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miR-144調(diào)控Atg4a在巨噬細胞清除結(jié)核分枝桿菌中的作用研究

發(fā)布時間:2020-12-26 07:49
  目的研究miR-144調(diào)控自噬相關(guān)基因4a(autophagy related gene,Atg4a)在巨噬細胞(macrophage)清除結(jié)核分枝桿菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)中的作用。方法選取單核巨噬細胞細胞(RAW264.7)作為研究對象,用MTB感染RAW264.7細胞,miR-144抑制劑進行轉(zhuǎn)染。實驗為RAW264.7細胞組、MTB+RAW264.7細胞組、miR-144陰性對照組、miR-144抑制劑組。實時熒光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法測定各組細胞miR-144表達水平,蛋白印跡(western blotting,WB)法測定轉(zhuǎn)染后Atg4a、Bcl-2、Bax、caspase3、caspase9表達水平,流式細胞儀測定各組細胞凋亡率、1.7LC3B-Ⅱ+和/或Ag85A+水平,TargetScan數(shù)據(jù)庫預測miR-144的靶基因并用雙熒光素酶實驗驗證。結(jié)果與正常RAW264.7細胞組相比... 

【文章來源】:預防醫(yī)學情報雜志. 2020年12期

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

miR-144調(diào)控Atg4a在巨噬細胞清除結(jié)核分枝桿菌中的作用研究


各組RAW264.7細胞中Bcl-2、Bax、caspase3、caspase9表達水平

細胞,統(tǒng)計學,細胞凋亡,意義


經(jīng)MTB感染后,MTB+RAW264.7細胞組細胞凋亡率與正常RAW264.7細胞組相比顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。miR-144抑制劑組細胞凋亡率與MTB+RAW264.7細胞組、miR-144陰性對照組相比顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.001)。miR-144陰性對照組與MTB+RAW264.7細胞組相比差異無統(tǒng)計學意義(P=0.831)(圖2,表2)。圖2 各組RAW264.7細胞凋亡情況

細胞,細胞凋亡,情況


各組RAW264.7細胞凋亡情況

【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR-17-5p靶向自噬相關(guān)蛋白ATG7調(diào)控巨噬細胞抗結(jié)核分枝桿菌感染作用的研究[J]. 洪丹彤,張帆,王淑娥,王紅霞,劉昆梅,徐廣賢,霍正浩,郭樂.  中國生物工程雜志. 2019(06)
[2];o酶A-膽固醇;D(zhuǎn)移酶1對BCG誘導巨噬細胞自噬的調(diào)控作用[J]. 周彥兵,楊易,呂翠萍,張海雯,徐金瑞,王玉炯.  免疫學雜志. 2018(07)
[3]結(jié)核分枝桿菌H37Rv刺激巨噬細胞后差異表達lncRNA分析及鑒定[J]. 譚楊,劉勝,羅鳳玲,章曉聯(lián).  中國生物工程雜志. 2018(05)
[4]Ag85A抗體IgG表型在結(jié)核性胸膜炎診斷中的應(yīng)用[J]. 蘇永勝,宋磊,李丹,張秀芳,華樹成.  中國老年學雜志. 2016(21)
[5]維生素D誘導自噬對巨噬細胞清除結(jié)核分枝桿菌的作用[J]. 萬春輝,杜先智.  中國免疫學雜志. 2015(04)
[6]miR-144通過靶向Atg4a調(diào)控卡介苗和雷帕霉素誘導的RAW264.7細胞自噬[J]. 周林林,郭樂,湯建中,張愛君,劉學英,徐廣賢.  細胞與分子免疫學雜志. 2015(02)



本文編號:2939315

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