【摘要】：目的建立森林腦炎、登革熱和乙型腦炎病毒液相蛋白芯片檢測(cè)方法。方法將病毒抗原包被微球,利用病毒抗體和陽(yáng)性血清建立并優(yōu)化森林腦炎、登革熱和乙型腦炎病毒液相蛋白芯片檢測(cè)方法,評(píng)價(jià)方法的敏感性和準(zhǔn)確性。結(jié)果建立的液相蛋白芯片檢測(cè)方法病毒抗體和生物素標(biāo)記二抗的孵育時(shí)間均為1 h,生物素標(biāo)記羊抗兔Ig G和羊抗人Ig G最佳稀釋度分別為1∶200和1∶100,能對(duì)3種病毒單一和混合感染準(zhǔn)確檢測(cè)。對(duì)295份臨床樣本的檢測(cè)結(jié)果表明,該方法具有高通量、快速、敏感、特異的特點(diǎn)。結(jié)論本方法能對(duì)3種蟲媒病毒同時(shí)進(jìn)行快速檢測(cè),為蟲媒病毒的篩查檢測(cè)提供一種新方法。
【圖文】：

現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)2015年第42卷第6期ModernPreventiveMedicine，2015，Vol.42，NO.62.4人感染森林腦炎、登革熱和乙型腦炎病毒液相蛋白芯片多重檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，所建立的液相蛋白芯片檢測(cè)方法與實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法比較，對(duì)于檢測(cè)登革熱病毒，敏感性為69.05%，特異性為79.50%，，診斷效率為76.41%；對(duì)于檢測(cè)乙型腦炎病毒，敏感性為72.73%，特異性為81.00%，診斷效率為80.57%；與血清學(xué)ELISA檢測(cè)方法比較，對(duì)于檢測(cè)登革熱病毒，敏感性為70.87%，特異性為85.64%，診斷效率為80.28%；對(duì)于檢測(cè)乙型腦炎病毒，敏感性為51.61%，特異性為90.60%，診斷效率為79.51%。血清學(xué)ELISA與實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法比較，對(duì)于檢測(cè)登革熱病毒，敏感性為64.29%，特異性為75.50%，診斷效率為72.18%；對(duì)于檢測(cè)乙型腦炎病呈下降趨勢(shì)，當(dāng)血清樣品在進(jìn)行1∶1至1∶50稀釋時(shí)，能檢測(cè)到較好的MFI。隨著生物素標(biāo)記羊抗人IgG稀釋度增加，MFI呈下降趨勢(shì)，當(dāng)進(jìn)行1∶100和1∶200稀釋時(shí)，MFI差別不大，選取生物素標(biāo)記羊抗人IgG進(jìn)行1∶100稀釋。本方法因森林腦炎病人血清樣品缺乏，未進(jìn)行檢測(cè)。從已檢測(cè)的2種病人血清樣品的結(jié)果來看，實(shí)驗(yàn)無交叉反應(yīng)。圖2森林腦炎、登革熱和乙型腦炎病毒液相蛋白芯片多重檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)結(jié)果·1067·

現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)2015年第42卷第6期ModernPreventiveMedicine，2015，Vol.42，NO.62.4人感染森林腦炎、登革熱和乙型腦炎病毒液相蛋白芯片多重檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，所建立的液相蛋白芯片檢測(cè)方法與實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法比較，對(duì)于檢測(cè)登革熱病毒，敏感性為69.05%，特異性為79.50%，診斷效率為76.41%；對(duì)于檢測(cè)乙型腦炎病毒，敏感性為72.73%，特異性為81.00%，診斷效率為80.57%；與血清學(xué)ELISA檢測(cè)方法比較，對(duì)于檢測(cè)登革熱病毒，敏感性為70.87%，特異性為85.64%，診斷效率為80.28%；對(duì)于檢測(cè)乙型腦炎病毒，敏感性為51.61%，特異性為90.60%，診斷效率為79.51%。血清學(xué)ELISA與實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法比較，對(duì)于檢測(cè)登革熱病毒，敏感性為64.29%，特異性為75.50%，診斷效率為72.18%；對(duì)于檢測(cè)乙型腦炎病呈下降趨勢(shì)，當(dāng)血清樣品在進(jìn)行1∶1至1∶50稀釋時(shí)，能檢測(cè)到較好的MFI。隨著生物素標(biāo)記羊抗人IgG稀釋度增加，MFI呈下降趨勢(shì)，當(dāng)進(jìn)行1∶100和1∶200稀釋時(shí)，MFI差別不大，選取生物素標(biāo)記羊抗人IgG進(jìn)行1∶100稀釋。本方法因森林腦炎病人血清樣品缺乏，未進(jìn)行檢測(cè)。從已檢測(cè)的2種病人血清樣品的結(jié)果來看，實(shí)驗(yàn)無交叉反應(yīng)。圖2森林腦炎、登革熱和乙型腦炎病毒液相蛋白芯片多重檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)結(jié)果·1067·
【作者單位】： 四川國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心;四川出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【基金】：國(guó)家質(zhì)檢公益性科研項(xiàng)目(航空口岸輸入性傳染病聯(lián)防聯(lián)控技術(shù)體系研究,201210046) 國(guó)家質(zhì)檢總局科研項(xiàng)目(人感染蟲媒傳染病病毒液相蛋白芯片檢測(cè)技術(shù)研究2012IK239) 四川出入境檢驗(yàn)檢疫局科研項(xiàng)目(登革、基孔肯雅、乙腦高通量快速檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用SK201301)
【分類號(hào)】：R512.3;R512.8

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2546095