研究背景:季節(jié)性流感是一種在全球范圍內(nèi)肆虐且容易在人際間傳播的急性病毒感染。由于目前臨床上的抗流感藥物主要靶向于病毒蛋白,且流感病毒耐藥株的頻繁出現(xiàn),限制了抗流感藥物的研究和療效。宿主與病毒之間關(guān)系密不可分,于是研究人員提出了靶向宿主的抗流感策略。流感病毒進(jìn)入靶細(xì)胞和進(jìn)行復(fù)制的過程,都需要細(xì)胞中的大量的宿主因子的協(xié)助。高熱是流感常見的癥狀,在高溫的情況下,往往會(huì)激起機(jī)體的熱休克反應(yīng),而熱休克因子1（HSF1）是參與熱休克反應(yīng)的主要因子。通過查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),HSF1是重要的調(diào)控轉(zhuǎn)錄的宿主因子,能夠調(diào)節(jié)各種細(xì)胞功能以對(duì)抗多種外界刺激,如熱刺激、化學(xué)刺激、病毒感染等等。HSF1不僅在熱休克反應(yīng)中發(fā)揮功能,而且在衰老和疾病中都具有多種作用。研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)HSF1與HIV病毒潛伏,登革熱病毒以及其他RNA病毒的復(fù)制有關(guān)。因此,我們猜測(cè)HSF1是否會(huì)通過調(diào)控各種細(xì)胞功能,從而參與甲型流感病毒的復(fù)制過程。研究目的:本課題選用HSF1作為研究對(duì)象,探究宿主因子HSF1對(duì)甲型流感病毒復(fù)制的影響,并進(jìn)一步闡明HSF1在病毒感染中的機(jī)制,為尋找新的抗病毒靶點(diǎn)提供依據(jù)和思路,致力于尋找新靶點(diǎn)以對(duì)抗流感病毒。實(shí)驗(yàn)方... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．ＲＮＰ在流感病毒生命周期中的作用??Ｐｉｃｔｕｒｅ?２．?Ｔｈｅ?ｒｏｌｅ?ｏｆ?ＲＮＰ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?ｖｉｒｕｓｅｓ１＇４１??

?項(xiàng)士學(xué)位論文???Ｂ??Ｔｉｍｅ／ｈｐ．ｉ．?０?２?４?６?８?１２??ｐＨＳＦｌ（Ｓｅｒ３２０）丨簽漏繼麵??ｎｐ?—??ＧＡＰＤＨ?擊魯？娜??夭１．５？｜?＊?＊??（ｌｕｌｌｌｌ??Ｍ?０?２?４?６?８?１２??Ｔｉｍｅ?／?ｈ?ｐ．ｉ．??ｃ?Ｉ，．??ｉｈｉｉｕｉ??＾?０?２?４?６?８?１２??Ｔｉｍｅ／ｈ?ｐ．ｉ．??圖１－１甲型流感病毒的感染激活Ａ５４９細(xì)胞中的ＨＳＦｌ。（Ａ）用ＭＯＩ?＝?１的ＷＳＮ感染Ａ５４９??細(xì)胞Ｉ?ｈ后，換上空培繼續(xù)培養(yǎng)１２?ｈ，使用免疫印跡法檢測(cè)流感病毒感染后不同時(shí)間內(nèi)ＨＳＦ１??和ｐＨＳＦｌ?（Ｓｅｒ３２６）蛋白的表達(dá)。（Ｂ）用ＭＣＭ＝１的ＷＳＮ感染Ａ５４９細(xì)胞１?ｈ后，換上空??培繼續(xù)培泠Ｉ２ｈ，使丨ｉ］免疫印跡法檢測(cè)流感病毒感染后不同時(shí)間內(nèi)ｐＨＳＦＩ?（Ｓｅｒ３２０）蛋白??的表達(dá)。（Ｃ）川ＭＯＩ?１的ＷＳＮ感染Ａ５４９細(xì)胞Ｉ?ｈ后，換上空培繼續(xù)培養(yǎng)１２?ｈ，使用??２１??

ｓ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?Ａ?ｖｉｒｕｓ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．??２．流感病毒感染可以促進(jìn)ＨＳＦｌ的Ｓｅｒ３２６位的磷酸化蛋白的入核??ＨＳＦ１上Ｓｅｒ３２６的磷酸化在應(yīng)激誘導(dǎo)的ＨＳＦ１激活中起重要作用，并且在磷??酸化后形成三聚體進(jìn)入細(xì)胞核，從而發(fā)揮調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄作用Ｉ２９】。為了進(jìn)一步確認(rèn)流??病毒感染后，細(xì)胞內(nèi)ＨＳＦ１被激活的情況，在細(xì)胞感染病毒后，我們通過細(xì)胞核??蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白抽提試劑盒對(duì)細(xì)胞中蛋白進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)磷酸化的ＨＳＦ１??（Ｓｅｒ３２６）蛋白轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中（圖１－２）。根據(jù)這些結(jié)果，說明了流感病毒感??染促進(jìn)了?Ａ５４９細(xì)胞中ＨＳＦ１的激活。??Ｔｉｍｅ／ｈｐ．ｉ．?０?１２?１８??ｐＨＳＦｌ（Ｓｅｒ３２６）「？轉(zhuǎn)?令?＼?Ｃｙｔｏｐｌａｓｍ??ＧＡＰＤＨ?｜?纖擊?ｍｍ??ｐＨＳＦｌ（Ｓｅｒ３２６）?ｍｍ?Ｎｕｃｌｅｕｓ??ＴＴ＾??１１Ｊ?＊?－?－???圖１－２流感病毒感染可以促進(jìn)ＨＳＦｌ的Ｓｅｒ３２６位的磷酸化蛋白的入核。用ＭＯＩ?＝?１的ＷＳＮ??感染Ａ５４９細(xì)胞１ｈ后，換上空培繼續(xù)培養(yǎng)１２、１８?ｈ，使用免疫印跡法檢測(cè)不同時(shí)間內(nèi)細(xì)胞??核和細(xì)胞質(zhì)中ｐＨＳＦｌ?（Ｓｅｒ３２６）蛋白。??２２??


本文編號(hào)：2947815