目的通過人群研究和細胞學實驗,探討去泛素化酶USP7在乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B）中的動態(tài)變化及抗炎作用機制。以期為乙型病毒性肝炎的治療和二級預防提供理論基礎。方法研究從人群和細胞兩個層面進行探究。1人群研究:選取2018年8月～2018年12月于石家莊市第五醫(yī)院被診斷為乙型肝炎的初治住院患者的臨床基本資料及血標本。根據(jù)納入排除標準,篩選乙型病毒性肝炎初治患者98例。分別采用實時熒光定量PCR（RT-PCR）法和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清中USP7、NF-κB p65、IL-6及TNF-αmRNA及蛋白表達水平。2細胞學實驗:將Hep G2.2.15細胞分為6組,分別為空白對照組（control組）,單純轉(zhuǎn)染組（siRNA-USP7組）,陰性對照組（siRNA-NC組）,恩替卡韋干預組（ETV組）,恩替卡韋聯(lián)合轉(zhuǎn)染組（ETV+siRNA-USP7組）,恩替卡韋干預陰性對照組（ETV+siRNA-NC組）。首先,確定Hep G2.2.15細胞是否可穩(wěn)定轉(zhuǎn)染乙型肝炎病毒,此株細胞作為乙型病毒性肝炎功能研究的體外細胞模型是否成立。其次,用CCK8法... 

【文章來源】：華北理工大學河北省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

乙肝患者不同時點血清ALT、AST的動態(tài)變化

-9-經(jīng)正態(tài)性檢驗后發(fā)現(xiàn)ALT與AST資料均呈偏態(tài)分布，故采用非參數(shù)檢驗進行統(tǒng)計分析。結果顯示，隨著治療周期的延長，ALT、AST的表達水平逐漸降低，并且與剛入院未治療前相比，治療1w、2w、3w、4w后的ALT、AST表達水平差異均有統(tǒng)計學意義（ALT與AST的x2分別為55.64，37.54；均P<0.05），提示，肝損傷程度隨著治療周期的延長減輕。見圖1。1.2.3患者血清中USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-amRNA表達量比較為探討乙肝病毒導致了肝臟炎性損傷以及USP7參與乙肝病毒導致的肝臟炎癥反應這一現(xiàn)象，本研究對USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的mRNA進行動態(tài)監(jiān)測。結果顯示，隨著治療周期的延長，USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的mRNA表達水平也逐漸降低，且治療1w、2w、3w、4w與入院后治療前相比，差異均具有統(tǒng)計學意義（USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的x2值分別為17.53、13.94、17.54、20.00，均P<0.05）。提示，USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的mRNA的變化趨勢與肝功指標ALT、AST趨于一致。詳見圖2、3。注：*：與0w相比，P<0.05。圖2不同時點USP7、NF-κBp65mRNA相對表達量注：*：與0w相比，P<0.05。圖3不同時點IL-6、TNF-αmRNA相對表達量

-9-經(jīng)正態(tài)性檢驗后發(fā)現(xiàn)ALT與AST資料均呈偏態(tài)分布，故采用非參數(shù)檢驗進行統(tǒng)計分析。結果顯示，隨著治療周期的延長，ALT、AST的表達水平逐漸降低，并且與剛入院未治療前相比，治療1w、2w、3w、4w后的ALT、AST表達水平差異均有統(tǒng)計學意義（ALT與AST的x2分別為55.64，37.54；均P<0.05），提示，肝損傷程度隨著治療周期的延長減輕。見圖1。1.2.3患者血清中USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-amRNA表達量比較為探討乙肝病毒導致了肝臟炎性損傷以及USP7參與乙肝病毒導致的肝臟炎癥反應這一現(xiàn)象，本研究對USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的mRNA進行動態(tài)監(jiān)測。結果顯示，隨著治療周期的延長，USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的mRNA表達水平也逐漸降低，且治療1w、2w、3w、4w與入院后治療前相比，差異均具有統(tǒng)計學意義（USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的x2值分別為17.53、13.94、17.54、20.00，均P<0.05）。提示，USP7、NF-κBp65、IL-6、TNF-α的mRNA的變化趨勢與肝功指標ALT、AST趨于一致。詳見圖2、3。注：*：與0w相比，P<0.05。圖2不同時點USP7、NF-κBp65mRNA相對表達量注：*：與0w相比，P<0.05。圖3不同時點IL-6、TNF-αmRNA相對表達量


本文編號：2916973