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關(guān)于預(yù)防囊型包蟲(chóng)病所致過(guò)敏的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-22 09:19
  目的通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探究除術(shù)前運(yùn)用地塞米松外,其他預(yù)防囊型包蟲(chóng)病囊液過(guò)敏的方法,為未來(lái)該方面的研究提供一定的參考。方法1、建立人源囊型包蟲(chóng)原頭節(jié)感染小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型:選擇CE2型囊型包蟲(chóng)病患者,用內(nèi)囊囊皮沖洗及囊液抽取分離等方法提取制備出每1ml含10000個(gè)原頭節(jié)(成活率大于90%)的原液,選用體重20g左右六周齡雌性BALB/c小鼠,每只接種0.2ml。2、飼養(yǎng)4月后把小鼠隨機(jī)分為五組分別為:空白對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、地塞米松預(yù)處理組、抗組胺藥預(yù)處理組和地塞米松聯(lián)合抗組胺藥預(yù)處理組,給予相應(yīng)預(yù)處理30分鐘后以人源囊性包蟲(chóng)粗制囊液進(jìn)行攻擊發(fā)敏。3、每5min對(duì)小鼠進(jìn)行癥狀評(píng)分,共觀察記錄1小時(shí)。然后取血測(cè)量小鼠血細(xì)胞變化情況并殺鼠觀察造模情況。結(jié)果1、BALB/c小鼠人源囊型包蟲(chóng)原頭節(jié)造模成功率為81.7%,空白對(duì)照組囊型包蟲(chóng)病囊液所致過(guò)敏發(fā)生率為0%,實(shí)驗(yàn)對(duì)照組囊型包蟲(chóng)病囊液所致過(guò)敏發(fā)生率為92.3%。發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)小鼠出現(xiàn)了不同程度的過(guò)敏癥狀,與空白對(duì)照組相比血常規(guī)顯示相關(guān)炎性細(xì)胞增加。這些指標(biāo)表明BALB/c小鼠人源性囊型包蟲(chóng)病所致過(guò)敏反應(yīng)模型建立成功;2、嚴(yán)重過(guò)敏反應(yīng)(評(píng)分4分及以上... 

【文章來(lái)源】:青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

關(guān)于預(yù)防囊型包蟲(chóng)病所致過(guò)敏的實(shí)驗(yàn)研究


CE2型肝囊型包蟲(chóng)病外囊完整剝除術(shù)標(biāo)本剖開(kāi)后得到的子(孫)囊

原頭,臺(tái)盼藍(lán),箭頭,顯微鏡


7圖2-3:40倍顯微鏡下可見(jiàn)大量呈簇狀聚集未被臺(tái)盼藍(lán)著色原頭節(jié),紅箭頭為被臺(tái)盼藍(lán)著色死亡原頭節(jié),黃箭頭為未破裂的微孫囊,藍(lán)箭頭為破裂微孫囊遺留囊皮。2.4.2攻擊發(fā)敏用囊液抗原的制備方法選用CE2型肝包蟲(chóng)患者,手術(shù)方式選擇肝囊型包蟲(chóng)病外囊完整剝除術(shù),切下標(biāo)本后剪開(kāi)外板,選取部分內(nèi)囊囊皮及完整子囊放置入備好的無(wú)菌標(biāo)本袋中,余下外板部分內(nèi)囊囊皮及子囊送病理檢測(cè)。留取在標(biāo)本袋中的樣本放置在37℃保溫桶內(nèi),然后移至無(wú)菌細(xì)胞間試驗(yàn)臺(tái)。用5ml注射器無(wú)菌直接抽取采集子囊及孫囊囊液,自然沉淀1小時(shí),抽出上清液,上清液即為本實(shí)驗(yàn)攻擊發(fā)敏所用人源細(xì)粒棘球蚴囊液抗原[27],紫外分光光度法測(cè)定其蛋白含量為2.85mg/ml。-80℃冰箱凍存,致敏前24小時(shí)取出置入4℃冷藏,攻擊發(fā)敏前溫浴至37℃。2.4.3人源細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)感染小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立100只小鼠寄至青海大學(xué)附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室后稱重并分成15籠(其中10籠7只,5籠6只),適應(yīng)性飼養(yǎng)10天后用小動(dòng)物超聲檢查腹腔未見(jiàn)明顯異常,遂給予人源細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)懸液接種(圖2-4)。每只BALB/c小鼠用1ml注射器分別經(jīng)右側(cè)腹腔(刺破腹腔后進(jìn)針深度約1cm)注射細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)懸液0.2ml(含2000個(gè)原頭節(jié))[28,29],共接種小鼠80只,建立人源細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)感染小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。2.4.4小鼠的飼養(yǎng)接種完畢后在通風(fēng)動(dòng)物房飼養(yǎng)小鼠4個(gè)月:每?jī)商旖o予添加飼料及飲水,觀察小鼠狀態(tài)及是否有死亡情況并及時(shí)處理;每周給予更換墊料;每月記錄小鼠體重(圖2-5)。圖2-4:接種圖2-5:飼養(yǎng)

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接種

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[10]泡型肝包蟲(chóng)病的外科治療現(xiàn)狀[J]. 陳哲宇.  中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2016(05)

博士論文
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[2]棘球蚴囊液蛋白質(zhì)組學(xué)及主要分泌蛋白對(duì)宿主免疫調(diào)節(jié)的影響[D]. 王慧.新疆醫(yī)科大學(xué) 2015
[3]新型糖皮質(zhì)激素對(duì)過(guò)敏性哮喘的快速抑制作用[D]. 張璐定.第二軍醫(yī)大學(xué) 2008
[4]DNA指紋圖與微衛(wèi)星DNA技術(shù)在近交系大、小鼠遺傳監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用研究[D]. 陳振文.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[5]細(xì)粒棘球蚴病致過(guò)敏反應(yīng)及休克的模型研制和發(fā)病機(jī)理的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D]. 鄭宏.新疆醫(yī)科大學(xué) 2001



本文編號(hào):2931522

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