發(fā)布時間：2018-07-09 23:27

  本文選題：瓊脂磁珠 + 核酸信標配基　； 參考：《蘭州大學》2017年碩士論文

【摘要】：建立羧基瓊脂磁珠核酸信標配基HBsAg診斷試劑盒,提高乙肝疾病的早期診斷率,為疾病的治療提供幫助。本實驗以羧基瓊脂磁珠為載體,以小鼠IgG的Fc核酸信標配基為檢測分子以山羊抗人的乙肝多抗為捕捉體,以HBsAg為靶蛋白,形成磁珠-多抗-抗原-單抗-配基信標復合物,建立了雙抗夾心免疫-PCR檢測技術。結合全自動核酸提取儀,研制出試劑盒。免疫-PCR檢測的結果顯示,檢測閾值為105~108拷貝數,蛋白濃度為10-3~10-6mg/mL有良好的線性關系,重復率為97%,具有實際檢測意義。由此得出:雙抗夾心免疫-PCR檢測技術結合全自動核酸提取儀可以準確地檢測靶標蛋白,比傳統(tǒng)ELSIA的檢測靈敏度高出103倍,說明基于瓊脂磁珠的核酸信標配基雙抗夾心免疫-PCR檢測技術建立成功,瓊脂糖核酸信標配基HBV診斷試劑盒建立成功。該試劑盒具有特異性強、靈敏度高、重復性好、人為誤差小、機械化程度高等優(yōu)點。因此,在臨床上對乙肝病毒感染的早期診斷和治療具有重要的意義。
[Abstract]:The HBsAg diagnostic kit of carboxyl agar magnetic bead nucleic acid beacon ligand was established to improve the early diagnosis rate of hepatitis B disease and provide help for the treatment of disease. This experiment uses carboxyl agar beads as the carrier and the Fc nucleic acid beacon of mouse IgG as the detection molecule with the anti human hepatitis B multi resistance as the capture body and the HBsAg as the target protein to form the magnetic beads. Multi anti antigen monoclonal antibody complex beacon complex, a double anti sandwich immunization -PCR detection technique was established. Combined with automatic nucleic acid extraction instrument, a kit was developed. The result of immune -PCR detection showed that the detection threshold was 105~108 copy number, and the protein concentration was 10-3~10-6mg/mL with good linear relationship, and the repetition rate was 97%, and it was of practical significance. It is concluded that the dual anti sandwich -PCR detection technique combined with the automatic nucleic acid extraction instrument can accurately detect the target protein, which is 103 times higher than the traditional ELSIA detection sensitivity. It shows that the nucleic acid beacon based dual anti sandwich immunization -PCR detection technology based on agar magnetic beads has been established successfully, and the agarose nucleic acid beacon ligand HBV diagnostic kit is established. This kit has the advantages of strong specificity, high sensitivity, good repeatability, small human error and high degree of mechanization. Therefore, it is of great significance to the early diagnosis and treatment of HBV infection in clinic.
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R512.62

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本文編號：2111105