本文選題：人類免疫缺陷病毒 + 獲得性免疫缺陷綜合癥�。� 參考：《武漢大學(xué)》2013年博士論文

【摘要】：在與人類免疫缺陷病毒斗爭的這三十年中,人類為預(yù)防和治療艾滋病所作的努力主要有三個(gè)方面,抗HIV藥物和疫苗的研發(fā)以及AIDS的基因治療。盡管人們對(duì)HIV-1疫苗的研發(fā)投入了很多,但是HIV-1序列的多樣性和相對(duì)不易接近到Env的保守結(jié)構(gòu)域大大降低了誘發(fā)保護(hù)性抗體的可能,再加上我們對(duì)控制HIV-1復(fù)制的免疫反應(yīng)了解甚少,導(dǎo)致至今還沒有誕生一個(gè)有效的疫苗。雖然已經(jīng)有幾十例報(bào)道的處于臨床或臨床前試驗(yàn)的基因治療案例,但是基因療法的療效、安全性特別是經(jīng)濟(jì)性仍需提高。迄今為止,32種被FDA批準(zhǔn)的用于治療HIV-1感染的藥物中,大多數(shù)是逆轉(zhuǎn)錄酶和蛋白酶抑制劑,盡管它們在改善和延長HIV-1感染者的生命方面取得了不錯(cuò)的效果,但是這些藥物的毒性以及服藥后耐藥毒株的產(chǎn)生極大的限制了它們的使用。因此,發(fā)展新型的口服利用率高且價(jià)格低廉的小分子抗病毒藥物對(duì)于艾滋病患者特別是發(fā)展中國家的患者是迫切需要的。 棉酚是一種從棉籽中提取出來的含醛基的多酚類物質(zhì),具有抗生育、抗病毒、抗癌、誘導(dǎo)凋亡和調(diào)節(jié)免疫等多種生物活性。為了提高它的抗HIV-1活性、降低其細(xì)胞毒性和消除男性抗生育活性,我們對(duì)棉酚進(jìn)行了一系列的修飾和改造,以期將它發(fā)展成新的抗HIV-1藥物。 在對(duì)棉酚衍生物的篩選中我們發(fā)現(xiàn),氨基酸修飾后的棉酚特別是中性脂肪族氨基酸的棉酚衍生物抗HIV-1的活性最高,我們認(rèn)為這與該族氨基酸側(cè)鏈R基的疏水性有關(guān),因?yàn)楹罄m(xù)的機(jī)制研究指出棉酚氨基酸衍生物的作用靶點(diǎn)也是疏水性的。為了進(jìn)一步的提高其抗病毒活性并降低細(xì)胞毒性,我們對(duì)棉酚進(jìn)行了拆分,并屏蔽了賦予它毒性的醛基,結(jié)果發(fā)現(xiàn)左旋棉酚的氨基酸衍生物比修飾前的治療指數(shù)提高了100多倍。接著,我們還對(duì)棉酚和這幾種衍生物的殺精活性進(jìn)行了對(duì)比。 以前人們普遍認(rèn)為棉酚和它們的衍生物是通過作用在逆轉(zhuǎn)錄酶上來抑制HIV-1復(fù)制的,但是我們通過時(shí)間遞加實(shí)驗(yàn)、HIV-1介導(dǎo)的細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)以及VSV-G假病毒實(shí)驗(yàn)分析表明丙氨酸的左旋棉酚衍生物((-)G-Ala)是一種HIV-1的進(jìn)入抑制劑。深入的機(jī)制研究表明(-)G-Ala既不阻斷gp120蛋白與CD4受體的結(jié)合,又不影響病毒與輔助受體的結(jié)合。夾心ELISA實(shí)驗(yàn)、N-PAGE實(shí)驗(yàn)和CD實(shí)驗(yàn)表明(-)G-Ala能有效地阻止gp41核心六聚體的形成。更進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明(-)G-Ala不但能結(jié)合到HIV-5-Helix蛋白上,還能阻斷PIE7結(jié)合到gp41內(nèi)部的三螺旋束表面的疏水口袋中。以上這些結(jié)果說明(-)G-Ala可能結(jié)合到gp41內(nèi)部的三螺旋束表面的疏水口袋中,通過阻斷gp41融合活性的核心六聚體形成來抑制HIV-1介導(dǎo)的病毒與細(xì)胞間的融合進(jìn)而阻止病毒的侵入。
[Abstract]:In the three decades of fighting HIV, human efforts to prevent and treat AIDS are mainly in three areas: the development of anti-HIV drugs and vaccines, and the genetic therapy of AIDS. Although there has been a lot of investment in the development of HIV-1 vaccine, the diversity of HIV-1 sequences and the relative inaccessibility of the conserved domain of Env have greatly reduced the possibility of inducing protective antibodies. Coupled with our little knowledge of the immune response to control HIV-1 replication, no effective vaccine has yet been produced. Although there have been dozens of reported cases of gene therapy in clinical or preclinical trials, the efficacy, safety and especially economic efficiency of gene therapy need to be improved. To date, most of the 32 drugs approved by the FDA for the treatment of HIV-1 infections are reverse transcriptase and protease inhibitors, although they have achieved good results in improving and prolonging the lives of HIV-1 infected people. But the toxicity of these drugs and the production of drug-resistant strains greatly limit their use. Therefore, the development of new small molecular antiviral drugs with high oral utilization and low cost is urgently needed for AIDS patients, especially in developing countries. Gossypol is an aldehyde-containing polyphenols extracted from cottonseed. It has many biological activities, such as anti-fertility, anti-virus, anti-cancer, inducing apoptosis and regulating immunity. In order to improve its anti-HIV-1 activity, reduce its cytotoxicity and eliminate male antifertility activity, we have modified and modified gossypol to develop into a new anti-HIV-1 drug. The amino acid modified gossypol, especially the gossypol derivative of neutral aliphatic amino acid, had the highest activity against HIV-1, which we think is related to the hydrophobicity of the R group of the amino acid side chain. It is indicated that the targets of gossypol amino acid derivatives are hydrophobic. In order to further improve the antiviral activity and reduce the cytotoxicity of gossypol, we separated gossypol and shielded its toxic aldehydes. The results showed that the amino acid derivatives of L-gossypol were more than 100 times higher than those before modification. Then we compared the spermicidal activity of gossypol and these derivatives, which were previously widely believed to inhibit HIV-1 replication by acting on reverse transcriptase. However, our analysis of HIV-1 mediated cell fusion and VSV-G pseudovirus assay showed that the L-gossypol derivative of alanine was an entry inhibitor of HIV-1. Further studies have shown that G-Ala does not block the binding of gp120 protein to CD4 receptor, nor does it affect the binding of virus to coreceptor. The results of sandwich Elisa, N-PAGE and CD showed that G-Ala could effectively prevent the formation of gp41 core hexamer. Further experiments show that G-Ala can not only bind to HIV-5-Helix protein, but also block the binding of PIE7 to the hydrophobic pocket of the surface of three-helix beam in gp41. These results suggest that G-Ala may bind to the hydrophobic pocket of the triple helix bundle surface of gp41 and inhibit the HIV-1 mediated fusion between the virus and cells by blocking the formation of the core hetamer of the fusion activity of gp41 and thus preventing the invasion of the virus.
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R512.91

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉雅琴,曾常茜,王冰梅,于力,陳鳳岐,邢曉秋;濾泡樹狀突細(xì)胞在HIV感染中的作用[J];北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1997年04期

2 程曉莉,蘇斌,馬平,吳榮璋,王莉麗,何建剛;安徽省1995—1999年HIV哨點(diǎn)監(jiān)測分析[J];安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2000年03期

3 張燕;2001年末HIV/AIDS全球形勢[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志;2002年04期

4 方學(xué)松,林楚炎,肖亮創(chuàng),張健民;ISO/IEC 17025在建立HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系中的應(yīng)用[J];中國國境衛(wèi)生檢疫雜志;2002年03期

5 王昌敏,錢文清,夏志剛,楊忠禮;HIV感染者肝功能損害的臨床實(shí)驗(yàn)研究[J];地方病通報(bào);2003年04期

6 于藝;避孕方法對(duì)預(yù)防性傳播疾病感染的利弊[J];國外醫(yī)學(xué).計(jì)劃生育分冊;1997年02期

7 楊雪源,夏隆慶;毛發(fā)紅糠疹及其治療[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2001年01期

8 劉淑貞,鄭錫文,傅繼華,顏江瑛,邢輝,康殿民,王少軍;山東新泰與湖北襄樊有償獻(xiàn)血員HIV感染對(duì)比研究[J];中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年01期

9 高玲,呂延成,馮佩富;1325例海洛因依賴者HIV檢測分析[J];中國藥物濫用防治雜志;2001年06期

10 黃起翡,高思維,薛艷光;馬尾口岸出入境人員疾病監(jiān)測結(jié)果分析[J];中國國境衛(wèi)生檢疫雜志;2001年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 馬輝;;HIV抗體陽性卡氏肺孢子蟲肺炎一例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

2 馮連貴;丁賢彬;盧戎戎;徐世明;郭曉嘉;楊明芳;徐靜;鄭建瓊;;青年學(xué)生中男男性行為人群HIV、梅毒感染率及估計(jì)HIV發(fā)病率的趨勢分析[A];重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)2010年論文集[C];2011年

3 毛青;;HIV/HCV合并感染時(shí)病毒間相互作用研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

4 趙紅心;;如何調(diào)整抗HIV治療方案[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

5 張彤;焦艷梅;吳昊;;HIV早期感染細(xì)胞因子水平與疾病進(jìn)程相關(guān)性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

6 董繼鵬;李洪娟;劉穎;王健;;273例HIV/AIDS人群臟腑熱態(tài)特征分析及其臨床意義[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)防治艾滋病分會(huì)第八次年會(huì)論文集[C];2011年

7 魯偉;李麗松;殷迎春;毛永惠;湯文山;陳粵麗;孫紹洪;劉鴻斌;孟麗蕊;徐穩(wěn);向文蔚;白園;黃金蓮;李雙華;夏紅;楊婧婷;鄒芳;張艷芬;;口腔頜面部為首發(fā)癥狀的HIV感染病例臨床分析[A];玉溪市醫(yī)學(xué)會(huì)第九屆口腔學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2009年

8 馬海莉;陳璐;;昆明地區(qū)70名獻(xiàn)血者HIV感染情況及行為特征分析[A];中國輸血協(xié)會(huì)第五屆輸血大會(huì)論文專集（摘要篇）[C];2010年

9 姚嵩;史四九;張澤坤;;安徽省HIV/AIDS患者異煙肼結(jié)核預(yù)防性治療初步研究進(jìn)展[A];2011年中國防癆協(xié)會(huì)全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

10 鄭毓芳;潘承恩;劉莉;張仁芳;齊唐凱;王江蓉;盧洪洲;;上海市公共衛(wèi)生臨床中心2640例自愿檢測HIV抗體人員總結(jié)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 南方日報(bào)記者 徐滔　鐘鍇 實(shí)習(xí)生 張芳圓;HIV自測— 恐艾人群的無效療傷[N];南方日報(bào);2011年

2 本報(bào)特約撰稿 謝小軍 微生物學(xué)博士;三十年苦戰(zhàn)HIV[N];大眾科技報(bào);2011年

3 駐京記者 賈巖;HIV快速診斷新秀登場[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

4 劉霞;美找出骨髓細(xì)胞抵抗HIV感染的關(guān)鍵蛋白[N];科技日報(bào);2011年

5 邱陽;向病毒基因研究進(jìn)軍[N];科技日報(bào);2004年

6 記者陳特安;加找出與“非典”有關(guān)的病毒基因序列[N];人民日報(bào);2003年

7 本報(bào)記者 張夢然;病毒預(yù)警 未雨綢繆[N];科技日報(bào);2010年

8 王迪;HIV藥物繁榮背后藏隱憂[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

9 段文利;淚腺、淚液等可能為HIV病毒“新?lián)c(diǎn)”[N];科技日報(bào);2011年

10 吳階平醫(yī)學(xué)基金會(huì)肝病防治指導(dǎo)委員會(huì)主任 王釗;HBV傳染性是HIV的50倍[N];健康報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 安泰;棉酚氨基酸衍生物抗I型人類免疫缺陷病毒活性與機(jī)制的研究[D];武漢大學(xué);2013年

2 吳鵬;中國HIV感染長期不進(jìn)展者與典型進(jìn)展者遺傳、免疫及HIV變異特點(diǎn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

3 馮婷婷;新型宿主因子在HIV感染和復(fù)制中作用及機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2011年

4 齊海燕;廣西地區(qū)HIV-1流行亞型、基因變異性分析及耐藥突變的實(shí)驗(yàn)研究[D];浙江大學(xué);2012年

5 江筠;蓮藕中抗氧化成分的抗HIV-1活性及其作用機(jī)制研究[D];南開大學(xué);2010年

6 韓雪;CBFβ對(duì)HIV-1 Vif蛋白功能及結(jié)構(gòu)影響的機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2012年

7 李琳;酸酐修飾卵清蛋白作為候選殺微生物劑預(yù)防HIV性傳播研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

8 傅卓華;德宏州HIV感染狀況不一致夫妻和農(nóng)村社區(qū)居民性行為網(wǎng)絡(luò)與艾滋病流行病學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

9 藍(lán)光華;南寧市男男性行為隊(duì)列人群HIV感染相關(guān)因素的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 陳軍;HIV感染中髓樣樹突狀細(xì)胞數(shù)量減少的機(jī)制及功能改變研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 江通天;艾滋病合并結(jié)核感染者HIV-1原發(fā)耐藥性分析[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 翟維維;云南地區(qū)HIV相關(guān)口腔皰疹病毒1、2、3和4型感染的初步研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

3 劉慧;臨床HIV/AIDS病例臨床流行病學(xué)及皮膚性病特征的回顧性分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

4 張昕;HIV/HCV共感染患者NK細(xì)胞數(shù)量與功能變化的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

5 安明暉;遼寧MSM人群HIV-1原發(fā)感染者病毒全基因組序列特征研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

6 趙鵬;HIV/HCV共感染者自然殺傷細(xì)胞表面活化性與抑制性受體表達(dá)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

7 何磊;HIV原發(fā)感染者自然殺傷細(xì)胞NKG2A/NKG2C受體變化研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

8 宇方;MSM人群HIV高危行為同伴群干預(yù)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

9 諶仲杰;帶藥物治療的類年齡結(jié)構(gòu)HIV/AIDS模型[D];信陽師范學(xué)院;2011年

10 郭會(huì)鵑;HIV/AIDS患者與平和質(zhì)人群臟腑熱態(tài)差異的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2010年

，

本文編號(hào)：2006312