發(fā)布時(shí)間：2019-09-27 02:28

【摘要】：目的 ①探討TLR3在HBsAg陽性母親新生兒HBV宮內(nèi)傳播中可能的作用。 ②探討HBsAg陽性母親新生兒的TLR3相關(guān)免疫細(xì)胞與HBV宮內(nèi)傳播的關(guān)系。 ③了解發(fā)生HBV宮內(nèi)傳播新生兒的免疫狀況。 方法 ①從2011年7月至2013年1月連續(xù)收集320例太原市第三人民醫(yī)院婦產(chǎn)科HBsAg陽性孕婦及其新生兒作為研究對(duì)象,通過問卷調(diào)查收集母親及新生兒一般人口學(xué)資料及相關(guān)流行病學(xué)資料。 ②HBsAg陽性孕婦分娩的新生兒24小時(shí)內(nèi)股靜脈非抗凝血和抗凝血各3ml。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)測(cè)定母親及新生兒出生24小時(shí)內(nèi)外周血HBV血清標(biāo)志物,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR, FQ-PCR)測(cè)定母親及新生兒外周血HBV DNA含量。 ③部分新生兒股靜脈抗凝血密度梯度離心分離PBMC后,運(yùn)用多色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)TLR3蛋白含量；剩余的抗凝血用于檢測(cè)樹突狀細(xì)胞(DC)、B細(xì)胞、CD4+CD25+Treg和T淋巴細(xì)胞亞群的相對(duì)比例,分析TLR3蛋白含量以及相關(guān)免疫細(xì)胞與HBV宮內(nèi)傳播的關(guān)系。 結(jié)果 ①320例HBsAg陽性母親分娩的新生兒中HBV宮內(nèi)傳播45例,僅HBsAg陽性者39例,HBsAg和HBV DNA均陽性者6例,HBV宮內(nèi)傳播率為14.06%(45/320)。 ②基線資料一般情況分析：HBV宮內(nèi)傳播組中,HBsAg陽性孕婦平均年齡(25.09±3.44)歲,平均孕周為(39.37±1.16)周；新生兒出生平均體重(3307.11±410.13)g；新生兒出生平均身高(50.19士1.81)cm；出生男女性別比例為1：1.14(21：24)；陰道產(chǎn)與剖宮產(chǎn)分娩方式比例為1：4.63(8：37)；以HBV DNA載量500copies/ml為陰性,HBVDNA值107copies/ml為高載量,HBV DNA值≤107copies/ml為低載量,11例陰性,25例高載量,9例低載量。 HBV非宮內(nèi)傳播組中,HBsAg陽性孕婦平均年齡(27.27±3.60)歲,平均孕周為(39.31±1.12)周；新生兒出生平均體重(3395.18±423.50)g；新生兒出生平均身高(50.07±1.39)cm；新生兒男性149人,女性為127人,出生男女性別比例為1：1.17；陰道產(chǎn)新生兒為146人,剖宮產(chǎn)為130人,陰道產(chǎn)與剖宮產(chǎn)分娩方式比例為1：1.12；165例HBV DNA陰性,72例HBV DNA高載量,9例HBV DNA低載量。經(jīng)t檢驗(yàn)分析,HBV宮內(nèi)傳播組和非宮內(nèi)傳播組間孕婦的年齡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-3.895,P0.001),經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析,新生兒HBV宮內(nèi)傳播與HBsAg陽性母親分娩方式差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=24.439,P0.001)；而兩組之間HBsAg陽性孕婦孕期及新生兒性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 ③HBsAg陽性孕婦HBV的感染狀態(tài)與HBV宮內(nèi)傳播關(guān)系分析,HBsAg陽性孕婦根據(jù)HBsAg滴度水平不同,新生兒發(fā)生宮內(nèi)傳播率之間存在顯著性差異(P0.001),當(dāng)母親HBsAg滴度水平低于3000ng/mL時(shí),宮內(nèi)傳播的發(fā)生率為22.0%(37/168),HBsAg滴度水平高于3000ng/mL時(shí),新生兒宮內(nèi)傳播率為5.3%(8/152); HBsAg (+) HBeAg (-)孕婦新生兒宮內(nèi)傳播率為7.0%,HBsAg (+) HBeAg (+)孕婦隨著HBeAg滴度水平升高,新生兒宮內(nèi)傳播率增高到22.3%(P0.001)；HBsAg (+)抗-HBe(±)孕婦新生兒宮內(nèi)傳播率為24%,遠(yuǎn)高于HBsAg (+)抗-HBe(-)孕婦(P0.001);HBV DNA105copies/ml孕婦新生兒宮內(nèi)傳播率為26.3%,遠(yuǎn)高于HBV DNA為103-105copies/ml孕婦和HBsAg (+) HBV DNA (-)孕婦(P0.001); HBsAg (+)孕婦的抗-HBs和抗-HBc滴度與HBV宮內(nèi)傳播無統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P0.05)。 ④HBsAg陽性孕婦新生兒HBV宮內(nèi)傳播多因素分析結(jié)果顯示母親HBeAg水平(OR=1.001,95%CI:1.001～1.002)和孕婦年齡(OR=0.840,95%CI:0.757～0.934)對(duì)HBV宮內(nèi)傳播有影響。 ⑤HBsAg陽性母親分娩新生兒TLR3測(cè)定分析,宮內(nèi)傳播組新生兒TLR3平均熒光強(qiáng)度為(27.66±11.89)%,高于非宮內(nèi)傳播組新生兒(20.064±8.59)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.155,P=0.877)。 ⑥HBsAg陽性母親分娩新生兒DC細(xì)胞測(cè)定分析,非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血mDC細(xì)胞中比例為(1.09±1.16)%,高于宮內(nèi)傳播組新生兒(0.95±0.65)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.544,P=0.587)；非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血pDC細(xì)胞中比例為(0.77±0.94)%,高于宮內(nèi)傳播組新生兒(0.70±0.62)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.335,,P=0.778)； ⑦HBsAg陽性母親分娩新生兒B細(xì)胞表達(dá)測(cè)定分析,非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血B細(xì)胞比例為(6.91±4.49)%,高于宮內(nèi)傳播組新生兒(6.86±4.30)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.057,P=0.954)。 ⑧HBsAg陽性母親分娩新生兒T細(xì)胞亞群表達(dá)測(cè)定分析,宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD3+T淋巴細(xì)胞比例為(60.28±14.50)%、CD4+T淋巴細(xì)胞比例為(42.26±11.02)%、CD8+T淋巴細(xì)胞比例為(15.27±5.93)%,高于非宮內(nèi)傳播組新生兒CD3+T淋巴細(xì)胞比例(58.52±16.23)%、CD4+T淋巴細(xì)胞比例(39.92±14.52)%、CD8+T淋巴細(xì)胞比例(15.27±5.93)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.478, P=0.662; t=0.804, P=0.442; t=0.350, P=0.727);宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+/CD8+為(3.44±1.68),低于非宮內(nèi)傳播組新生兒(3.34±1.92),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.203,P=0.839)。 ⑨HBsAg陽性母親分娩新生兒CD4+CD25+Treg細(xì)胞表達(dá)測(cè)定分析,宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例為(4.62±4.19)%,非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例為(11.79±14.25)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.638,P=0.525)；宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+FOXP3+Treg比例為(4.22±2.28)%,非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+FOXP3+Treg比例為(4.64-5.59)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.339,P=0.735)；宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+CD25+Treg比例為(10.01±5.05)%,非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血CD4+CD25+Treg比例為(11.79±14.25)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.568,P=0.570)； 結(jié)論 ①本次研究發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性孕婦的年齡及HBeAg滴度值水平對(duì)新生兒發(fā)生HBV宮內(nèi)傳播有影響。 ②宮內(nèi)傳播組新生兒TLR3蛋白含量高于非宮內(nèi)傳播組新生兒,可能由于宮內(nèi)傳播組新生兒由于受到HBV的刺激TLR3蛋白含量升高,TLR3蛋白可能在HBV宮內(nèi)傳播發(fā)生機(jī)制中有重要作用。 ③非宮內(nèi)傳播組新生兒股靜脈血B細(xì)胞相對(duì)比例高于宮內(nèi)傳播組新生兒,HBsAg陽性母親分娩新生兒體液免疫可能與HBV宮內(nèi)傳播發(fā)生有關(guān)。 ④非宮內(nèi)傳播組的mDC細(xì)胞、pDC細(xì)胞相對(duì)比例高于宮內(nèi)傳播組,提示HBsAg陽性母親分娩新生兒股靜脈血中DC可能與HBV宮內(nèi)傳播發(fā)生有關(guān)。 ⑤宮內(nèi)傳播組新生兒CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞相對(duì)比例及CD4+/CD8+T細(xì)胞亞群比值高于非宮內(nèi)傳播組新生兒。宮內(nèi)傳播組新生兒可能在HBV感染時(shí),未產(chǎn)生有效的免疫反應(yīng),從而發(fā)生宮內(nèi)傳播。 ⑥非HBV宮內(nèi)傳播組新生兒CD4+CD25+FOXP3+Treg相對(duì)比例高于宮內(nèi)傳播組,可能是由于HBsAg陽性母親新生兒免疫細(xì)胞發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用,引起細(xì)胞相對(duì)比例降低可能與HBV宮內(nèi)傳播發(fā)生有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2542445