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唾液中水痘-帶狀皰疹病毒檢測的臨床應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-16 12:58
  背景帶狀皰疹由水痘-帶狀皰疹病毒(varicella-zostervirus,VZV)感染引起。其典型的臨床表現(xiàn)為發(fā)于單側(cè)的紅斑基礎(chǔ)上出現(xiàn)簇集性水皰,并伴有神經(jīng)痛,醫(yī)師常據(jù)此對(duì)其作出診斷。但臨床上尚有一些不伴皮損發(fā)生的特殊類型帶狀皰疹,如頓挫型帶狀皰疹、眼帶狀皰疹、帶狀皰疹腦膜炎等,此時(shí)診斷常需依靠實(shí)驗(yàn)室檢查,如檢測患者腦脊液或血單核淋巴細(xì)胞中VZVDNA、抗體等。而VZVDNA亦存在于帶狀皰疹患者的唾液中,唾液中VZV DNA的檢測可能有助于診斷VZV引起的相關(guān)疾病,對(duì)唾液進(jìn)行檢測,可以避免侵入性的檢查,如腰椎穿刺等。目的探討唾液在帶狀皰疹診斷中的意義,分析唾液中VZV DNA載量的影響因素及其與帶狀皰疹患者臨床癥狀、細(xì)胞因子IL-2、IL-6、IL-18水平以及是否發(fā)展為帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛(Postherpetic neuralgia,PHN)之間的關(guān)系,分析唾液在帶狀皰疹發(fā)病過程中評(píng)估患者病情及預(yù)后的臨床應(yīng)用價(jià)值,為帶狀皰疹患者的臨床管理提供新的思路。方法1,納入2018年1月至2019年8月就診于我院的帶狀皰疹患者63例,記錄患者情況并根據(jù)病情評(píng)分表分為輕中度組和重度組,在其治... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:68 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

唾液中水痘-帶狀皰疹病毒檢測的臨床應(yīng)用研究


圖1-1帶狀皰疹患者??Figure?1-1?patients?withherpes?zoster??

標(biāo)準(zhǔn)曲線,反應(yīng)體,反應(yīng)條件,標(biāo)準(zhǔn)曲線


?領(lǐng)士學(xué)位論文???標(biāo)準(zhǔn)曲線?V?=?-3.496x+41.93??R2?=?0.9997??30?_???????'?::?■??I?s?15???????C?*??I?10????????5????0?2?4?6?8?10??IgVZVDNA拷貝值??圖1-2標(biāo)準(zhǔn)曲線??Figure?1-2?standard?curve??(2)?PCR反應(yīng)體系及反應(yīng)條件??反應(yīng)體系共20?|iL,包括5?pL?DNA、各0.5?pL上、下游引物、10?pL?2X??SYBRGreenqPCRSuperMix、4nLdh20。反應(yīng)條件:95°C2?分鐘,95°C10?秒、??60°C32秒,擴(kuò)增40個(gè)循環(huán),在60°C下采集熒光。??(3)具體操作步驟如下:??①從-20°C冰箱中取出己提取好的DNA,置于室溫下融化,短時(shí)離心后置于??試管架上;??②在PCR管中依次加入0.5吣上游引物、0.5?pL下游引物、10?pL2X?SYBR??GreenqPCRSuperMix、4|iLdh2〇。將以上配置好的反應(yīng)體系在震蕩機(jī)短時(shí)震蕩??使其充分混合均勻;??③向裝有己配置好反應(yīng)體系試劑的PCR管中按順序依次加入DNA、陽性質(zhì)??控品、陰性質(zhì)控品,各5仏。至于離心機(jī)中,3000rpm,常溫下離心1分鐘,使??其混合均勻、液體不沾管壁。在PCR管一側(cè)突出處做好標(biāo)記,切勿在管壁上標(biāo)??記以免影響熒光的收集;??④將己標(biāo)記好的PCR管按順序置于PCR擴(kuò)增儀中,按照上述反應(yīng)條件于儀??11??

擴(kuò)增曲線,唾液,樣本,統(tǒng)計(jì)學(xué)


?第一章唾液在帶狀皰疹診斷中的應(yīng)用價(jià)值觀察???異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t?=?9.43,P<0.01)。VZVDNA陽性的血清樣本中,患者組??病毒載量(2.25?±1.70)亦高于對(duì)照組(1.10?±0.25),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t?=?4.71,??P<?0.01)(如圖?1-5?所示)。??Delta?Rn?vs?Cvcte??,KC?■?*?二??…?:-"??s?^?'?ft?I'pM??j。?n:?i/f?ijfif??:??*■*??— ̄^一:.?二……??4"'.?;?-;?i?:?!??*1??i.r??-W.IOM?,ynr*m.C^i?.??圖1-3?VZV?DNA擴(kuò)增曲線??Figure?1-3?Real-time?PCR?amplification?curve?of?VZV?DNA??1?2?3?4?5?6?7?8??i?p??:>〇〇〇??l?ooo??7。荆ǎ??500??2r>o??i?〇〇??圖1-4部分樣品PCR產(chǎn)物電泳圖??Fig?l-4Part?of?samples’electrophoretogram?of?PCR?products??注:1為陽性對(duì)照;2為陰性對(duì)照;3?5為不同病人的唾液樣本;6?8為血清樣本??1?is?positive?control;?2?is?negative?control;?3-5?are?saliva?of?different?patients?respectively;?6-8?are??serum?samples?.??14??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):2920196

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