【摘要】：乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是一種非細(xì)胞毒性嗜肝DNA病毒。HBV感染后可導(dǎo)致肝炎、肝硬化甚至肝癌的發(fā)生。每年約有65萬(wàn)人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。HBV感染儼然已成為全球性的重要衛(wèi)生安全問(wèn)題。針對(duì)慢性HBV感染,抗病毒治療顯得尤為重要。迄今為止,抗乙型肝炎病毒藥物包括兩大類(lèi),一類(lèi)是有限療程的具有免疫調(diào)節(jié)作用的干擾素α(包括普通干擾素和聚乙二醇干擾素α),另一類(lèi)是無(wú)固定療程的具有直接抑制HBV DNA聚合酶作用的核苷或核苷酸類(lèi)似物(nucleoside/nucleotide analogues,NAS),包括拉米夫定(lamivudine,LAM)、阿德福韋酯(adefovirdipivoxil,ADV)、替比夫定(telbivudine,LDT),恩替卡韋(entecavir,ETV)及替諾福韋(tenofovirdisoproxilfumarate,TDF)等。核苷(酸)類(lèi)藥物抗病毒的療效已經(jīng)得到認(rèn)可。但病毒耐藥變異也是核苷類(lèi)藥物應(yīng)用過(guò)程中無(wú)法避免的問(wèn)題,一旦出現(xiàn)病毒耐藥變異就意味著該抗病毒藥物的療效下降或者是無(wú)效,患者病情也有可能進(jìn)一步惡化。由于HBV編碼逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)的HBVDNA聚合酶具有高效復(fù)制的特性,HBV的逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏校對(duì)活性,同時(shí)由于其缺乏3'-5'外切酶活性,在復(fù)制過(guò)程中通過(guò)mRNA為中間體逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制時(shí),容易發(fā)生堿基配對(duì)錯(cuò)誤,這種錯(cuò)配率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他的DNA病毒,因而導(dǎo)致HBV基因高突變的特性,進(jìn)而產(chǎn)生耐藥,這也可能是預(yù)存耐藥存在的原因。問(wèn)題是我們臨床遇到的病毒耐藥變異是預(yù)存耐藥還是藥物誘導(dǎo)發(fā)生?既然有預(yù)存耐藥存在的可能,那么是否有必要在服用核苷類(lèi)藥物之前開(kāi)展HBV基因耐藥變異檢測(cè)?還有預(yù)存耐藥變異與藥物誘導(dǎo)耐藥變異有無(wú)不同?耐藥變異通常位于HBV聚合酶區(qū)的逆轉(zhuǎn)錄酶(Reverse transcriptase region,RT)區(qū),而編碼表面抗原的HBV S基因(nt 155-835)完全重疊于其逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)(Reverse transcriptase RT)(131-1161)之內(nèi),兩者在同一方向上通過(guò)移碼的方式各自翻譯。因此RT區(qū)某些堿基發(fā)生改變時(shí),不可避免地會(huì)導(dǎo)致S基因相應(yīng)位點(diǎn)發(fā)生改變。而逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)第181位氨基酸的變異不僅僅使得HBV對(duì)阿德福韋酯產(chǎn)生耐藥,而且對(duì)拉米夫定、恩替卡韋、替比夫定、替諾福韋的藥物敏感性均呈現(xiàn)不同程度下降,因此,rt181位是一個(gè)核苷和核苷酸藥物的交叉耐藥位點(diǎn)。而該位點(diǎn)變異可引起S基因的改變。有研究表明HBV rtA181T的變異可導(dǎo)致其對(duì)應(yīng)位點(diǎn)的S基因由TGG→TAG,TAG為終止密碼子,不再編碼蛋白質(zhì),致使S抗原出現(xiàn)sW172*的改變,導(dǎo)致表達(dá)S抗原的55個(gè)氨基酸的截短,此種變異也稱(chēng)為rtA181T/sW172*變異,此種變異可影響到HBV的生物學(xué)特性及其致病性。這種截短了的病毒蛋白通常有分泌障礙,被阻滯在肝細(xì)胞內(nèi),無(wú)法分泌到血液中,血清HBsAg含量隨之降低。另外,RtA181T變異除了可導(dǎo)致S抗原出現(xiàn)sW172*的改變之外,亦可導(dǎo)致S抗原出現(xiàn)sW172L的變化,此變異株產(chǎn)生的病毒蛋白亦有分泌障礙,血清中測(cè)得的HBsAg也會(huì)降低。有研究表明rtA181T/sW172*變異可誘導(dǎo)肝癌的發(fā)生。從目前研究結(jié)果來(lái)看,rt181位變異后可能會(huì)造成多種核苷酸類(lèi)藥物耐藥或敏感性下降,也可能會(huì)影響表面抗原的表達(dá)和對(duì)HBV感染的監(jiān)測(cè),更有甚者可能會(huì)導(dǎo)致肝癌的發(fā)生。而我們?cè)谂R床上觀察到rtA181變異不僅存在于肝癌患者中,在慢性乙型肝炎患者中也存在。因此本研究旨在探索在慢性HBV感染者中是否存在預(yù)存耐藥?預(yù)存耐藥的模式是怎樣的?預(yù)存的耐藥變異與抗病毒藥物誘導(dǎo)的耐藥變異有無(wú)不同?耐藥變異與HBV基因型及病情進(jìn)展有無(wú)關(guān)系?rt181位變異后對(duì)S基因影響如何?該位點(diǎn)變異對(duì)臨床有無(wú)影響?基于這些想法我們?cè)O(shè)立了該項(xiàng)研究。本研究分以下三部分進(jìn)行:第一部分:慢性乙型肝炎病毒感染者預(yù)存耐藥分析第二部分:病毒學(xué)突破的慢性乙型肝炎病毒感染者HBV多聚酶區(qū)基因序列分析第三部分:慢性乙型肝炎患者rt181位變異對(duì)S區(qū)基因的影響第一部分:慢性乙型肝炎病毒感染者預(yù)存耐藥分析研究背景如何阻止或者延緩慢性乙型肝炎患者病情的進(jìn)展對(duì)于肝病研究者而言是一個(gè)嚴(yán)峻的問(wèn)題。因?yàn)榈侥壳盀橹谷藗內(nèi)匀粵](méi)有找到能絕對(duì)消滅乙型肝炎病毒的方法或武器。對(duì)于慢性乙型肝炎的治療,目前抗病毒治療是唯一能夠有效的最大限度抑制病毒復(fù)制和延緩病情進(jìn)展的方法。在抗病毒藥物中,NAs對(duì)CHB的抗病毒療效已得到肯定。但目前所有口服NAs,包括拉米夫定(LAM)、阿德福韋(ADV)、替比夫定(LDT)、恩替卡韋(ETV)等在治療過(guò)程中均可出現(xiàn)不同程度的耐藥。因此耐藥株的存在給乙型肝炎的治療帶來(lái)了極大的困難。但這些耐藥株是在用藥之始就存在還是由于用藥而誘發(fā)的呢?慢性乙型肝炎患者在服用NAs抗病毒治療過(guò)程中亦有原發(fā)無(wú)應(yīng)答現(xiàn)象,那么其原發(fā)無(wú)應(yīng)答的原因何在?是否與其感染的乙型肝炎病毒本身就有預(yù)存耐藥變異存在呢?如果預(yù)存耐藥變異存在,這種預(yù)存耐藥的模式如何,其發(fā)生與肝病進(jìn)展的不同階段有沒(méi)有關(guān)系?耐藥與基因型有無(wú)關(guān)系?目前這些問(wèn)題都還沒(méi)有闡明。是否應(yīng)該在抗病毒治療之前進(jìn)行基因耐藥檢測(cè)也說(shuō)法不一。為了明確上述問(wèn)題,我們?cè)O(shè)立了此項(xiàng)研究,以期能夠了解在慢性HBV感染者中是否存在預(yù)存耐藥,預(yù)存耐藥與基因型的關(guān)系,預(yù)存耐藥與病情進(jìn)展的關(guān)系。研究目的1.了解江蘇徐州地區(qū)慢性乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型分布情況。2.觀察慢性乙型肝炎病毒感染者中存在預(yù)存耐藥情況及其耐藥變異發(fā)生的模式。3.觀察預(yù)存耐藥與HBV基因型及病情的關(guān)系。研究方法收集357例沒(méi)有抗病毒治療的慢性HBV感染者外周血,全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肝功能相關(guān)指標(biāo),化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法定量測(cè)定HBV-M。利用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序法檢測(cè)HBVDNA聚合酶(P)區(qū)基因序列,測(cè)序結(jié)果在NCBI的Genotyping tool上進(jìn)行比對(duì),確認(rèn)所擴(kuò)增的病人血清中HBV DNA基因型。所有計(jì)量數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x± s)表示,比較B、C基因型HBV-DNA水平,先行方差齊性檢驗(yàn),然后進(jìn)行單因素方差分析并進(jìn)行兩兩比較。不同基因型之間變異發(fā)生率的比較采用x2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為雙側(cè)α = 0.05,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果357例慢性乙型肝炎病毒感染者中發(fā)現(xiàn)與拉米夫定相關(guān)的預(yù)存耐藥變異在慢性乙型肝炎(CHB)組檢測(cè)到8例(3.7%),肝硬化(LC)組13例(11.7%),肝癌(HCC)組6例(21.4%),與阿德福韋酯相關(guān)的預(yù)存耐藥變異在CHB組檢測(cè)到10例(4.6%),LC組15例(13.5%),HCC組4例(14.5%);拉米夫定和阿德福韋酯均相關(guān)的預(yù)存耐藥變異在CHB組檢測(cè)到2例(0.9%),LC組1例(0.9%),HCC組1例(3.6%)。與拉米夫定相關(guān)的預(yù)存耐藥變異及與阿德福韋酯相關(guān)的預(yù)存耐藥變異發(fā)生率各組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。且上述耐藥變異均發(fā)生在C基因型中,B基因型中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有預(yù)存耐藥的發(fā)生。檢測(cè)到的耐藥模式主要是 rtS213T(4.8%),rtV214A(3.6%),rtN/H238T/D(3.1%)的變異。原發(fā)耐藥變異(rtA181T/V,rtM204V/I/S,rtN236T,and rtM250I/V)發(fā)生率較低,而補(bǔ)償變異如 rtV173L,rtV214A,rtQ215S,and rt N/H238T/D 卻有較高的發(fā)生率。研究結(jié)論1.江蘇徐州地區(qū)的慢性乙型肝炎感染者感染的HBV基因型主要為C型和B型。2.在慢性乙型肝炎病毒感染者中存在拉米夫定和阿德福韋酯的預(yù)存耐藥,預(yù)存耐藥模式主要是補(bǔ)償變異。3.預(yù)存耐藥的發(fā)生與肝病進(jìn)展有關(guān),肝病終末期預(yù)存耐藥發(fā)生率高。4.預(yù)存耐藥發(fā)生與基因型有關(guān),HBVC基因型較B型容易發(fā)生耐藥變異。第二部分:病毒學(xué)突破的慢性乙型肝炎患者HBV多聚酶區(qū)耐藥變異分析研究背景在慢性乙型肝炎抗病毒治療的藥物中,核苷(酸)類(lèi)似物(nucleos(t)ide analogues,NAs)的療效已得到肯定。但目前所有口服NAs,包括拉米夫定(lamivudine,LAM)、阿德福韋(adefovir dipivoxil,ADV)、替比夫定(telbivudine,LDT)等在治療過(guò)程中均可出現(xiàn)不同程度的耐藥性。雖然初始選用恩替卡韋(entecavir,ETV)耐藥率比較低,而對(duì)已經(jīng)發(fā)生拉米夫定耐藥的患者用恩替卡韋治療5年其耐藥發(fā)生高達(dá)51%,對(duì)拉米夫定耐藥的HBV合并HIV感染者在使用TDF治療過(guò)程中也出現(xiàn)了病毒學(xué)突破。因此耐藥株的存在給慢性乙型肝炎的治療帶來(lái)了極大的困難。近來(lái)前瞻性研究表明抗病毒藥物的耐藥對(duì)于乙型肝炎肝硬化失代償患者尤其是挽救治療失敗的患者而言將增加其肝細(xì)胞癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。為了避免耐藥的發(fā)生,指南推薦在NAs中替諾福韋和恩替卡韋作為抗病毒治療之首選。但由于在中國(guó)TDF上市晚(直到2014年7月還沒(méi)有上市),同時(shí)因?yàn)榻?jīng)濟(jì)的原因,很多慢性乙型肝炎感染者在初始抗病毒時(shí)往往選用的是ADF或是LAM或者是兩藥的聯(lián)合應(yīng)用,因此這些人在抗病毒治療過(guò)程中需要密切觀察,定期復(fù)查HBVDNA,一旦發(fā)現(xiàn)病毒學(xué)突破,盡早檢測(cè)耐藥變異,據(jù)此及時(shí)調(diào)整抗病毒治療方案,控制病情進(jìn)展,減少病毒突破乃至反彈對(duì)機(jī)體造成的再次打擊相當(dāng)重要。另外病毒學(xué)突破的患者中其基因耐藥變異與HBV基因型及病情進(jìn)展有關(guān)還是與所用抗病毒藥物有關(guān)到目前為止沒(méi)有明確結(jié)論。為此我們?cè)O(shè)定了如下研究。研究目的1.探討病毒學(xué)突破的慢性HBV感染者基因耐藥變異情況。2.探討病毒學(xué)突破的慢性HBV感染者基因耐藥變異與HBV基因型及病情的關(guān)系。研究方法收集141例出現(xiàn)病毒學(xué)突破的慢性HBV感染者外周血,PCR擴(kuò)增HBV聚合酶(P)基因,PCR產(chǎn)物直接測(cè)序檢測(cè)HBV的聚合酶基因序列。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肝功能相關(guān)指標(biāo),化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法定量測(cè)定HBV-M。在招募的患者中,慢性乙型肝炎(CHB)59例,肝硬化(LC)68例,原發(fā)性肝癌(PLC)14例。曾用阿德福韋酯(ADV)治療51例,拉米夫定(LAM)或替比夫定(LDT)治療39例,恩替卡韋(ETV)治療10例,LAM或LDT續(xù)貫ADV治療41例。組間變異率采用x2檢驗(yàn)比較。研究結(jié)果1.在不同的治療組之間,患者的年齡、性別、ALT水平及HBVDNA載量比較都沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.05。2.HBV基因型的分布141例病毒學(xué)突破的慢性HBV感染的患者中檢測(cè)到的HBV基因型主要是C型138/141(97.9%),B型僅有3例(2.1%)。沒(méi)有檢測(cè)到其他的基因型。3.不同治療組耐藥變異模式分布在ADV治療組檢測(cè)到的耐藥變異模式主要是rtA181T/V或rtS213T單點(diǎn)變異及含有rtA181T/V或rtS213T的多點(diǎn)變異模式,LAM/LDT治療組檢測(cè)到的變異模式主要是rtL180M+ rtM204I/V/S和rtM204I/V/S或含有204位點(diǎn)的多點(diǎn)變異模式;ETV治療組出現(xiàn)耐藥模式為含有rtL180M+ rtM204I/V/S的多位點(diǎn)變異同時(shí)存在;LAM/LDT序貫ADV組出現(xiàn)耐藥變異類(lèi)型為多位點(diǎn)同時(shí)對(duì)ADV及LAM耐藥的復(fù)雜變異模式。出現(xiàn)耐藥變異頻數(shù)最多的是rtM204I/V/S(35.5%),其次是rtL180M(22.7%),再就是 rtA181T/V(19.1%)。4.耐藥變異與治療藥物的關(guān)系比較不同抗病毒藥物治療組發(fā)生耐藥變異的頻數(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)LAM/LDT序貫ADV組出現(xiàn)耐藥變異30例(30/41,82.1%),LAM/LDT組出現(xiàn)耐藥變異28例(28/39,71.8%),ADV抗病毒治療組出現(xiàn)耐藥變異20例(20/51,42%),ETV組出現(xiàn)耐藥變異3例(3/10,30%)。各組耐藥變異發(fā)生有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.01。5.耐藥變異與病情的關(guān)系141例慢性HBV感染者中,CHB組共59例,出現(xiàn)耐藥變異30例(30/59,50.8%),LC組68例,出現(xiàn)耐藥變異40例(40/68,58.8%),PLC組14例,出現(xiàn)耐藥變異12例(12/14,85.7%)。似乎隨著病情進(jìn)展耐藥發(fā)生比例有增加之勢(shì),但統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒(méi)有差異,P=0.059。研究結(jié)論1.拉米夫定/替比夫定序貫阿德福韋酯治療后出現(xiàn)耐藥變異發(fā)生率最高,其次是單用拉米夫定或替比夫定,恩替卡韋耐藥變異率最低。2.病毒學(xué)突破的耐藥變異發(fā)生率與初始選擇的核苷類(lèi)藥物有關(guān)而與病情進(jìn)展無(wú)關(guān)。3.病毒學(xué)突破的耐藥變異發(fā)生率與HBV基因型有關(guān),C型比B型更容易發(fā)生耐藥。第三部分:慢性乙型肝炎患者rt181位變異對(duì)S區(qū)基因序列的影響研究背景核苷(酸)類(lèi)(nucleos(t)ide analogues,NAs)藥物抗乙型肝炎病毒的療效已經(jīng)得到醫(yī)學(xué)界的廣泛認(rèn)可。但隨著NAS治療時(shí)間的延長(zhǎng)往往會(huì)出現(xiàn)不同程度的病毒耐藥,從而影響其抗病毒治療效果,而逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)第181位氨基酸的變異給核苷類(lèi)藥物抗病毒治療提出了一個(gè)新的“挑戰(zhàn)”,因?yàn)樵撐稽c(diǎn)變異后會(huì)導(dǎo)致HBV不僅僅對(duì)阿德福韋酯產(chǎn)生耐藥,而且對(duì)拉米夫定、恩替卡韋、替比夫定、替諾福韋的藥物敏感性均呈現(xiàn)不同程度下降,且該位點(diǎn)變異不僅可在阿德福韋酯治療過(guò)程中誘發(fā),也可在替比夫定治療過(guò)程中出現(xiàn)。在從未抗病毒治療的患者存在耐藥變異被稱(chēng)為預(yù)存耐藥,而我們前期研究中發(fā)現(xiàn)rtA181V/T變異也存在于從未抗病毒治療的慢性乙型肝炎患者中。目前體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,rtA181T/V變異的病毒對(duì)大部分核苷(酸)類(lèi)藥物均呈現(xiàn)一定程度的耐藥性。由于HBV的S基因(nt155-835)完全重疊于其逆轉(zhuǎn)錄酶RT基因(nt131-1161),故當(dāng)RT區(qū)某些堿基位點(diǎn)發(fā)生突變變異時(shí),會(huì)導(dǎo)致S區(qū)相應(yīng)位點(diǎn)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致S基因轉(zhuǎn)錄形成的密碼子發(fā)生變化,進(jìn)而導(dǎo)致密碼子編碼的HBsAg蛋白發(fā)生相應(yīng)變化。rtA181T突變模式也可導(dǎo)致HBsAg發(fā)生截短突變或替換突變,如rtA181T/sW172*變異及rtA181T/sW172L變異。這種有截短/替換突變的有缺陷的HBsAg,可導(dǎo)致肝細(xì)胞發(fā)生癌變也可導(dǎo)致血清中HBsAg水平的下降。在臨床中我們觀察到rt181位變異不僅發(fā)生在肝癌患者中,在慢性乙型肝炎患者中也存在。那么在慢性乙型肝炎患者中存在的預(yù)存耐藥與阿德福韋酯誘發(fā)的耐藥變異模式有無(wú)不同?rt181位基因變異與S區(qū)基因變異有無(wú)關(guān)系?對(duì)HBsAg的表達(dá)有何影響?這種變異與基因型有無(wú)關(guān)系?基于這種想法我們?cè)O(shè)定了此項(xiàng)研究。研究目的1.了解慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者的預(yù)存耐藥變異與基因型的關(guān)系。2.了解預(yù)存耐藥及阿德福韋酯誘發(fā)耐藥變異的異同。3.探討慢性乙型肝炎患者rt181位變異對(duì)S區(qū)基因序列的影響。4.了解Rt181變異對(duì)血清HBsAg含量的影響。研究方法募集298例CHB患者,其中包括226例未抗病毒的CHB患者和曾用阿德福韋酯抗病毒治療效果不佳或出現(xiàn)病毒學(xué)突破的72例CHB患者,采集外周血,全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肝功能相關(guān)指標(biāo),化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法定量測(cè)定HBV-M,PCR產(chǎn)物直接測(cè)序法檢測(cè)HBVP基因序列,設(shè)計(jì)特異性引物擴(kuò)增S區(qū)并進(jìn)行基因序列分析。計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn);定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x± s)表示,統(tǒng)計(jì)方法采用單因素方差分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為雙側(cè)α =0.05,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果1.298例CHB患者共檢測(cè)到2種基因型,其中C型281例(94.3%),B型17 例(5.7%)。2.226例未抗病毒治療的CHB患者中,C基因型211例,B基因型15例。檢測(cè)到預(yù)存耐藥變異16例(7.1%),基因型均為C型。其中與拉米夫定耐藥相關(guān)的有rtV 207L 1例,rtS213T 5例;與阿德福韋酯耐藥相關(guān)的有8例,分別為rtA181T1例,rtV214A3例,rtN/H 238D/S/T4例。與拉米夫定和阿德福韋酯耐藥均相關(guān)的 rtV207I+ rtN/H 238D 1 例,rtS213T + rtN/H 238S 1 例。B基因型中未檢測(cè)到耐藥變異。3.72例阿德福韋酯治療的CHB患者中,C基因型70例,B基因型2例。發(fā)生耐藥變異的有30例(41.7%),其中與拉米夫定耐藥相關(guān)的有1例,為rtS213T;與阿德福韋酯耐藥相關(guān)的有25例,分別為rtA181T 7例,rtA181V 10例,rtA181T+rtN236T 2 例,rtA181T+rt238T 1 例,rtA181V+rt238S 2 例,rtV 214A 1 例,rtN 236T 2例;檢測(cè)到與拉米夫定和阿德福韋酯耐藥均相關(guān)的變異有4例,分別為 rtA181T +rtV207I 1 例,rtA181T +rtV207I +rtN236T 1 例,rtS213T+ rtV 214A 1例,rtN 236T+ rtM 250L 1例。上述發(fā)生基因變異的病例中有1例為B基因型,為rtN 236T變異,其余均為C基因型。4.兩種基因型CHB患者在年齡、性別、HBVDNA載量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.有5例rtA181T變異的患者及2例rtA181T+rtN236T患者,其對(duì)應(yīng)的S區(qū)第172位氨基酸由色氨酸(Trp,W)變?yōu)榱涟彼?Leu,L),即rtA181T/sW172L,其中1例rtA181T變異的患者同時(shí)發(fā)生了 sw182位氨基酸的堿基突變?yōu)榻K止密碼子TGA。3例rtA181T變異的患者和另外3例含有rtA181T多位點(diǎn)變異(rtA181T+rtV207I、rtA181T +rtV207I+ rtN236T 和 rtA181T+rt238T)的患者 S 區(qū)編碼第172位氨基酸的堿基突變?yōu)榻K止密碼子(TGA),造成S區(qū)的截尾突變,即rtA181T/sW172*;10 例 rtA181V 變異的及 2 例 rtA181V+rt238S 患者的 S 區(qū)第 173位氨基酸由亮氨酸(Leu,L)變?yōu)楸奖彼?Phe,F),即rtA181V/sL173F。6.298例CHB患者中,檢測(cè)到2例Pre-S2起始密碼子突變(ATG→ATA),該2例患者均為rtA181V變異者。7.RtA181T變異組與rtA181V變異組患者的年齡及血清病毒量之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。rtA181T和rtA181V變異組患者血清HBsAg水平顯著低于未變異組患者,(P0.01)。研究結(jié)論1.在CHB患者中存在預(yù)存耐藥。2.HBVC基因型比B基因型容易發(fā)生耐藥變異。3.預(yù)存耐藥與ADV誘導(dǎo)耐藥變異的模式不同,ADV誘導(dǎo)耐藥變異發(fā)生的主要模式原發(fā)耐藥變異,而預(yù)存耐藥變異主要是次要耐藥變異。并且預(yù)存耐藥發(fā)生率低于阿德福韋酯誘導(dǎo)耐藥。4.在阿德福韋酯治療過(guò)程中出現(xiàn)病毒學(xué)突破或治療效果欠佳時(shí)發(fā)生rtA181T/V風(fēng)險(xiǎn)較高。5.HBV rtA181T變異均伴隨著sW172L或sW172*的變異。rtA181V變異均伴隨著sL173F的變異,也可能伴隨有Pre-S2起始密碼的終止變異。6.rtA181變異的CHB患者HBsAg水平下降。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R512.62
【圖文】：

圖２不同診斷組耐藥變異頻數(shù)的比較逡逑■有對(duì)荇邋■無(wú)耐藥逡逑■Ｉ邐■■邐＿逡逑yU邐：Ｉ邐，逡逑７0％逡逑６0％逡逑Ｅ邋＼媻逡逑Ｈ邐ｍｍ邐■逡逑使性乙型肝炎邐肝破化邐原發(fā)性肝瘙逡逑

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9 尚明全;張e

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