目的研究4-羥基-3-甲基-2-烯基焦磷酸（HMBPP）和多肽E7對(duì)結(jié)核患者胸水及臍帶血中γδT細(xì)胞分泌白介素6（IL-6）的影響和機(jī)制。方法收集自廣州市胸科醫(yī)院臨床診斷結(jié)核性胸膜炎患者胸水標(biāo)本18例,自中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院正常健康產(chǎn)婦臍帶血標(biāo)本17例。使用流式分選技術(shù)分選出結(jié)核性胸水和臍帶血中的γδT細(xì)胞與CD277+CD14+單核-巨噬細(xì)胞混合培養(yǎng),分別用HMBPP或E7刺激后,運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分泌IL-6的γδT細(xì)胞百分率及表達(dá)程序性死亡配體1（PD-L1）的CD277+CD14+單核-巨噬細(xì)胞百分率;利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中IL-6、PD-L1的mRNA表達(dá)水平;用ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6的含量;用PD-L1特異性小分子干擾RNA（siRNA）沉默PD-L1的表達(dá)以檢測(cè)PD-L1是否參與分泌IL-6;在分選于結(jié)核性胸水和臍帶血的共培養(yǎng)細(xì)胞中,HMBPP或E7刺激后上述指標(biāo)在每一時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組間分別采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較其差異,分析其統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果在結(jié)核性胸水和臍帶血中,給予HMBPP或E7刺激24 h之后,與對(duì)照組相比IL-6+γδ+T細(xì)胞占比顯... 

【文章來源】：中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2020年08期

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
資料與方法
    一、標(biāo)本與材料
        1. 標(biāo)本：
        2. 主要試劑和儀器：
    二、研究方法
        1. 單個(gè)核細(xì)胞分離、流式分選：
        2. 細(xì)胞培養(yǎng)：
        3. 流式染色：
        4. RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)熒光定量PCR:
        5. ELISA法檢測(cè)細(xì)胞因子：
        6. 基因沉默技術(shù)：
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    一、HMBPP和E7刺激上調(diào)γδT細(xì)胞胞內(nèi)IL-6的表達(dá)量
    二、HMBPP和E7刺激上調(diào)γδT細(xì)胞胞內(nèi)IL-6在mRNA水平的表達(dá)量
    三、HMBPP和E7刺激上調(diào)γδT細(xì)胞胞外IL-6的分泌量
    四、HMBPP和E7刺激上調(diào)CD277+CD14+單核-巨噬細(xì)胞中PD-L1在mRNA水平的表達(dá)量
    五、沉默PD-L1表達(dá)可降低IL-6在mRNA水平的表達(dá)量
討論



本文編號(hào)：2952816