(10)
[3]內(nèi)吞體分選轉(zhuǎn)運復合體（ESCRT）及其在包膜病毒出芽中的作用[J]. 李朝飛,田宏剛,劉同先.  生物工程學報. 2012(09)
[4]巨噬細胞極化與人類免疫缺陷病毒感染[J]. 趙敏,黃磊.  傳染病信息. 2011(06)
[5]艾滋病研究現(xiàn)狀[J]. 邢杰,李淑清,王力.  雞西大學學報. 2001(02)



本文編號：2991999