研究目的:探討結(jié)核分枝桿菌感染過程中,外周血正常密度中性粒細(xì)胞（NDGs）向低密度中性粒細(xì)胞（LDGs）轉(zhuǎn)化的相關(guān)機(jī)制。研究方法:采集結(jié)核病患者的外周血,密度梯度離心后在外周血單個核細(xì)胞（PBMC）層通過免疫磁珠分選法得到LDGs,在粒細(xì)胞層通過裂解紅細(xì)胞得到NDGs。分別在不經(jīng)過預(yù)處理和在PMA刺激的條件下對兩種細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色,分析并比較其中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（NETs）的釋放水平。LDGs生成與NETs釋放關(guān)系探討:（1）用PMA刺激誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞釋放NETs,通過免疫熒光技術(shù)檢測中性粒細(xì)胞釋放NETs的情況,同時用流式細(xì)胞術(shù)檢測LDGs的生成情況。（2）在結(jié)核分枝桿菌（Mtb）感染中性粒細(xì)胞的基礎(chǔ)上,分別采用Zn²⁺螯合劑TPEN下調(diào)NETs的生成和采用PMA刺激上調(diào)NETs的生成,探討調(diào)控NETs的釋放對LDGs生成的影響。中性粒細(xì)胞活性氧（ROS）的產(chǎn)生與LDGs形成關(guān)系探討:（1）通過檢測Mtb感染后中性粒細(xì)胞ROS產(chǎn)生情況探討ROS產(chǎn)生與LDGs形成間的可能關(guān)系（2）在Mtb感染的基礎(chǔ)上,分別用N-乙酰半胱氨酸（NAC）和二聯(lián)苯碘（DPI）預(yù)處... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

流式細(xì)胞技術(shù)檢測LDGs與NDGs的純度

圖 2.2 免疫熒光技術(shù)檢測各組 NETs 的生成情況A , 各組細(xì)胞 NETs 生成的免疫熒光圖B , 各組細(xì)胞 NETs 生成的定量結(jié)果注： ** P<0.001 ***P<0.0001中性粒細(xì)胞形成 LDG 的同時伴隨 NETs 釋放 Mtb 感染健康人來源的純化正常密度中性粒細(xì)胞s 的水平及 NETs 生成情況。結(jié)果顯示：Mtb 感s[（1.07±0.91）% vs（22.48±6.70）%, P<0.0001 轉(zhuǎn)化為 LDGs 的過程中伴隨大量 NETs 的釋放, 如tb 感染后 RFU 水平從對照組的（0.000515 ± 0.0 0403），如圖 2.4-B。

圖 2.2 免疫熒光技術(shù)檢測各組 NETs 的生成情況A , 各組細(xì)胞 NETs 生成的免疫熒光圖B , 各組細(xì)胞 NETs 生成的定量結(jié)果注： ** P<0.001 ***P<0.0001中性粒細(xì)胞形成 LDG 的同時伴隨 NETs 釋 Mtb 感染健康人來源的純化正常密度中性粒細(xì)Gs 的水平及 NETs 生成情況。結(jié)果顯示：Mtb 感Gs[（1.07±0.91）% vs（22.48±6.70）%, P<0.00s 轉(zhuǎn)化為 LDGs 的過程中伴隨大量 NETs 的釋放, Mtb 感染后 RFU 水平從對照組的（0.000515 ± 00 0403），如圖 2.4-B。


本文編號：2933611