發(fā)布時間：2018-07-16 11:17

【摘要】：目的基于萊姆病螺旋體recA基因,建立一種檢測鼠中萊姆病螺旋體的real-time PCR方法。方法通過GenBank分析比較萊姆病螺旋體recA基因,選擇其保守序列設(shè)計MGB探針及引物并進(jìn)行方法學(xué)評估。并應(yīng)用建立的real-time PCR方法和nested PCR方法對收集的123份鼠標(biāo)本進(jìn)行檢測分析。結(jié)果本研究建立的real-time PCR方法僅對萊姆病螺旋體檢測陽性,其最小檢出濃度為101copies/μL。標(biāo)準(zhǔn)曲線各濃度點(diǎn)Ct值批內(nèi)、批間平均變異系數(shù)(CV)分別為1.56%和2.30%。123份鼠標(biāo)本中,real-time PCR檢測59例陽性,nested PCR檢測43例陽性。結(jié)論新建立的real-time PCR方法具有快速、敏感和特異的優(yōu)點(diǎn),可用于鼠標(biāo)本中萊姆病螺旋體的檢測。
[Abstract]:Objective to establish a real-time PCR method for the detection of Lyme disease spirochetes in mice based on the recA gene of Lyme disease. Methods GenBank was used to analyze and compare the recA gene of Lyme disease and its conserved sequence was selected to design the MGB probe and primer and to evaluate the methodology. The established real-time PCR method and nested PCR method were used to detect and analyze 123 mouse books. Results the real-time method developed in this study was only positive for spirochetes of Lyme disease, and the minimal detection concentration was 101copies/ 渭 L. The average coefficient of variation (CV) was 1.56% and 2.30.123 mouse samples were detected by real-time PCR in 59 cases of positive nested-PCR. Conclusion the newly established real-time PCR method has the advantages of rapidity, sensitivity and specificity, and can be used for the detection of Lyme disease spirochetes in mouse.
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所傳染病預(yù)防控制國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：Supported by the 12th Five-Year Major National Science and Technology Projects of China(Nos.2012ZX10004219-007and2013ZX10004001)~~
【分類號】：R514;R440

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本文編號：2126217