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慢加急性肝衰竭患者中乙型肝炎病毒S區(qū)基因準(zhǔn)種與疾病關(guān)系的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-05-18 20:19

  本文選題:慢性乙型肝炎 + 乙型肝炎病毒; 參考:《蚌埠醫(yī)學(xué)院》2013年碩士論文


【摘要】:目的:本課題通過檢測(cè)慢性乙肝組和慢加急性肝衰竭組患者之間HBV基因S區(qū)準(zhǔn)種條帶數(shù),探討HBV基因的S區(qū)準(zhǔn)種的分布特點(diǎn)與肝臟疾病發(fā)展之間的關(guān)系。 方法:選取慢加急性肝衰竭患者20例以及對(duì)照組慢性乙型肝炎患者20例。取其空腹靜脈血,ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半,提取血清HBV-DNA,檢測(cè)HBV-DNA載量。測(cè)定HBV基因分型,將血清中HBV-DNA經(jīng)巢氏PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行2%的瓊脂糖凝膠電泳分析。對(duì)所有血清標(biāo)本進(jìn)行SSCP分析,以觀察患者血清中HBV-DNA的準(zhǔn)種情況。應(yīng)用SPSS17.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:1.兩組患者在性別、年齡、基因型和HBeAg的狀態(tài)之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。HBV-DNA載量、血清總膽紅素(TBIL)、凝血時(shí)間(PT)及凝血酶原活動(dòng)度(PTA%)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.慢性乙肝患者與肝衰竭患者準(zhǔn)種條帶間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),肝衰竭患者血清內(nèi)HBV-DNA基因S區(qū)的準(zhǔn)種復(fù)雜度高于慢性乙肝的患者。 3.在慢性乙肝的患者中HBV基因型為B型和C型的患者PCR-SSCP條帶數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在肝衰竭患者中HBV基因型為B型的患者準(zhǔn)種條帶數(shù)要多于C型的患者,,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。從總體上來說,HBV基因?yàn)锽型的準(zhǔn)種條帶數(shù)要多于C型感染者。 4.慢性乙肝和肝衰竭患者中HBeAg陰性的準(zhǔn)種條帶數(shù)大于HBeAg陽性的,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 5.慢乙肝和肝衰竭患者的準(zhǔn)種條帶數(shù)與其ALT和HBV-DNA載量進(jìn)行相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)ALT和HBV-DNA載量與準(zhǔn)種數(shù)之間無相關(guān)性,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論: 1.證實(shí)了未經(jīng)抗病毒治療的慢性乙肝及慢加急性肝衰竭體內(nèi)HBV基因S區(qū)有準(zhǔn)種的存在。 2.慢性乙肝患者SSCP準(zhǔn)種的條帶數(shù)比慢加急性肝衰竭患者的要少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.慢性乙肝患者中基因型為B型和C型的準(zhǔn)種條帶差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;肝衰竭患者中基因型為B型要比C型的準(zhǔn)種條帶數(shù)多?偟膩碚f,HBV基因?yàn)锽型的準(zhǔn)種條帶數(shù)要多于C型感染者。 4.慢乙肝患者和肝衰竭患者中,其HBeAg陰性的患者其準(zhǔn)種條帶數(shù)大于HBeAg陽性的患者。 5.ALT和HBV-DNA載量與準(zhǔn)種條帶數(shù)無線性相關(guān),說明準(zhǔn)種異質(zhì)性的增加與宿主、病毒自身、免疫機(jī)制以及外界環(huán)境有關(guān)。
[Abstract]:Objective: to investigate the relationship between the distribution of S region quasispecies of HBV gene and the development of liver disease by detecting the number of S region quasispecies of HBV gene in chronic hepatitis B group and chronic and acute hepatic failure group. Methods: 20 patients with chronic liver failure and 20 patients with chronic hepatitis B were selected. The serum HBV-DNA was extracted and the HBV-DNA load was detected by Elisa. The genotyping of HBV was determined. The products of HBV-DNA amplified by nested PCR in serum were analyzed by 2% agarose gel electrophoresis. All serum samples were analyzed by SSCP to observe the quasi-species of HBV-DNA in patients' serum. The data were analyzed by SPSS17.0 software package. The result is 1: 1. There was no significant difference in sex, age, genotype and HBeAg status between the two groups (P > 0.05).HBV-DNA). There was significant difference in serum total bilirubin (Tbilirubin), coagulation time (PTT) and prothrombin activity (P < 0.05) between the two groups. 2. There was significant difference in quasispecies bands between patients with chronic hepatitis B and patients with liver failure (P < 0.05). The quasispecies complexity of S region of HBV-DNA gene in serum of patients with liver failure was higher than that of patients with chronic hepatitis B. 3. There was no significant difference in the number of PCR-SSCP bands between patients with HBV genotype B and type C in patients with chronic hepatitis B (P > 0.05), but the number of quasispecies bands in patients with HBV genotype B was more than that in patients with type C (P < 0.05). Generally speaking, the number of B type quasispecies bands was more than that of C type infection. 4. In patients with chronic hepatitis B and liver failure, the number of HBeAg negative quasispecies bands was higher than that of HBeAg positive, the difference was statistically significant (P < 0.05). 5. The correlation analysis between the number of quasispecies bands and the load of ALT and HBV-DNA in patients with chronic hepatitis B and liver failure showed that there was no correlation between the number of ALT and HBV-DNA and the number of quasispecies, but the difference was not statistically significant (P > 0.05). Conclusion: 1. It was confirmed that there were quasispecies in S region of HBV gene in chronic hepatitis B and chronic and acute liver failure without antiviral therapy. 2. The number of SSCP quasispecies in chronic hepatitis B patients was less than that in chronic hepatitis B patients with acute liver failure. 3. There was no significant difference between genotype B and C in patients with chronic hepatitis B, but there were more quasispecies bands with genotype B in patients with liver failure than those with type C. Generally speaking, the number of B type quasi-species bands was higher than that of C-type infection. 4. In patients with chronic hepatitis B and liver failure, the number of quasispecies bands in HBeAg negative patients was higher than that in HBeAg positive patients. The quantity of 5.ALT and HBV-DNA was correlated with the number of quasispecies bands, indicating that the increase of quasispecies heterogeneity was related to host, virus itself, immune mechanism and external environment.
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R512.62

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