本文選題：結(jié)核分枝桿菌 + L型菌��； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)》2013年博士論文

【摘要】：研究背景 進(jìn)入21世紀(jì)后,我國(guó)肺結(jié)核防治局面依然十分嚴(yán)峻。結(jié)核病疫情呈現(xiàn)感染率高、患病率高、發(fā)病率高、耐藥率高、死亡率高,結(jié)核病控制進(jìn)程慢等“五高一慢”的特點(diǎn)。結(jié)核病疫情農(nóng)村高于城市、青壯年患病率和死亡比例高,嚴(yán)重危害著人民群眾的生命安全。結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium Tuberculosis, MTB) L型(L form, L)是結(jié)核分枝桿菌抵抗外界環(huán)境和賴以生存的重要形式,可在體內(nèi)長(zhǎng)期存活、生長(zhǎng)、繁殖,導(dǎo)致結(jié)核病緩慢地進(jìn)展、惡化、復(fù)發(fā)和耐藥。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外的多項(xiàng)研究結(jié)果顯示,菌陰肺結(jié)核約占活動(dòng)性肺結(jié)核病的70%,而在菌陰肺結(jié)核標(biāo)本中,MTB-L陽(yáng)性率約為30%；在耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)患者中MTB-L陽(yáng)性率達(dá)50%。因此,探索MTB-L檢測(cè)方法對(duì)確定結(jié)核感染的性質(zhì)和進(jìn)展,選擇治療策略及其效果評(píng)價(jià)和判定預(yù)后、以及修正預(yù)防措施具有非常重要的意義。 研究目的 針對(duì)當(dāng)前結(jié)核病防控的嚴(yán)峻形勢(shì),以及MTB-L生物學(xué)特性和致病性特點(diǎn),本研究擬系統(tǒng)分析深圳市羅湖轄區(qū)結(jié)核病感染及耐藥狀況,建立快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異度好的MTB-L的涂片染色和培養(yǎng)藥敏的檢測(cè)方法,并探討其對(duì)結(jié)核病診療的臨床價(jià)值。 研究?jī)?nèi)容 本研究擬開展以下工作：①建立快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異度好的MTB-L的涂片染色和培養(yǎng)藥敏的檢測(cè)方法,并進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。②采用改進(jìn)的MTB-L涂片染色方法對(duì)深圳市羅湖區(qū)慢性病防治院2010年1月至2011年12月期間結(jié)核病門診收治的960例結(jié)核病確診患者及其治療期間的痰標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行MTB和MTB-L涂片染色檢查。③采用改進(jìn)的MTB-L藥敏培養(yǎng)方法對(duì)上述痰標(biāo)本進(jìn)行MTB-L培養(yǎng)及藥敏分析。④采用羅氏藥敏培養(yǎng)基對(duì)上述痰標(biāo)本進(jìn)行MTB培養(yǎng)及藥敏分析。⑤分析深圳市羅湖轄區(qū)結(jié)核病流行現(xiàn)狀,MTB和MTB-L的耐藥情況,以及其對(duì)結(jié)核病臨床診斷和治療預(yù)后的影響。 研究方法 1MTB-L涂片染色方法的改進(jìn)及其方法學(xué)評(píng)價(jià) 1.1Ziehl-Neelsen(Z-N)抗酸染色法 ①涂片：收集病例,按《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》要求,挑取痰標(biāo)本中干酪樣、膿樣或可疑部分約0.05～0.1ml,于玻片正面右側(cè)2/3處,均勻涂抹成10mm×20mm的卵圓形痰膜,痰膜朝上靜置自然干燥,每位病人涂片2張。 ②染色：玻片經(jīng)火焰固定后,滴加石碳酸復(fù)紅染液蓋滿痰膜,在火焰高處徐徐加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液,以免干涸,加熱3～5min,待標(biāo)本冷卻后流水自玻片一端輕緩沖洗,洗去染色液,瀝去玻片上剩余的水。自痰膜上端外緣滴加3%鹽酸酒精,流過(guò)痰膜,需脫至痰膜無(wú)可視紅色為止,脫色應(yīng)單片進(jìn)行。流水自玻片一端輕緩沖洗,沖去脫色液,瀝去玻片上剩余的水。滴加亞甲藍(lán)復(fù)染液,染色30s。流水自玻片一端輕緩沖洗,沖去復(fù)染液,瀝去標(biāo)本上剩余的水。 ③鏡檢：待玻片干燥后鏡檢,記錄結(jié)果。 1.2改良IK抗酸染色法 ①涂片：收集病例,按《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》要求,挑取痰標(biāo)本中干酪樣、膿樣或可疑部分約0.05～0.1ml,于玻片正面右側(cè)2/3處,均勻涂抹成10mm×20mm的卵圓形痰膜,痰膜朝上靜置自然干燥,每位病人涂片2張。 ②染色：涂片于空氣中自然干燥后,丙酮固定；玻片傾斜,蒸餾水自一端流下清洗。加苯酚品紅液后置濕盒內(nèi),于室溫24h后細(xì)流水洗。自痰膜上端外緣滴加0.5%鹽酸乙醇脫色劑,脫至無(wú)紅色為止。加復(fù)染劑亞甲藍(lán),復(fù)染0.5～2min,水洗后干燥。 ③鏡檢：待玻片干燥后鏡檢,鏡檢方法、結(jié)果判斷和分級(jí)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)同Ziehl-Neelsen抗酸染色法。 1.3本研究改進(jìn)的MTB-L抗酸染色法(以下簡(jiǎn)稱‘'MTB-L抗酸染色法”) ①涂片：收集病例,按《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》要求,挑取痰標(biāo)本中干酪樣、膿樣或可疑部分約0.05～0.1ml,于玻片正面右側(cè)2/3處,均勻涂抹成10mm×20mm的卵圓形痰膜,痰膜朝上靜置自然干燥,每位病人涂片2張。 ②染色：玻片經(jīng)火焰固定后,滴加石碳酸復(fù)紅染液蓋滿痰膜,然后加滴2～3滴雙氧水,混勻,保持染色1～2min。流水自玻片一端輕緩沖洗,洗去染色液,瀝去玻片上剩余的水。自痰膜上端外緣滴加3%鹽酸酒精,流過(guò)痰膜,需脫至痰膜無(wú)可視紅色為止,脫色應(yīng)單片進(jìn)行。流水自玻片一端輕緩沖洗,沖去脫色液,瀝去玻片上剩余的水。滴加亞甲藍(lán)復(fù)染液,染色30s。流水自玻片一端輕緩沖洗,沖去復(fù)染液,瀝去標(biāo)本上剩余的水。 ③鏡檢：待玻片干燥后鏡檢,鏡檢方法、結(jié)果判斷和分級(jí)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)同Ziehl-Neelsen抗酸染色法。本改良方法染色合格的玻片呈亮藍(lán)色,且放置于報(bào)紙上可透過(guò)痰膜分辨報(bào)紙上的文字。 1.4熒光定量PCR法 ①DNA提�。菏占瘶颖�,按試劑說(shuō)明書要求處理樣本,提取DNA； ②PCR擴(kuò)增：按試劑說(shuō)明書要求進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)； ③結(jié)果分析：分析擴(kuò)增曲線,判定結(jié)果。 1.5方法學(xué)評(píng)價(jià) 取經(jīng)我院肺科門診確診的活動(dòng)性肺結(jié)核患者100例和健康體檢者20例的痰標(biāo)本,分別采用熒光定量PCR法、MTB-L抗酸染色法、Z-N抗酸染色法,以及改良IK抗酸染色法進(jìn)行檢測(cè),計(jì)算并評(píng)估熒光定量PCR法、MTB-L抗酸染色法、Z-N抗酸染色法和改良IK抗酸染色法的特異度、靈敏度、試驗(yàn)總有效率等指標(biāo)；分別比較熒光定量PCR法MTB-L陽(yáng)性檢出率與后三種方法MTB-L陽(yáng)性檢出率的差異。 2改進(jìn)的MTB-L涂片染色法的臨床應(yīng)用 采用MTB-L抗酸染色法對(duì)深圳市羅湖區(qū)慢性病防治院2010年1月至2011年12月期間結(jié)核病門診收治的960例結(jié)核病確診患者及其治療期間的痰標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行MTB和MTB-L涂片染色檢查,分析深圳市羅湖轄區(qū)結(jié)核病流行現(xiàn)狀,MTB和MTB-L的感染情況,以及其對(duì)結(jié)核病臨床診斷和治療預(yù)后(陰轉(zhuǎn)率)的影響。 3MTB-L培養(yǎng)基的改進(jìn)及其方法學(xué)評(píng)價(jià) 3.1羅氏培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)法 收集肺結(jié)核確診病人痰樣本,采用堿處理法進(jìn)行前處理,痰液中加4%NaOH約2～4倍量,振蕩器振蕩1min后,室溫放置15-20min,其間振蕩2～3次,使痰液化。取前處理消化后痰液0.1ml,無(wú)菌操作接種于羅氏培養(yǎng)基斜面上,每份標(biāo)本同時(shí)接種兩支培養(yǎng)基,放37℃孵育。接種后3～7d觀察,此后每周觀察一次菌落生長(zhǎng)情況,有菌落生長(zhǎng)需經(jīng)抗酸染色確認(rèn)是否為結(jié)核分支扦菌。若至第8周仍無(wú)菌落生長(zhǎng)可報(bào)告陰性結(jié)果。 3.2改良胰胨大豆蛋白胨L型菌培養(yǎng)基(tryptone soybean tryptone ager, TSA-L)培養(yǎng)法[6] 收集肺結(jié)核確診病人痰樣本,采用堿處理法進(jìn)行前處理,痰液中加4%NaOH約2～4倍量,振蕩器振蕩1min后,室溫放置15-20min,其間振蕩2～3次,使痰液化,再加無(wú)菌生理鹽水至約40ml,離心10min,去上清,再用無(wú)菌生理鹽水洗一次,余約0.5ml,取此前處理液0.1ml,無(wú)菌操作接種于改良TSA-L上,均勻涂布后置5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)6周。每周肉眼觀察1次,若有可疑菌落,顯微鏡下觀察菌落形成情況。平板上一般先出現(xiàn)顆粒狀(G型)幼小菌落,由十幾個(gè)到數(shù)十個(gè)球狀體組成。隨時(shí)間延長(zhǎng),典型“油煎蛋”狀(L型)菌落逐漸增多。培養(yǎng)時(shí)有時(shí)亦可見絲狀菌落(F型菌落)。出現(xiàn)菌落時(shí)即可涂片抗酸染色鏡檢。無(wú)菌落生長(zhǎng)者盲刮檢查可提高陽(yáng)性率。 3.3本研究改進(jìn)的MTB-L培養(yǎng)基培養(yǎng)方法(以下簡(jiǎn)稱"MTB-L培養(yǎng)基培養(yǎng)法”) 對(duì)TSA-L培養(yǎng)基配方進(jìn)行改進(jìn),加入有利于分枝桿菌生長(zhǎng)的膽固醇和卵磷脂等特殊營(yíng)養(yǎng)成分。收集肺結(jié)核確診病人痰樣本,采用堿處理法進(jìn)行前處理,痰液中加4%NaOH約2～4倍量,振蕩器振蕩1min后,室溫放置15～20min,其間振蕩2～3次,使痰液化,再加無(wú)菌生理鹽水至約40ml,離心10min,去上清,再用無(wú)菌生理鹽水洗一次,余約0.5ml,取此前處理消化后痰液0.1ml,無(wú)菌操作接種于改進(jìn)的MTB-L培養(yǎng)基上,均勻涂布后置5%CO2培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)6周。接種后第3和7日觀察培養(yǎng)情況,此后每周肉眼觀察1次,若有可疑菌落,顯微鏡下觀察菌落形成情況。平板上一般先出現(xiàn)顆粒狀(G型)幼小菌落,由十幾個(gè)到數(shù)十個(gè)球狀體組成。隨時(shí)間延長(zhǎng),典型“油煎蛋”狀(L型)菌落逐漸增多。培養(yǎng)時(shí)有時(shí)亦可見絲狀菌落(F型菌落)。出現(xiàn)菌落時(shí)即可涂片抗酸染色鏡檢。無(wú)菌落生長(zhǎng)者盲刮檢查可提高陽(yáng)性率。 3.4方法學(xué)評(píng)價(jià) 取50例經(jīng)熒光定量PCR法確診的MTB-L標(biāo)本,分別采用羅氏培養(yǎng)基、改良TSA-L培養(yǎng)基和MTB-L培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),比較其培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率及陽(yáng)性菌落形成所需時(shí)間。 4改進(jìn)的MTB-L培養(yǎng)基的臨床應(yīng)用 采用MTB-L培養(yǎng)法對(duì)深圳市羅湖區(qū)慢性病防治院2010年1月至2011年12月期間收治的960例結(jié)核病確診患者及其治療期間MTB-L培養(yǎng)陽(yáng)性樣本進(jìn)行4個(gè)抗結(jié)核病一線藥的藥物敏感試驗(yàn),分析MTB-L對(duì)4個(gè)一線藥品的耐藥情況。 5MTB藥物敏感試驗(yàn) 采用羅氏藥敏培養(yǎng)基對(duì)深圳市羅湖區(qū)慢性病防治院2010年1月至2011年12月期間收治的960例結(jié)核病確診患者及其治療期間MTB培養(yǎng)陽(yáng)性樣本進(jìn)行4個(gè)抗結(jié)核病一線藥的藥物敏感試驗(yàn),分析MTB對(duì)4個(gè)一線藥品的耐藥情況。 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 1MTB-L抗酸染色法、Z-N抗酸染色法及改良IK抗酸染色法與熒光定量PCR法MTB-L陽(yáng)性檢出率比較,分別采用配對(duì)設(shè)計(jì)的兩樣本率的卡方檢驗(yàn)(McNemar配對(duì)法),校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)a'=0.05/3=0.017。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件為SPSS13.0, P校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)a’為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2MTB-L抗酸染色法分別與Z-N抗酸染色法、改良IK抗酸染色法的MTB、 MTB-L陽(yáng)性檢出率結(jié)果比較采用配對(duì)設(shè)計(jì)的非參數(shù)檢驗(yàn)(McNemar配對(duì)法),校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)a'=0.05/2=0.025。初治及復(fù)治結(jié)核病患者治療期間MTB、MTB-L陰轉(zhuǎn)率比較,均采用成組設(shè)計(jì)的兩樣本率的卡方檢驗(yàn),校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)a'=0.05/3=0.017。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件為SPSS13.0,P校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)a’為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3MTB-L培養(yǎng)基和TAS-L培養(yǎng)基MTB-L培養(yǎng)陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果比較采用配對(duì)設(shè)計(jì)的非參數(shù)檢驗(yàn)(McNemar配對(duì)法)；兩種培養(yǎng)法培養(yǎng)MTB-L陽(yáng)性所需天數(shù)采用x士s表示,兩者比較采用成組設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件為SPSS13.0, P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4MTB-L培養(yǎng)基培養(yǎng)法和TAS-L培養(yǎng)基培養(yǎng)法的涂陽(yáng)培陰率比較采用配對(duì)設(shè)計(jì)的非參數(shù)檢驗(yàn)(McNemar配對(duì)法),初治及復(fù)治結(jié)核病患者治療期間MTB、MTB-L耐藥率比較,均采用成組設(shè)計(jì)的兩樣本率的卡方檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件為SPSS13.0, P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 研究結(jié)果 1熒光定量PCR法、MTB-L抗酸染色法、改良IK抗酸染色法和Z-N抗酸染色法特異度均為100%,熒光定量PCR法、MTB-L抗酸染色法和改良IK抗酸染色法的靈敏度依次為30%、26%和28%,均高于Z-N抗酸染色法(14%)。熒光定量PCR法MTB-L抗酸染色法和改良IK抗酸染色法的總有效率依次為41.7%、38.3%和40.0%,均高于Z-N抗酸染色法(28.3%)。 2100例痰標(biāo)本經(jīng)熒光定量PCR法、MTB-L抗酸染色法、Z-N抗酸染色法和改良IK法分析,MTB-L陽(yáng)性檢出率依次為30%、26%、14%和28%。MTB-L抗酸染色法MTB-L陽(yáng)性檢出率與熒光定量PCR法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Exact P=0.3440.017), Z-N抗酸染色法MTB-L陽(yáng)性檢出率顯著低于熒光定量PCR法(Exact P=0.0000.017),改良IK法MTB-L陽(yáng)性檢出率與熒光定量PCR法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Exact P=0.6880.017) 32010年度468例結(jié)核患者經(jīng)檢測(cè),MTB-L抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率分別為59.0%、26.9%,改良IK抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率分別為57.5%、27.6%,Z-N抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率分別為38.5%、16.0。MTB-L抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率與改良IK抗酸染色法比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0920.025; P=0.5490.025); MTB-L抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率均顯著高于Z-N抗酸染色法,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=85.142, P=0.0000.025;χ2=40.984, P=0.0000.025)。 42011年度492例結(jié)核患者經(jīng)檢測(cè),MTB-L抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率分別為60.8%、27.8%,Z-N抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率分別為39.2%、15.4%。MTB-L抗酸染色法MTB、MTB-L陽(yáng)性檢出率均顯著高于Z-N抗酸染色法,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=96.711, P=0.0000.025;χ2=50.704, P=0.0000.025)。 52010年1月至2011年12月間初治結(jié)核病患者痰液經(jīng)涂片抗酸染色檢查,MTB陽(yáng)性患者411例,MTB+MTB-L陽(yáng)性患者130例,MTB-L陽(yáng)性患者129例。經(jīng)規(guī)范化治療5個(gè)月后,除1例MTB-L陽(yáng)性患者外,其余全部轉(zhuǎn)陰。按《中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃實(shí)施工作指南》(2008年版)規(guī)范要求計(jì)算結(jié)核病涂陽(yáng)患者2、3月末痰菌陰轉(zhuǎn)率(痰菌陰轉(zhuǎn)率=某月末累計(jì)痰菌陰轉(zhuǎn)患者數(shù)/涂陽(yáng)患者登記數(shù)×100%)。其中MTB陽(yáng)性患者2、3月末陰轉(zhuǎn)率均分別高于MTB+MTB-L陽(yáng)性患者(χ2=115.330,P=0.0000.017；校正χ2=32.889,P=0.0000.017)及MTB-L陽(yáng)性患者(χ2=120.031,P=0.0000.017；校正χ2=33.178P=0.0000.017)；而MTB+MTB-L陽(yáng)性患者2、3月末陰轉(zhuǎn)率與MTB-L陽(yáng)性患者無(wú)顯著性差異(χ2=0.037,P=0.8480.017；χ2=0.000,P=0.9830.017)。 62010年1月至2011年12月間復(fù)治結(jié)核病患者痰液經(jīng)涂片抗酸染色檢查,MTB陽(yáng)性患者12例,MTB+MTB-L陽(yáng)性患者19例,MTB-L陽(yáng)性患者13例。經(jīng)規(guī)范化治療4個(gè)月后,除2例MTB+MTB-L陽(yáng)性患者和1例MTB-L陽(yáng)性患者外,其余全部轉(zhuǎn)陰。按《中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃實(shí)施工作指南》(2008年版)規(guī)范要求計(jì)算結(jié)核病涂陽(yáng)患者2、3月末痰菌陰轉(zhuǎn)率(痰菌陰轉(zhuǎn)率=某月末累計(jì)痰菌陰轉(zhuǎn)患者數(shù)/涂陽(yáng)患者登記數(shù)×100%)。其中MTB陽(yáng)性患者2月末陰轉(zhuǎn)率分別略高于MTB+MTB-L陽(yáng)性患者及MTB-L陽(yáng)性患者,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Exact P=0.0320.017;Exact P=0.0410.017);MTB陽(yáng)性患者3月末陰轉(zhuǎn)率分別略高于MTB+MTB-L陽(yáng)性患者及MTB-L陽(yáng)性患者,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Exact P=0.3630.017;Exact P=0.5930.017);MTB+MTB-L陽(yáng)性患者2、3月末陰轉(zhuǎn)率與MTB-L陽(yáng)性患者均無(wú)顯著差異(均exact P=1.0000.017)。 750例MTB-L陽(yáng)性標(biāo)本在含不同卵磷脂和膽固醇濃度的MTB-L培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況不一致,以卵磷脂加入量≥0.6g和膽固醇加入量≥0.6g時(shí)生長(zhǎng)狀況最佳,因此,卵磷脂和膽固醇的最小加入量均為0.6g。 8MTB-L培養(yǎng)法MTB-L陽(yáng)性檢出率為30.6%,改良TAS-L培養(yǎng)法MTB-L陽(yáng)性檢出率為23.9%,MTB-L培養(yǎng)法MTB-L陽(yáng)性檢出率顯著高于改良TAS-L培養(yǎng)法(χ2=23.077,P=0.0000.05),同時(shí)其培養(yǎng)MTB-L陽(yáng)性所需時(shí)間顯著縮短(t=14.851,P=0.0000.05)。 9分別采用改良TAS-L培養(yǎng)法和MTB-L培養(yǎng)法對(duì)281例涂片染色MTB-L陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng),兩種方法(?)培陰率[涂陽(yáng)培陰率=(涂陽(yáng)培陰例數(shù)/涂陽(yáng)總例數(shù))×100%]分別為9.3%和1.8(?)MTB-L培養(yǎng)法涂陽(yáng)培陰率顯著低于改良TAS-L培養(yǎng)法(P=0.0000.05) 10深圳市羅湖轄區(qū)MTB初治耐藥率為22.4%,其中單耐藥率為：INH4.7%、 RFP3.3%、EB1.7%、SM5.8%,多耐率為3.4%,耐多藥率為3.7%；復(fù)治耐藥率為33.3%,其中單耐藥率為：INH5.6%、RFP5.6%、SM5.6%,多耐率為5.6%,耐多藥率為11.1%。初治結(jié)核病患者治療2月末結(jié)核分枝桿菌耐藥率為61.5%,其中單耐藥率為：：INH23.1%、RFP5.1%、EB12.8%、SM10.2%,多耐率為5.1%,耐多藥率為5.1%；復(fù)治結(jié)核病患者治療2月末結(jié)核分枝桿菌耐藥率為40%,其中單耐藥率為：INH20%,多耐率為20%,耐多藥率為13.6%。 11深圳市羅湖轄區(qū)MTB-L初治耐藥率為46.7%,其中單耐藥率為：INH11.9%、 RFP1.2%、EB11.0%、SM2.0%,多耐率為16.3%,耐多藥率為4.5%；復(fù)治耐藥率為46.7%,其中單耐藥率為:INH10.0%、EB10.0%、SM3.3%,多耐率為16.7%,耐多藥率為6.7%。初治結(jié)核病患者治療2月末結(jié)核分枝桿菌耐藥率為46.6%,其中單耐藥率為INH11.6%、RFP1.0%、SM1.9%,多耐率為17.5%,耐多藥率為3.9%；復(fù)治結(jié)核病患者治療2月末結(jié)核分枝桿菌耐藥率為50%,其中單耐藥率為：INH16.7%, EB16.7%,多耐率為8.3%,耐多藥率為8.3%。 12深圳市羅湖轄區(qū)MTB-L初治始耐藥率(46.7%)顯著高于MTB初治始耐藥率(22.5%)(χ2=47.148,P=G.0000.05), MTB-L復(fù)治耐藥率(46.7%)略高于MTB復(fù)治耐藥率(33.3%),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.823,P=0.3640.05)。結(jié)果提示MTB-L的存在與耐藥嚴(yán)重程度密切相關(guān)。 研究結(jié)論 1本研究改進(jìn)的MTB-L抗酸染色方法具有良好的靈敏度、特異度,操作簡(jiǎn)便易行,適合于痰MTB-L常規(guī)檢測(cè),能夠在基層結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。 2本研究改進(jìn)的MTB-L培養(yǎng)基配方簡(jiǎn)單、成本低廉,培養(yǎng)MTB-L所需時(shí)間短且細(xì)菌生長(zhǎng)良好,適合MTB-L培養(yǎng)鑒定及其藥物敏感試驗(yàn),能夠在基層結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。 3本轄區(qū)初治和復(fù)治結(jié)核病患者中痰MTB陽(yáng)性者轉(zhuǎn)陰率高于MTB+MTB-L陽(yáng)性者及MTB-L陽(yáng)性者,MTB+MTB-L陽(yáng)性者和MTB-L陽(yáng)性者轉(zhuǎn)陰率無(wú)明顯差異。結(jié)果表明MTB-L是結(jié)核病患者陰轉(zhuǎn)率低的重要原因,因此加強(qiáng)結(jié)核病患者痰MTB-L的檢測(cè)是當(dāng)前結(jié)核病防控的重要策略。 4深圳市羅湖轄區(qū)MTB-L初治耐藥率和復(fù)治耐藥率均為46.7%,結(jié)果表明本轄區(qū)MTB-L耐藥形勢(shì)依然嚴(yán)峻,因此有必要加強(qiáng)結(jié)核病患者M(jìn)TB-L的耐藥性監(jiān)測(cè)。 5深圳市羅湖轄區(qū)MTB初治耐藥率為22.5%,復(fù)治耐藥率為33.3%,較2010年第5次全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查初始耐藥率42.7%,復(fù)治耐藥率38.5%的水平低,結(jié)果表明深圳市羅湖轄區(qū)結(jié)核病防控維持在一個(gè)良好的水平。 6深圳市羅湖轄區(qū)MTB-L初治耐藥率和復(fù)治耐藥率均分別高于MTB初治耐藥率和復(fù)治耐藥率,結(jié)果表明MTB-L的存在與耐藥嚴(yán)重程度密切相關(guān),因此有必要強(qiáng)結(jié)核病患者M(jìn)TB-L感染及其耐藥性監(jiān)測(cè)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R52;R446

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2018483