由結(jié)核分枝桿菌感染引起的結(jié)核病仍然是世界范圍內(nèi)高發(fā)的感染性疾病之一,增加了全球公共衛(wèi)生負(fù)擔(dān)�？ń槊纾˙acillus Calmette-Guérin,BCG）預(yù)防效果有限,研發(fā)新型結(jié)核疫苗為預(yù)防控制結(jié)核病的關(guān)鍵。研究發(fā)現(xiàn),在結(jié)核分枝桿菌休眠期,由休眠生存調(diào)節(jié)子（dormancy survival regulon,DosR）編碼的調(diào)控蛋白R(shí)v2029c具有成為新型結(jié)核疫苗相關(guān)抗原的的潛能,而其引起的免疫應(yīng)答及相關(guān)應(yīng)答機(jī)制尚未完全闡明。目的:探索DosR抗原Rv2029c在先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中的作用及其相關(guān)機(jī)制。方法:（1）利用基因工程技術(shù)獲取重組蛋白R(shí)v2029c（rRv2029c）,用rRv2029c刺激C57BL/6小鼠腹腔巨噬細(xì)胞和THP-1細(xì)胞。通過(guò)Western Blot技術(shù)檢測(cè)小鼠巨噬細(xì)胞Toll樣受體2（toll-like receptor 2,TLR2）的表達(dá)和核轉(zhuǎn)錄因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）的磷酸化,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)巨噬細(xì)胞表面共刺激分子CD80、CD86和CD40的表達(dá),初步探究Rv2029c在巨噬細(xì)胞活化中的作用。（2）用rRv... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

rRv2029c表達(dá)純化與鑒定

（注：**表示 P<0.01）圖 2-2 rRv2029c 誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞聚集ng/mL、500ng/mL 和 1000ng/mL 三個(gè)不同劑量 rRv2029c 分別作用 24 h 后，收取細(xì)胞并提取蛋白，Western Blot 法檢測(cè)巨噬細(xì)胞 TLp-p65）的表達(dá)情況。如圖 2-3A 所示，rRv2029c 作用下，小鼠巨噬F-κB（p-p65）表達(dá)量發(fā)生改變。對(duì)蛋白條帶進(jìn)行分析，如圖 2-3照組相比，不同劑量 rRv2029c 作用后，小鼠巨噬細(xì)胞 TLR2 表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；如圖 2-3C 所示，與對(duì)照組相比0ng/mL）rRv2029c 作用下，小鼠巨噬細(xì)胞 NF-κB（p-p65）表達(dá)量增統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果表明，rRv2029c 可上調(diào)小鼠巨噬細(xì)胞同時(shí)低劑量（100 ng/mL）rRv2029c 引起了下游 NF-κB 磷酸化。

州大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)核分枝桿菌DosR抗原Rv2029c誘導(dǎo)免疫應(yīng)答及其相關(guān)機(jī)制分析，如圖 2-4 B 所示，與對(duì)照組相比，CD40 分子表達(dá)增加，差異具有統(tǒng)意義（P<0.01）；CD80 分子表達(dá)增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)明，rRv2029c 可誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞表面共刺激分子 CD40、CD80 和 CD表達(dá)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]DosR抗原Rv1737c誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化及其炎癥調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D]. 吳聰.蘭州大學(xué) 2018
[2]三種結(jié)核DosR蛋白的生理效應(yīng)及其免疫特性研究[D]. 王永祥.蘭州大學(xué) 2017



本文編號(hào)：2952157