本文選題：賴型鉤端螺旋體 + Loa��； 參考：《四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2015年02期

【摘要】：目的探討賴型鉤端螺旋體Loa22蛋白對血管內(nèi)皮的毒性作用和功能影響。方法用賴型鉤端螺旋體Loa22成熟肽原核重組質(zhì)粒進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)帶有GST標(biāo)簽的Loa22融合蛋白,經(jīng)親和層析柱進(jìn)行純化并獲取目標(biāo)蛋白,用SDS-PAGE和Western blot對目標(biāo)蛋白進(jìn)行檢測和證實。用獲得的GST-Loa22融合蛋白刺激處理培養(yǎng)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)來說明鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22對血管內(nèi)皮細(xì)胞的毒性作用以及對其通透性的影響。結(jié)果成功表達(dá)Loa22成熟肽原核重組質(zhì)粒,通過鑒定并純化得到Loa22融合蛋白,該蛋白隨著濃度的升高能使培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞CCK-8吸光度值降低,細(xì)胞凋亡率增加,HUVEC單層通過率升高。結(jié)論Loa22融合蛋白對血管內(nèi)皮細(xì)胞有明顯的毒性作用,還使得HUVEC通透性增加。
[Abstract]:Objective to investigate the toxic effect and function of Loa22 protein of Leptospira leisepis on vascular endothelium. Methods Loa22 fusion protein with GST-label was induced by prokaryotic recombinant plasmid of Loa22 mature peptide of Leptospira leicata. The target protein was purified by affinity chromatography. The target protein was detected and confirmed by SDS-PAGE and Western blot. Cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) were stimulated with GST-Loa22 fusion protein to demonstrate the toxicity and permeability of leptospirosis outer membrane protein Loa22. Results the recombinant plasmid of Loa22 mature peptide was successfully expressed. Loa22 fusion protein was obtained by identification and purification. With the increase of concentration, the CCK-8 absorbance of cultured vascular endothelial cells was decreased, and the cell apoptosis rate increased, and the passage rate of HUVEC monolayer increased. Conclusion Loa22 fusion protein has obvious toxic effect on vascular endothelial cells and increases the permeability of HUVEC.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院感染免疫實驗室;
【分類號】：R514.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 鮑朗,戴保民;鉤端螺旋體病肺彌漫性出血實驗?zāi)Ｐ头挝⒀芙Y(jié)構(gòu)和機(jī)能變化的探討[J];四川醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1985年04期

2 張英;鮑朗;朱海龍;黃畢;章樂;張會東;;賴型鉤端螺旋體Loa22重組質(zhì)粒的蛋白表達(dá)和對巨噬細(xì)胞的毒性作用[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

3 朱海龍;鮑朗;張會東;;構(gòu)建Loa22基因去信號肽片段原核重組表達(dá)載體[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年37期

4 朱海龍;鮑朗;張會東;王曉櫻;李巖;;賴型鉤端螺旋體OmpA膜蛋白Loa22基因的克隆分析及蛋白表達(dá)[J];中國人獸共患病學(xué)報;2006年04期

【共引文獻(xiàn)】

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1 張連英;丁朋曉;楊正久;譚立志;;鉤端螺旋體外膜蛋白的研究概況[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2013年09期

2 黃丹丹;鮑朗;楊曉玲;鄧儀昊;廖丹;;結(jié)核分枝桿菌MycP1蛋白的原核表達(dá)及其對巨噬細(xì)胞的毒性作用[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年04期

3 彭海榮,戴保民;鉤端螺旋體與體內(nèi)細(xì)胞粘附的冷凍復(fù)型電鏡觀察[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1986年04期

4 肖國衡,黃寧;地塞米松防治豚鼠鉤端螺旋體病肺彌漫性出血機(jī)理的實驗研究[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1999年04期

5 張英;鮑朗;朱海龍;黃畢;章樂;張會東;;賴型鉤端螺旋體Loa22重組質(zhì)粒的蛋白表達(dá)和對巨噬細(xì)胞的毒性作用[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

6 李道坤;鮑朗;張英;孫湛;;賴型鉤端螺旋體OmpA外膜基因Loa22重組卡介苗的構(gòu)建及其免疫蛋白表達(dá)[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年02期

7 吳秉婷;鮑朗;孫湛;李道坤;張英;;賴型鉤端螺旋體OmpA外膜蛋白Loa22通過Ca~(2+)信號通路介導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年03期

8 張連英;丁朋曉;何漢江;譚立志;;研究鉤端螺旋體外膜脂蛋白Loa22的免疫原性[J];南華大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

9 張連英;何漢江;尹衛(wèi)國;汪文玉;占利生;譚立志;;問號狀鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22的克隆、表達(dá)及對豚鼠的免疫保護(hù)作用研究[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年06期

10 江松峰;21例肺出血型鉤體病的X線表現(xiàn)[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;1998年04期

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1 曹平;鴨源SE和S.typhi的RAPD分析及SE外膜蛋白基因克隆和原核表達(dá)[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

2 張連英;鉤端螺旋體外膜脂蛋白Loa22的克隆、表達(dá)及免疫保護(hù)性研究[D];南華大學(xué);2008年

3 李小余;鉤端螺旋體groEL基因原核表達(dá)及其產(chǎn)物免疫保護(hù)作用[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2013年

【二級參考文獻(xiàn)】

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1 王遠(yuǎn)萍,唐小佳,王伯釗,代保民,伍淑蓉,曹鐘j;鉤端螺旋體病出血機(jī)理的研究——豚鼠肝出血現(xiàn)象的電子顯微鏡觀察[J];四川醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1983年04期

2 沈雁,劉錫麟,唐毅,鐘燦燦,梁佩紅,李斯明;檢測人成纖維細(xì)胞增殖的XTT比色法[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2002年04期

3 朱海龍;鮑朗;張會東;;構(gòu)建Loa22基因去信號肽片段原核重組表達(dá)載體[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年37期

4 鮑朗,胡昌華,李學(xué)敏,晏菊芳,張萬江,張會東;利用抑制消減雜交技術(shù)研究鉤端螺旋體致病相關(guān)基因[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2001年05期

5 朱海龍;鮑朗;張會東;王曉櫻;李巖;;賴型鉤端螺旋體OmpA膜蛋白Loa22基因的克隆分析及蛋白表達(dá)[J];中國人獸共患病學(xué)報;2006年04期

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2 劉洪斌,戴保民,章濤,李勝富,方之茂;問號賴型鉤端螺旋體23kDa蛋白的免疫原性研究[J];中國人獸共患病雜志;2000年06期

3 劉洪斌,戴保民,李勝富,方之茂;問號賴型鉤端螺旋體重組質(zhì)粒pDL121的初步研究[J];中國病理生理雜志;1999年08期

4 戴保民;曹鐘梁;穆國堯;鮑朗;肖建國;趙蜀岷;謝磊;卿格非;程書秋;雷秉鈞;;四川省鉤端螺旋體病肺彌漫性出血搶救及其主要病原體賴型鉤端螺旋體的獨特性[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;1992年06期

5 左桂芳,趙德維,楊德均,魏洪澤,黃開龍;江油地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)黃疸出血群賴型鉤端螺旋體[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);1997年04期

6 劉洪斌,戴保民,章濤,李勝富,方之茂;問號賴型鉤端螺旋體重組質(zhì)粒pDL121及其表達(dá)產(chǎn)物的初步研究[J];中國病理生理雜志;2000年12期

本文編號：2089803